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文档简介
第十章抗原和抗体的制备与应用抗原——是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。抗原的基本特性:①诱导免疫应答的能力,即免疫原性。②与免疫应答的产物发生反应,即抗原性(免疫反应性)。免疫原——具有免疫原性的物质
免疫原性的化学基础化学组成
分子量
化学结构
大分子蛋白、多糖等﹥10000具有免疫原性;4000﹤免疫原﹤10000呈弱免疫原性
;4000﹤一般不具有免疫原性。一般而言,分子结构和空间结构愈复杂的物质免疫原性愈强人工抗原人工抗原:用化学合成法或基因重组法制备含有已知化学结构决定簇的抗原,称之为人工抗原。①人工结合抗原:将无免疫原性的简单化学基团与蛋白质载体偶联,或将无免疫原性的有机分子如二硝基苯(DNP)或三硝基苯(TNP)与蛋白质载体结合,形成载体-半抗原结合物,均属人工结合抗原。②人工合成抗原:用化学方法将活化氨基酸聚合,使之成为合成多肽。只由一种氨基酸形成的聚合体称为同聚多肽,如由左旋赖氨酸形成的共同聚多肽(PLL)。③基因工程抗原:将编码免疫原性氨基酸序列的基因克隆化并与适当载体(如细菌粒或病毒)DNA分子相结合,然后引入受体细胞中(如原核细胞的大肠杆菌或真核细胞酵母菌及哺乳类动物细胞)使之表达,即能获得免疫原性之融合蛋白,经纯化后可做为疫苗,此即基因工程疫苗。人工结合抗原半抗原:能与对应抗体结合出现抗原-抗体反应、又不能单独激发人或动物体产生抗体的抗原。它只有反应原性,不具免疫原性,又称不完全抗原。一些比一般半抗原分子量小,但有特异结构的化学活性基团物质(如青霉素、磺胺剂等),称为简单半抗原。载体蛋白:制作人工结合抗原时与半抗原进行偶联的具有免疫原性的生物大分子,主要为大分子的蛋白质。如:牛血清白蛋白(BSA)。载体蛋白半抗原偶联桥
人工抗原合成常用的载体
载体表面应首先应具有化学活性基团。
载体应具备一定的容量,可以偶联足够的分子。
载体应该是惰性的,不应干扰偶联分子的功能。
载体应具有足够的稳定性,且应该是廉价易得的。
牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、钥孔血蓝蛋白(KLH)、人血清白蛋白(HSA)及人工合成的多聚赖氨酸(PLL)等是常用的载体蛋白。载体的特点一、抗体的一些基本概念单克隆抗体
(MonoclonalAntibody,McAb)
单个B淋巴细胞克隆所分泌的抗体多克隆抗体
(PolyclonalAntibody)
多个B淋巴细胞克隆所分泌的抗体
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