植物脱毒与组培快繁技术-红掌组培与快繁

模块五植物脱毒与组培快繁技术项目二红掌组培与快繁123CONTENTS离体根的培养离体叶的培养红掌叶片培养项目二红掌组培与快繁4继代增殖5生根及驯化移裁红掌组培与快繁红掌简介

红掌又名花烛、火鹤花、安祖花，为天南星科花烛属常绿多年生草本植物。由于红掌的种子繁殖时间较长，人工授粉较难；分株繁殖的繁殖系数又很低，远远不能满足市场的需求。因此，组培与快繁技术成为红掌种苗工厂化生产的主要手段。红掌组培与快繁红掌组培与快繁操作流程红掌组培与快繁三、红掌叶片培养红掌组培与快繁外植体的采集与处理

外植体：红掌展开后约2周的幼嫩叶片。

外植体预处理：流水冲洗10min。表面消毒：10%次氯酸钠浸泡10min，70%酒精浸泡25~30s，无菌水冲洗2次；0.1%升汞消毒8~10min，无菌水漂洗5次。红掌组培与快繁叶片诱导（初代）

初代培养基：MS+6-BA2mg/L+2,4-D0.2mg/L+蔗糖3%+琼脂0.7%；培养温度：24~28℃；光强：暗培养3~5d光照时间：12~14h/d；红掌组培与快繁红掌组培与快繁红掌叶片诱导愈伤红掌组培与快繁红掌愈伤诱导不定芽红掌组培与快繁四、继代增殖

分化培养基：MS+6-BA2mg/L+KT0.1mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂0.7%；继代培养基：MS+6-BA2mg/L+KT0.1mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂0.7%；红掌组培与快繁红掌不定芽增殖红掌组培与快繁红掌不定芽增殖红掌组培与快繁五、生根及驯化移裁

生根培养基：1/2

MS+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂0.7%；将2.5cm以上的有效不定芽转接到生根诱导培养基中，进行生根培养。15d左右开始生根，35d左右试管苗不定根数可达3-5条，生根率可达95%左右。红掌组培与快繁红掌组培与快繁驯化移裁当红掌苗有3条以上根、苗高4cm左右，不定根2cm长以上时，方可进行移栽。移栽前，先将瓶苗移至温室中炼苗5d左右，再开瓶炼苗2d，将苗轻轻取出并洗去所有培养基，然后栽植于灭过菌的混合基质中。红掌组培与快繁驯化移裁基质采用泥炭：珍珠岩：河沙，比例为1:2:1.浇透水，用0.1%多菌灵喷雾至叶滴液，覆膜控温保湿，温度25-30，相对湿度80-90%，遮光75%，待长出新叶后开始通风，逐渐拆膜，薄膜全揭开后，进行常规管理，待小苗长出3片以上新叶后，即可进行上盆或定植。红掌组培与快繁红掌组培与快繁红掌组培与快繁项目二红掌组培与快繁模块五植物脱毒与组培快繁技术123CONTENTS离体根的培养离体叶的培养红掌叶片培养项目二红掌组培与快繁45继代增殖生根及驯化移栽一、离体根的培养①生理代谢研究的优良实验体系；②研究器官分化形态建成的良好体系；③建立快速生长的根无性系；④进行诱变育种；一、离体根的培养1.理论和实践意义2.培养基

多为无机离子浓度低的怀特培养基。也可用2／3MS或1／2MS、B5培养基。注：离体根生长要求

提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好，加入B1、B6最重要，生长素对离体根影响不一致。培养温度25－27℃，暗光培养。一、离体根的培养3.根无性繁殖系的建立根无性繁殖系

无菌种子

1.2cm接后1周侧根反复转接一、离体根的培养4.植株再生培养离体根愈伤组织分化芽再生植株再分化培养基脱分化培养基一、离体根的培养人参根消毒、接种操作程序图一、离体根的培养二、离体叶的培养1.成苗途径与意义2.材料选择与消毒3.接种4.培养

二、离体叶的培养叶原基叶鞘叶片子叶叶柄1.成苗途径与意义愈伤组织茎和根

试管苗

不定芽二、离体叶的培养叶片诱导愈伤组织二、离体叶的培养A.幼嫩叶片流水冲洗；B.70－75%酒精漂洗10s（未充分展开的嫩叶用酒精棉球擦拭叶2面）；C.饱和漂白粉液浸3－15min（或在0.1%升汞液5-8min）；D.无菌水冲洗多次后，用无菌滤纸吸干水分2.材料选择与消毒二、离体叶的培养上表皮朝上接种培养基。最好带叶脉，注意极性3.接种外植体大小：5×5mm薄片（叶柄、子叶）二、离体叶的培养

培养基：MS、B5、White、N6；蔗糖3%；2.4－D利于愈伤组织形成，NAA抑制芽形成，利于根发生，KT、6BA利于芽形成。愈伤组织诱导：BA1-3mg/L,NAA0.25mg/L；分化培养：CTK2mg/L；

生根培养：NAA0.5－1.0mg/L

4.培养二、离体叶的培养培养条件：25－28℃，10－14