胃癌HER2检测亚太工作组建议

胃癌HER2检测亚太工作组建议目的了解制订亚太胃癌HER2检测建议的必要性了解HER2亚太工作组建议以及这些建议与国际指南的不同了解亚太建议对多学科诊断及治疗亚太胃癌患者的意义HER2，人表皮生长因子受体2.制订适用于亚太地区的指南的必要性关于胃癌HER2检测的现有指南主要依据欧洲的检测经验1

很多APAC国家的当地检测环境不同于欧洲、澳大利亚和美国APAC建议必须考虑到该区域实验室日常工作中所面临的挑战1Ruschoff,etal.ModPathol

2012;25:637–50.HER2，人表皮生长因子受体2.制订适用于亚太地区的指南的必要性修订或扩充了国际指南以体现APAC实验室的特有经验1强调本地检测环境提高区域适用性1Kim,etal.AsiaPacJClin

Oncol2014.亚太指南：概述Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014.HER2，人表皮生长因子受体2；IHC，免疫组织化学HER2多学科检测团队的原则实验室操作建议适当的标本类型胃癌的独有特征HER2基因扩增评估IHCHER2染色评估HER2检测解读和评分质量控制处理和固定抗原修复染色对照HER2多学科检测团队的原则HER2检测需要多学科协同准确及时地诊断患者的HER2状态需要肿瘤外科、肿瘤内科和病理团队关键成员之间的协作多学科团队应共同推动数个关键原则以保证检测质量Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014.HER2，人表皮生长因子受体2.胃癌检测的关键原则应在诊断时常规检查不可手术、局限性晚期、复发性和转移性胃癌和胃食管结合部（GEJ）癌患者的HER2过表达情况1HER2状态对于胃和GEJ癌同时具有预后和预测价值2–5能否获取HER2靶向治疗不应影响受试患者的决策确定HER2状态胃癌组织学诊断的时间应尽可能短1胃和GEJ癌病情进展迅速、复发率高必须借助对患者HER2状态的全面了解制定治疗计划1HER2报告应提供确定性诊断不应提交或接受不确定的结果HER2检测应尽可能自动化以提供更精确和可靠的结果11Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014;2.Bang,etal.Lancet2010;28:687–97;3.Ruschoff,etal.ModPathol

2012;25:637–50;4.Kim,etal.AnnSurg

Oncol

2011;18:2833–40;5.Gomez-Martin,etal.Clin

Transl

Oncol

2011;13:636–51.GEJ，胃食管结合部；HER2，人表皮生长因子受体2.实验室建议

影响检测结果的重要参数

合格的标本手术切除和活检标本均可接受1

更常使用活检标本，因为很多晚期/转移性胃癌常不可手术4-6处新鲜肿瘤组织的活检标本可以接受1肿瘤组织数量不足不能解释异质性，并会提高假阴性结果的风险2,3受测活检组织数量不同可能是亚太地区HER2阳性率不同的原因4-6处活检标本较国际指南中的6-8处活检标本更有可操作性4

不建议使用组织微阵列进行常规标本评估1不能完全代表异质性1Kim,etal.AsiaPacJClin

Oncol

2014;2.Warneke,etal.AnnOncol

2013;24:725–33;3.Lee,etal.EurJCancer2013;49:1448–57;4.Ruschoff,etal.ModPathol

2012;25:637–50.HER2，人表皮生长因子受体2.处理和固定应在切除20分钟内将活检标本置于10%NBF内1应在切除后1小时内将手术切除标本置于

10%NBF内1Ruschoff,etal.ModPathol2012;25:637–50.NBF，中性缓冲福尔马林冷缺血时间和经验证的方案1冷缺血时间=组织切除到开始福尔马林固定之间的时间可影响蛋白表达，使HER2检测结果解释不准确，导致假阴性结果2,3采用指南建议范围之外的冷缺血时间必须经过验证应分别验证活检和手术切除标本。验证必须将标本固定地点（是新鲜转运至实验室，还是在手术室内开始固定）考虑在内在手术室需要做的：应在检查申请单中注明切除和置于固定剂的时间应将标本置于耐用的尺寸适当的容器内，浸泡于10%NBF内在浸入前应切开手术标本并标记方向1Kim,etal.AsiaPacJClin

Oncol

2014;2.Yildiz-Aktas,etal.ModPathol

2012;25:1098-105;3.Neumeister,etal.JNatlCancerInst

2012;104:1815–24.HER2，人表皮生长因子受体2；NBF，中性缓冲福尔马林固定：一个影响检测结果的重要因素可变且未经验证的检测流程在亚太地区常见，这是结果不可靠的主要原因标本固定受以下因素影响：温度渗透速率标本尺寸（最好厚度不超过4mm）固定剂与组织体积的比值pH值固定时间必须优化并验证这些参数Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014.指南对固定的建议概述参数建议冷缺血至置于固定剂的时间活检标本<20分钟手术切除标本<1小时固定剂类型10%NBF固定剂与组织体积的比值10：1固定时间8–72小时（应分别验证活检和手术切除标本的时间）Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014.NBF，中性缓冲福尔马林远距离的样本运送检测实验室应与当地实施组织采样的中心密切协同以确保对标本进行适当的运送准备如果标本将在已验证的固定时间内到达HER2检测实验室：当地中心应根据建议开始固定应固定标本，密封在适合长距离运输的容器内如果标本将在已验证的固定时间以外到达HER2检测实验室：应在运输之前处理标本，用蜡块包埋Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014.HER2，人表皮生长因子受体2.抗原修复1推荐自动控温抗原修复即使是自动化系统也必须优化，并根据生产商建议进行验证抗原修复不佳是导致假结果的常见原因过度修复可能活化内源性生物素，导致基于亲和素-生物素染色检测中过强的背景染色，并可导致假阳性结果21Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014;2.Bussolati,etal.Histopathology1997;31:400–7.检测1实验室应使用标准化的商用IHC和ISH分析可能与可靠性和重复性差相关应建立并验证胃癌标本专用的检测流程所有检测必须在实验室内验证不同的IHC抗体导致不同的染色强度可能影响阳性率2为无、低和高水平的HER2蛋白表达生成参考图像以进行标准化评分1Kim,etal.AsiaPacJClin

Oncol

2014;2.Cho,etal.ModPathol

2013;26:677-84.HER2，人表皮生长因子受体2；IHC，免疫组织化学；ISH，原位杂交对照每个标本玻片上都应有HER2表达水平明确的对照用于检测假阳性和假阴性结果IHC：对照应包括无（IHC0）和强IHC染色（IHC3+)的切片如果可能还应包括不确定染色（IHC2+)应使用与胃癌标本相似的固定剂、处理和石蜡包埋技术准备对照样品Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014.HER2，人表皮生长因子受体2；IHC，免疫组织化学胃癌HER2检测结果解读和评分建议胃癌的独有特征胃癌是一种形成腺体和生成粘液的肿瘤，呈不完全基底侧方/侧方染色模式胃癌的结果解读和评分指导原则不同于乳腺癌将乳腺癌的指导原则用于胃癌标本将使HER2阳性标本评为阴性Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014.HER2，人表皮生长因子受体2.乳腺癌和胃癌的区别乳腺癌图像由Dako回赠；胃癌图像来自F.Hoffmann-L；；aRocheGOJ，胃-食管结合部；IHC,免疫组织化学IHC0IHC1+IHC3+IHC2+乳腺癌胃癌由于组织和生物学差异，乳腺癌和胃及胃食管癌的评分不同胃癌中异质性染色常见1,2存在于高达30%的HER2阳性胃癌病例中3更常见于IHC2+病例或混合组织学分型内4影响检测的各个阶段，从采样到评分问题尽管使用现行评分标准分类为HER2阴性，阳性染色细胞<10%的肿瘤对HER2靶向治疗有染色吗？1Hofman,etal.Histopathology2008;52:797–805;2.Jouret-Mourin,etal.ActaGastroenterolBelg2012;75:9–13;3.Ruschoff,etal.ModPathol2012;25:637–50;4.Cho,etal.AnnSurgOncol2013;20:477–84.HER2，人表皮生长因子受体2；IHC，免疫组织化学解释异质性：IHC评分Kim,etal.AsiaPacJClin

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2014.HER2，人表皮生长因子受体2；IHC，免疫组织化学在<10%的细胞中观察到强、完全/基底侧方或侧方膜染色在不同的蜡块切片上重复ICH染色仍不能确定?使用ISH确定HER2基因扩增和最终HER2状态原发和转移性肿瘤的不一致性原发和转移性胃癌间的HER2状态不一致并不罕见1,2IV期病变：应在原发和远端转移样本中进行HER2检测（如可能）3应在做出最终治疗决定前将不一致的证据报告至肿瘤学家31Cho,etal.ModPathol

2013;26:677-84;2.Lee,etal.EurJCancer2013;49:1448–57;3.Kim,etal.AsiaPacJClin

Oncol

2014.HER2，人表皮生长因子受体2.胃癌HER2检测程序IHC是胃癌的主要检测方法1曲妥珠单抗可为高表达HER2蛋白的患者提供最大获益(曲妥珠单抗胃癌[ToGA]试验)2ISH用于IHC不确定病例的HER2状态确认1首选亮视野ISH法以有效确定HER2扩增区域澳大利亚胃癌HER2检测研究(GaTHER)认为IHC3+强烈提示阳性ISH结果31Kim,etal.AsiaPacJClin

Oncol

2014;2.Bang,etal.Lancet2012;376:687–97;3.Fox,etal.AmJSurg

Pathol

2012;36:577–82.HER2，人表皮生长因子受体2；IHC，免疫组织化学；ISH，原位杂交使用IHCHER2染色评估侵袭性癌评分手术标本染色模式活检标本染色模式IHC0(阴性)无染色或<10%肿瘤细胞出现膜染色无染色或无任何肿瘤细胞出现膜染色IHC1+(阴性)≥10%肿瘤细胞的膜染色弱/几乎不能发现；细胞仅有部分膜有染色肿瘤细胞成簇†，但膜染色弱/几乎不能发现，不论染色肿瘤细胞百分比IHC2+(不确定)≥10%肿瘤细胞出现弱至中度的完全基底侧方或侧方膜染色肿瘤细胞成簇†，弱至中度的完全基底侧方或侧方膜染色，不论染色肿瘤细胞百分比IHC3+(阳性)≥10%肿瘤细胞出现强、完全基底侧方或侧方膜染色肿瘤细胞成簇†，强、完全的基底侧方或侧方膜染色，不论染色肿瘤细胞百分比1Bang,etal.Lancet2012;376:687–97.HER2，人表皮生长因子受体2；IHC，免疫组织化学†

对于活检无百分比截断值；单需要至少5个阳性细胞成簇摘自Bang,etal.1

显微镜放大倍数法则1关联染色强度和显微镜放大倍数与IHC评分1可提高IHC和ISH结果的一致性21Ruschoff,etal.ModPathol2012;25:63