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文档简介

实验

水中细菌总数的测定实验目的掌握水样的采取方法。掌握水样细菌总数测定的方法；了解水源水的平板菌落计数的原则。学习检测水中大肠菌群的原理和方法。了解大肠菌群数量与水质状况的关系。了解大肠菌群的数量在饮水中的重要性。实验原理饮用水是否合乎标准，通常通过水中细菌总数和大肠菌群数来确定。细菌总数是指1毫升水样在一定的培养基平板（普通琼脂培养基）中，37℃24小时培养后所生长的菌落数，此值仅是一种近似值。一般规定，1毫升自来水的总菌数不得超过100个。如果水源被粪便污染，则有可能也被肠道病原菌污染而引起伤寒、痢疾、霍乱等肠道病的流行，但肠道病原菌在水中数量较少，又易变异与死亡，故从水中特别是自来水中分离出病原菌，常常有困难。而大肠菌群是肠道好氧菌中最普遍和数量最多的一种，所以常将其作为粪便污染的标志，即根据水中大肠菌群的数目来判断水源是否被粪便所污染，并间接推测水源受肠道病原菌污染的可能性。一般规定每1000毫升自来水中大肠菌群不超过三个。实验材料普通琼脂培养基；乳糖蛋白胨发酵管；3倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管，复红亚硫酸钠培养基。无菌空瓶；灭菌水；灭菌培养皿、吸管、试管。自来水、池水、河水或湖水实验步骤水样的采取自来水：先将自来水龙头用火焰灼烧3min，再开放水龙头水流5min，以灭菌三角烧瓶接取水样。池水、河水或湖水：取距水面10-15cm的深层水样，将具塞玻璃瓶瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，盛满后将瓶塞盖好再从水中取出。细菌总数测定

1）自来水

吸取1ml水样与平皿内冷却至45℃的培养基混匀，于37℃下培养24h计数，共两皿。同时做不接水样的空白皿对照试验。

2）

池水、河水或湖水

采用平板菌落计数法：一般中等污秽水样，取10－1、10－2、10－3三个稀释度，污秽严重的取10－2、10－3、10－4三个稀释度。

最后三个稀释度的稀释水样重复上述自来水的细菌测定试验。水样稀释过程示意图菌落计数方法

（1）计算相同稀释度的平均菌落数

有较大片菌苔生长时，弃用；以无片菌苔生长的平皿计数。

若片菌苔大小不到培养皿的一半，其余一半分布均匀，将此一半计数×2

（2）选择平均菌落数在30～300之间的平板

只有一个符合此范围时，以该平均菌落数乘稀释倍数。

有两个在30～300间时，按两者菌落总数比值决定：比值小于2，取平均；比值大于2，取较小的菌落总数。

（3）所有菌落数均大于300，取稀释度最高的平均菌落数乘稀释倍数。

（4）

所有菌落数均小于30，取稀释度最低的平均菌落数乘稀释倍数。

（5）

所有菌落数均不在30～300之间，以最接近30或300的平均菌落数乘稀释倍数。计算菌数落总数方法举例

例次不同稀释的平均菌落数两个稀释度菌落数之比菌落总烽（个/ml）10-110-210-31136516420--16400或1.6×10422760295461.637750或3.8×10432890271602.227100或2.7×1044无法计数1650513--513000或5.1×10552

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