不同营养水平和粒度全混合日粮对绵羊瘤胃内环境的影响

不同营养水平和粒度全混合日粮对绵羊瘤胃内环境的影响

全混合日粮（tr）是一种用于反刍动物规范化和饲养的关键技术。在生产和加工mtr时，采用专门的搅拌机，将混合、切割和揉捏日粮的各部分，以确保动物饲料的精髓和粗素比例稳定，以及养分平衡。这一技术在美国、加拿大、日本等国家得到了推广和应用。中国已经开始采用这一技术。蒋涛等人使用了两种粮食作为饲料，并使用了粗素分离。这表明，mtr饲养技术可以有效防止反刍动物瘤的胃中毒。根据研究，粗饲料经过氨化和碱化处理，成熟并转化为mtr，以饲养山羊。提高日常饲料量，消化率和饲料转化率。冯加农和杨方湖对各种营养化水平的研究结果表明，适合短期山羊育肥。以上mtr在养羊业中的研究报道主要是人工mtr，对非tr和tr的机械加工以及粗素粒和养分的结合没有报道。在本试验中，我们将为羊的生存提供两个养分和两个粒度的四个tmr，以及在绵羊生产中使用mtr的基本数据。1材料和方法1.1中国肉羊饲养标准采用2×2二因子析因试验设计,A因子为营养水平,其中A1为1.0倍中国肉羊饲养标准(中华人民共和国农业行业标准,NY/T816-2004),A2为1.5倍中国肉羊饲养标准;B因子为青贮玉米前处理方式,B1为不粉碎,B2为粉碎处理.试验设预试期7d,正试期4d.1.2试验饲粮配方和设备的准备根据各饲料原料的干物质(drymatter,DM)、粗蛋白(crudeprotein,CP)、钙(Ca)和磷(P)含量,参照中国肉羊饲养标准中妊娠母羊前期营养需要量来设计饲粮配方(表1).用TMR搅拌机(司达特9SJW-700型)制作TMR.加工TMR时,B1中的青贮玉米不粉碎,B2中的青贮玉米用去掉筛片后的锤片式粉碎机(40型,宁夏中卫市天元锋机械制造有限责任公司)进行粉碎.谷物精料预先用粉碎机粉碎,然后按照先精后粗,先干后湿的顺序,依次加入精料、苜蓿干草和青贮玉米.制作好的TMR用宾州粗饲料分级筛(PSPS)(美国Nasco公司)评定粒度(表2).试验饲粮一次加工,置于1～3℃的封闭室内,避光保存.1.3试验方法及投料量选24只体况良好,体质量相近[(55.2±3.34)kg]的2岁左右空怀期小尾寒羊母羊,随机分为4组,每组6只.绵羊采用单栏饲养(2.5m×1.2m).试验前对羊舍、羊栏、食槽和水槽进行消毒.过渡期5d,每天用20%的试验日粮逐步替换原来日粮,每只绵羊每天投料量为1.6kg(按DM计算),等量饲喂3次(8∶00、14∶00和20∶00),自由饮水,并记录剩料量.1.4瘤液中总氮、氨氮、尿素氮和挥发性脂肪酸含量的测定在正试期结束后,绵羊于8∶00饲喂1次,分别在食前及食后2、4、6、8h用胃管从瘤胃中抽取50mL瘤胃液,立即测定pH.然后用4层纱布过滤,并按瘤胃液体积的1/100加入饱和氯化汞溶液(使酶灭活),最后分装于采样瓶中,置冰箱(-20℃)冷冻保存,用于测定瘤胃液的总氮、氨氮、尿素氮和挥发性脂肪酸(volatilefattyacid,VFA).1.5氨氮的测定瘤胃液pH用SartoriusPB-10型酸度计现场测定;总氮用凯氏定氮法测定;氨氮参照冯宗慈改进的比色法测定;尿素氮浓度采用二乙酰一肟法测定(试剂盒购买于南京建成生物工程研究所).VFA采用气相色谱仪(Agilent-6890N)测定.瘤胃液蛋白氮=瘤胃液总氮-瘤胃液氨氮-瘤胃液尿素氮1.6多重比较试验采用SPSS16.0软件,对数据进行两因子方差分析,用Tukey法进行多重比较.绵羊瘤胃液VFA体积百分数进行反正弦转换.试验结果用(x¯±s)表示.(x¯±s)表示.2结果与分析2.1对两组丙二醛的影响由表3可见,各处理绵羊的瘤胃液pH在6.21～6.80之间波动,采食后,pH先降低后升高,变化规律基本相同.在食后2～8h,采食含A1TMR的绵羊瘤胃液pH(6.47～6.71)高于采食A2TMR的绵羊(6.21～6.48).A因子对各处理绵羊食后2h和4h的瘤胃液pH有极显著影响(P<0.01),对各处理绵羊食后6h瘤胃液pH有显著影响(P<0.05).A×B交互作用对绵羊食后4h瘤胃液pH产生了显著影响(P<0.05),A1B1组绵羊瘤胃液pH极显著高于A2B1组(P<0.01).2.2两组大鼠食前后瘤液总氮浓度的变化由表4可见,采食A2TMR的绵羊瘤胃液总氮浓度(553.97～798.01mg/100mL)高于采食A1TMR的绵羊(270.87～438.04mg/100mL),A因子对各处理绵羊所有时间点的瘤胃液总氮浓度都产生了极显著影响(P<0.01).B因子对绵羊食前瘤胃液总氮浓度有显著影响(P<0.05).A×B交互作用对绵羊食后2h和8h瘤胃液总氮浓度有显著影响(P<0.05).在食后2h,A2B2组绵羊瘤胃液总氮浓度极显著高于A1B1组和A1B2组(P<0.01),A2B1组绵羊瘤胃液总氮浓度显著高于A1B1组(P<0.05).在食后8h,A2B2组绵羊瘤胃液总氮浓度极显著高于A1B1组和A1B2组(P<0.01),A2B1组绵羊瘤胃液总氮浓度显著高于A1B2组(P<0.05).在食后4h,A1B1组与A1B2组,A2B1组与A2B2组绵羊瘤胃液总氮浓度接近.2.3对大鼠瘤液氨氮浓度的影响由表5可知,各处理绵羊瘤胃液氨氮浓度变化趋势相近,在食后2h达到最高,然后逐渐降低.采食A2TMR的绵羊瘤胃液氨氮浓度有高于采食A1TMR的绵羊的趋势.在各时间点,采食B2TMR的绵羊瘤胃液氨氮浓度低于采食B1TMR的绵羊.A因子对食前、食后2h和食后4h的绵羊瘤胃液氨氮浓度产生了极显著影响(P<0.01).B因子对食后2、4、6h绵羊瘤胃液氨氮浓度有显著影响(P<0.05).A×B交互作用在食后4h对瘤胃液氨氮浓度产生了显著影响(P<0.05),A2B1组极显著高于A1B1组、A1B2组和A2B2组(P<0.01).2.4两组羊瘤兽药氨氮表达水平比较由表6可见,采食含A2因子TMR的绵羊瘤胃液尿素氮浓度(1.18～1.60mg/100mL)高于采食含A1因子TMR的绵羊(0.56～1.02mg/100mL).A因子对各时间点的绵羊瘤胃液尿素氮浓度都产生了极显著影响(P<0.01).B因子对食后2、6、8h的绵羊瘤胃液氨氮浓度有显著影响(P<0.05),对食后4h绵羊瘤胃液氨氮浓度有极显著影响(P<0.01).A×B交互作用对食前、食后6h和食后8h的绵羊瘤胃液氨氮浓度产生了显著影响(P<0.05).在食前,A2B1组和A2B2组绵羊瘤胃液氨氮浓度极显著高于A1B1组和A1B2组(P<0.01),在食后6h和8h,A1B1组绵羊瘤胃液氨氮浓度极显著低于A1B2组、A2B1组和A2B2组(P<0.01),A1B2组绵羊瘤胃液氨氮浓度显著高于A2B1组(P<0.05).2.5对大鼠说的影响由表7可见,采食含A2因子TMR的绵羊瘤胃液蛋白氮浓度(506.86～776.63mg/100mL)高于采食含A1因子TMR的绵羊(252.14～421.76mg/100mL).A因子对各时间点的绵羊瘤胃液蛋白氮浓度都产生了极显著影响(P<0.01).B因子对食前的绵羊瘤胃液蛋白氮浓度有显著影响(P<0.05).A×B交互作用对食后2h和8h的绵羊瘤胃液氨氮浓度产生了显著影响(P<0.05).在食后2h,A2B1组绵羊瘤胃液氨氮极显著高于A1B1组和A1B2组(P<0.01),A2B2组绵羊瘤胃液氨氮显著高于A1B2组(P<0.05).2.6不同主体间的交互作用显著影响tvfa的体积分数表8中列出了所采瘤胃液测定结果的平均值,采食A1和B1TMR的绵羊瘤胃液总挥发性脂肪酸(totalvolatilefattyacid,TVFA)浓度极显著高于采食A2和B2的绵羊(P<0.01).采食A2TMR的绵羊瘤胃液丁酸和其他酸占TVFA的体积分数极显著高于采食含A1因子TMR的绵羊(P<0.01).采食A1因子TMR的绵羊瘤胃液乙酸占TVFA的体积分数和乙酸/丙酸极显著高于采食A2TMR的绵羊(P<0.01).采食含B2因子TMR的绵羊其他酸占TVFA的体积分数显著高于采食A1的绵羊(P<0.05).A×B交互作用显著影响了绵羊瘤胃液乙酸和丙酸占TVFA的体积分数(P<0.05),极显著影响了乙酸/丙酸(P<0.01).A1B2组、A2B1组和A2B2组绵羊丙酸占TVFA的体积分数显著高于A1B1组(P<0.05),A2B1组绵羊丙酸占TVFA的体积分数显著高于A1B1组(P<0.05).3讨论3.1试验结果与分析瘤胃液pH可以综合反映瘤胃发酵水平,它受唾液分泌、饲粮性质、瘤胃内VFA及其他有机酸的生成、吸收和排出的影响.pH也是反映可消化碳水化合物发酵速率的指标之一.Nagaraja和Lechtenberg的研究表明,反刍动物瘤胃pH在低于5.0时,家畜出现临床性酸中毒;当pH在5.0～5.5时,家畜处于亚临床性酸中毒.瘤胃pH的正常变化范围为5.5～7.5.随动物采食呈周期性变化,瘤胃pH变化形式与幅度与饲料特性、饲喂方法和饲喂后时间有关,一般饲喂后2～6h达最低值.本试验结果表明,各处理绵羊的瘤胃液pH在6.21～6.80之间波动,均处于绵羊的正常生理范围内(5.5～7.5),相比以前报道的波动范围要小.采食后,pH先降低后升高,在食后8h升至最高,变化规律与郑琛和史清河的报道相似.pH降至最低点的时间与以上各研究结果之间略有差别,可能与饲粮的结构、物理形态、原料种类及其加工方法、饲喂方式等的不同有一定关系.pH先降低后升高的原因可能是TMR在消化过程中,瘤胃微生物分解纤维产生VFA,使瘤胃液pH下降,但绵羊在进行咀嚼和反刍活动时分泌大量唾液,唾液中的磷酸盐和碳酸氢盐可中和瘤胃中的酸性物质,使pH逐渐上升.本试验结果表明,采食A2TMR的绵羊瘤胃液pH变化范围(6.21～6.48)低于采食A1的绵羊(6.47～6.71).据报道,饲粮中精料比例对瘤胃液pH影响作用很大.1.5倍营养水平下TMR中精料比例增加,因精料发酵速度较快,单位质量产生的VFA比粗料多,且精料的颗粒小,密度大,采食和反刍的时间短,唾液分泌量相对减少,对瘤胃中酸性物质的中和作用降低,因而pH较低.本试验中TMR粒度对瘤胃液pH的影响不显著.TMR粒度对瘤胃液pH的影响在众多试验中结论并不一致,有研究表明,降低TMR中粗饲料长度可以降低瘤胃液pH,但也有研究表明,瘤胃液pH并未受到玉米青贮颗粒长短的影响.瘤胃饲料粒度的降低会增大粗饲料与微生物接触面积使得粗饲料消化更为完全,产生更多的VFA,同时由于反刍时间短唾液分泌量减少,但是由于瘤胃内容物的外流速度上升,饲喂不同粒度的TMR在瘤胃发酵、唾液分泌和外流速度方面的差异有可能相互平衡导致本试验中饲料粒度对瘤胃pH的影响差异不显著.3.2瘤液总氮和蛋白氮浓度的变化瘤胃液总氮包括氨氮、尿素氮、菌体蛋白氮、饲料中可溶解蛋白氮及唾液蛋白氮等,饲料蛋白质含量及降解率对其有直接的影响,与饲粮在瘤胃中滞留时间的长短也有密切的关系.郑琛的试验结果表明,各处理组绵羊瘤胃液总氮浓度在101.20～273.87mg/100mL之间变动,在食后2h下降到最低,然后逐渐上升,变化规律基本相同.本试验中,绵羊不同采样时间点的瘤胃液总氮和蛋白氮浓度均变化不大,但采食A2TMR的绵羊瘤胃液总氮浓度(553.97～798.01mg/100mL)和蛋白氮浓度(506.86～776.63mg/100mL)高于采食含A1因子TMR的绵羊总氮浓度(270.87～438.04mg/100mL)和蛋白氮浓度(252.14～421.76mg/100mL).A因子对不同采样时间的瘤胃液总氮和蛋白氮浓度都产生了极显著影响,但TMR粒度仅对食前瘤胃液总氮浓度有显著影响.瘤胃液氨氮浓度和尿素氮浓度相对于总氮浓度处于较低水平,对总氮浓度的贡献较小,因此瘤胃液总氮主要是由菌体蛋白和饲料中可溶解蛋白氮组成.提高TMR中精料比例后,饲粮中可溶解蛋白氮和碳水化合物比例升高,瘤胃微生物活性增加,合成更多的菌体蛋白,瘤胃液总氮和蛋白氮浓度均随之升高.本试验中不同粒度的TMR对食后瘤胃液总氮和蛋白氮浓度没有产生显著影响,虽然饲料粒度会影响瘤胃微生物对饲料氮的降解转化,但是由于瘤胃内吸收的氮仅有氨氮,且占总氮的比例很小,因而对瘤胃总氮和蛋白氮浓度的影响不显著.3.3食肉过程中瘤胃微生物对氨氮的浓度瘤胃液氨氮是饲料蛋白质、内源性蛋白质和其他非蛋白氮化合物分解的终产物,同时在有能量和碳链的情况下,又是瘤胃微生物合成菌体蛋白的主要氮源.瘤胃液氨氮浓度受瘤胃壁吸收和食糜排空速度的影响.Satter等报道,瘤胃微生物生长和合成蛋白质的最低氨氮浓度为5mg/100mL,当氨氮含量低于此浓度时,瘤胃微生物生长缓慢,碳水化合物的分解利用受到影响.在本试验中,各处理瘤胃液氨氮浓度都在5mg/100mL以上,在食后2h达到最高,然后逐渐降低,变化趋势相近.与郑琛和史清河的报道相符合.TMR的中精料比例增大后,瘤胃中可降解的饲料蛋白质含量增加,微生物分解生成的氨增加,而此时瘤胃液pH下降,瘤胃壁对氨的吸收量减少.因此本试验中采食A2TMR的绵羊瘤胃液氨氮浓度有高于采食A1TMR的绵羊的趋势.在各时间点,采食B2TMR的绵羊瘤胃液氨氮浓度均低于采食B1TMR的绵羊.可能是由于TMR粒度降低后,绵羊反刍时间减少,食糜在瘤胃中的滞留时间变短,瘤胃微生物与饲料颗粒的作用时间减少,导致氨氮浓度降低所致.3.4不同处理组的尿素氮浓度瘤胃液尿素氮浓度是反映瘤胃氮代谢的指标之一,其主要来源是饲粮和瘤胃氮素再循环.动物的采食速度、饲料尿素氮含量、再循环进入瘤胃的尿素氮量和瘤胃尿素氮的分解量都会对瘤胃尿素氮浓度产生影响.瘤胃中脲酶的活性很高,分解尿素的速度是微生物利用氨合成蛋白质的4倍,瘤胃中尿素氮浓度一般很低.本试验中,各处理组的尿素氮浓度在0.56～1.60mg/100mL之间.张昌吉的研究结果表明,瘤胃尿素氮浓度在0.27～0.52mg/100mL之间变化;郑琛报道瘤胃尿素氮浓度在1.63～4.35mg/100mL之间浮动.本试验与上述研究结果不一致,可能是由于饲料结构和饲喂间隔时间不同造成的.本试验中,采食A2TMR的绵羊瘤胃液尿素氮浓度(1.18～1.60mg/100mL)高于采食A1TMR的绵羊(0.56～1.02mg/100mL),可能是由于高营养水平下瘤胃中可降解的饲料蛋白质含量增加,微生物分解生成的氨增加,而瘤胃中氨浓度高时脲酶活性受到抑制,尿素分解速度下降的原因.采食B2TMR的绵羊瘤胃液尿素氮浓度高于采食B1的TMR绵羊,可能是由于TMR粒度降低后,瘤胃内氨氮浓度降低,瘤胃吸收的氨氮增加,因而再循环进入瘤胃的尿素数量增多的原因.3.5试验两组患者tvf