细胞受体及重要的细胞信号转导途径

细胞受体类型、特点及重要的细胞信号转导途径学院：动物科学技术学院专业：动物遗传育种与繁殖姓名：李波学号：050509

目录1、细胞受体类型及特点 31.1离子通道型受体 31.2G蛋白耦联型受体 41.3酶耦联型受体 42、重要的细胞信号转导途径 52.1细胞内受体介导的信号传递 52.2G蛋白偶联受体介导的信号转导 62.2.1激活离子通道的G蛋白偶联受体所介导的信号通路 72.2.2激活或克制腺苷酸环化酶的G蛋白偶联受体 82.2.3激活磷脂酶C、以lP3和DAG作为双信使G蛋白偶联受体介导的信号通路 92.2酶联受体介导的信号转导 112.2.1受体酪氨酸激酶及RTK-Ras蛋白信号通路 112.2.2P13K-PKB(Akt)信号通路 122.2.3TGF-p—Smad信号通 142.2.4JAK—STAT信号通路 15

1、细胞受体类型及特点受体(receptor)是一种能够识别和选择性结合某种配体(信号分子)的大分子物质，多为糖蛋白，普通最少涉及两个功效区域，与配体结合的区域和产生效应的区域，当受体与配体结合后，构象变化而产生活性，启动一系列过程，最后体现为生物学效应。受体与配体问的作用品有3个重要特性：①特异性；②饱和性；③高度的亲和力。根据靶细胞上受体存在的部位，可将受体分为细胞内受体(intracellularreceptor)和细胞表面受体(cellsurfacereceptor)。细胞内受体介导亲脂性信号分子的信息传递，如胞内的甾体类激素受体。细胞表面受体介导亲水性信号分子的信息传递，膜表面受体重要有三类：①离子通道型受体(ion—channel—linkedreceptor)；②G蛋白耦联型受体(G—protein—linkedreceptor)；③酶耦联的受体(enzyme—linkedrecep—tor)。第一类存在于可兴奋细胞。后两类存在于大多数细胞，在信号转导的早期体现为激酶级联事件，即为一系列蛋白质的逐级磷酸化，借此使信号逐级传送和放大。1.1离子通道型受体离子通道型受体是一类本身为离子通道的受体，即配体门通道(1igand—gatedchannel)，重要存在于神经、肌肉等可兴奋细胞，其信号分子为神经递质。神经递质通过与受体的结合而变化通道蛋白的构象，造成离子通道的启动或关闭，变化质膜的离子通透性，在瞬间将胞外化学信号转换为电信号，继而变化突触后细胞的兴奋性。如：乙酰胆碱受体以三种构象存在，两分子乙酰胆碱的结合能够使之处在通道开放构象，但该受体处在通道开放构象状态的时限仍十分短暂，在几十毫微秒内又回到关闭状态。然后乙酰胆碱与之解离，受体则恢复到初始状态，做好重新接受配体的准备。离子通道型受体分为阳离子通道，如乙酰胆碱、谷氨酸和五羟色胺的受体，和阴离子通道。1.2G蛋白耦联型受体三聚体GTP结合调节蛋白(trimericGTP—bindingregulatoryprotein)简称G蛋白，位于质膜胞质侧，由a、p、-／三个亚基构成，a和7亚基通过共价结合的脂肪酸链尾结合在膜上，G蛋白在信号转导过程中起着分子开关的作用，当a亚基与GDP结合时处在关闭状态，与GTP结合时处在启动状态，“亚基含有GTP酶活性，能催化所结合的ATP水解，恢复无活性的三聚体状态，其GTP酶的活性能被RGS(regulatorofGproteinsignaling)增强。RGS也属于GAP(GTPaseactivatingprotein)。G蛋白耦联型受体为7次跨膜蛋白(图10—6)，受体胞外构造域识别胞外信号分子并与之结合，胞内构造域与G蛋白耦联。通过与G蛋白耦联，调节有关酶活性，在细胞内产生第二信使，从而将胞外信号跨膜传递到胞内。G蛋白耦联型受体涉及多个神经递质、肽类激素和趋化因子的受体，在味觉、视觉和嗅觉中接受外源理化因素的受体亦属G蛋白耦联型受体。1.3酶耦联型受体酶耦联型受体(enzymelinkedreceptor)分为两类，其一是本身含有激酶活性，如肽类生长因-子(EGF，PDGF，CSF等)受体；其二是本身没有酶活性，但能够连接非受体酪氨酸激酶，如细胞因子受体超家族。这类受体的共同点是：①普通为单次跨膜蛋白；②接受配体后发生二聚化而激活，起动其下游信号转导。已知酶耦联型受体有六类：①受体酪氨酸激酶；②酪氨酸激酶连接的受体；③受体酪氨酸磷脂酶；④受体丝氨酸／苏氨酸激酶；⑤受体鸟苷酸环化酶；⑥组氨酸激酶连接的受体(与细菌的趋化性有关)。2、重要的细胞信号转导途径2.1细胞内受体介导的信号传递由于受体分子在细胞上存在部位的不同，因此其信号跨膜转导的方式也有不同。与细胞内受体互相作用的信号分子是某些亲脂性小分子，能够透过疏水性的质膜进入细胞内与受体结合而传输信号。类固醇(steroid)激素、视黄酸(retinoicacid)、维生素D和甲状腺素(thyroidhormone)的受体在细胞核内。这类信号分子与血清蛋白结合运输至靶组织并扩散跨越质膜进入细胞内，通过核孔与特异性核受体(nuclearreceptor)结合形成激素一受体复合物并变化受体构象；激素一受体复合物与基因特殊调节区又称激素反映元件(hormoneresponseelement，HRE)结合，影响基因转录。类固醇激素诱导的基因活化普通分为两个阶段：①快速的初级反映阶段，直接激活少数特殊基因转录；②延迟的次级反映阶段，初级反映的基因产物再激活其它基因转录，对初级反映起放大作用。甲状腺素也是亲脂性小分子，作用机理与类固醇激素相似，但也有个别亲脂性小分子(如前列腺素)，其受体在细胞质膜上。NO是一种含有自由基性质的脂溶性气体分子，可透过细胞膜快速扩散，作用邻近靶细胞发挥作用。由于体内存在O：及其它与NO发生反映的化合物(如超氧离子、血红蛋白等)，因而NO在细胞外极不稳定，其半衰期只有2～30S，只能在组织中局部扩散，被氧化后以硝酸根(NO，一)或亚硝酸根(NO!一)的形式存在于细胞内外液中。血管内皮细胞和神经细胞是NO的生成细胞，NO的生成需要NO合酶的催化，以L一精氨酸为底物，以还原型辅酶1I(NADPH)作为电了．供体，等物质的量地生成NO和L一瓜氨酸。NO没有专门的储存及释放调节机制，作用于靶细胞NO的多少直接与NO的合成有关。NO这种可溶性气体作为局部介质在许多组织中发挥作用，它发挥作用的重要机制是激活靶细胞内含有鸟苷酸环化酶(G—cyclase，GC)活性的NO受体。内源性NO由NOS催化合成后，扩散到邻近细胞，与鸟苷酸环化酶活性中心的Fe2+结合，变化酶的构象，造成酶活性增强和cGMP水平增高。cGMP的作用是通过cGMP依赖的蛋白激酶G(PKG)活化，克制肌动一肌球蛋白复合物信号通路，造成血管平滑肌舒张(H911)。另外，心房排钠肽(atrialnatriureticpeptide，ANP)和某些多肽类激素与血管平滑肌细胞表面受体的结合，也会引发血管平滑肌舒张，这些细胞表面受体的胞质构造域也含有内源性鸟苷酸环化酶活性，通过类似的机制调节心肌的活动。NO对血管的影响能够解释为什么硝酸甘油(nitroglycerin)能用于治疗心绞痛，硝酸甘油在体内转化为NO，可舒张血管，从而减轻心脏负荷和心肌的需氧量。NO也由许多神经细胞产生并传递信号，在参加大脑的学习记忆生理过程中含有重要作用。大脑海马某些区域在受到重复刺激后可产生一种持续增强的突触效应，称为长时程增强作用(10ng-termpotentiation，LTP)，是学习和记忆的分子基础。LTP的产生涉及神经元间突触连接重构，这一过程既需要突触前神经元释放神经递质作用于突触后膜，也需要突触后神经元将信息、反馈到突触前膜，NO就充当了这一逆行信使的角色。NO作为LTP的逆行信使弥散至突触前末梢，刺激谷氨酸递质不停释放，从而对LTP效应的维持起增进作用。2.2G蛋白偶联受体介导的信号转导G蛋白偶联受体(GPCR)是细胞表面受体中最大的多样性家族，统计表明，现有25％的临床处方药品G蛋白是三聚体GTP结合调节蛋白(trimericGTP—bindingregulatoryprotein)的简称，位于质膜内胞浆一侧，由Gα，Gβ，Gγ三个哑基构成，Gβ和Gγ亚基以异二聚体形式存在，Gα和Gβγ肌亚基分别通过共价结合的脂分子锚定在质膜上。Gα亚基本身含有GTPase活性，是分子开关蛋白。当配体与受体结合，三聚体G蛋白解离，并发生GDP与GTP交换，游离的Gα-GTP处在活化的启动状态，造成结合并激活效应器蛋白，从而传递信号；当Gα-GTP水解形成Gα-GDP时，则处在失活的关闭状态，终止信号传递并造成三聚体G蛋白的重新装配，恢复系统进入静息状态。由G蛋白偶联受体所介导的细胞信号通路(signal—ingpathway)按其效应器蛋白的不同，可分辨为3类：①激活离子通道的G蛋白偶联受体；②激活或克制腺苷酸环化酶(adenylylcyclase)，以cA=1\*GB2⑴MP为第二信使的G蛋白偶联受体；③激活磷脂酶C(phospholipaseC，PLC)，以IP、和DAG作为双信使的G蛋白偶联受体。2.2.1激活离子通道的G蛋白偶联受体所介导的信号通路当受体与配体结合被激活后，通过偶联G蛋白的分子开关作用，调控跨膜离子通道的启动与关闭，进而调节靶细胞的活性，如心肌细胞的M乙酰胆碱受体和视杆细胞的光敏感受体，都属于这类调节离子通道的G蛋白偶联受体。(1)心肌细胞上M乙酰胆碱受体激活G蛋白启动K+通道M乙酰胆碱受体(muscarinicacetylcholinereceptor)在心肌细胞膜上与Gi蛋白偶联，乙酰胆碱配体与受体结合使受体活化，造成Gi。亚慕结合的GDP彼GTP取代，引发三聚体Gi蛋白解离，使G。亚基得以释放，进而致使心肌细胞质膜上有关的效应器K+通道启动，随即引发细胞内K+外流，从而造成细胞膜超极化(hyperpolarization)，减缓心肌细胞的收缩频率(㈥9—14)。陔成果已被体外实验所证明。许多神经递质受体是G蛋白偶联受体，有些效应器蛋白是Na一或K一通道。神经递质与受体结合引发G蛋白偶联的离子通道的开放或关闭，进而造成膜电位的变化。(2)Gt蛋白偶联的光敏感受体的活化诱发cGMP门控阳离子通道的关闭人类视网膜含有两类光受体(photoreceptor)，负责视觉刺激的初级感受。视锥细胞光受体与色彩感受有关；视杆细胞光受体接受弱光刺激。视紫红质(rhodopsin)是视杆细胞Gt蛋白偶联的光受体，定位在视杆细胞外段上千个扁平膜盘上，三聚体G蛋白与视紫红质偶联，普通称之为传导素(transducin，Gt)。人类视杆细胞含有大概4×107个视紫红质子，构成7次跨膜的视蛋白(opsin)与光吸取色素共价连接。2.2.2激活或克制腺苷酸环化酶的G蛋白偶联受体在绝大多数哺乳动物细胞中，G蛋白偶联受体介导的信号通路遵照普遍的转导机制。在该信号通路中，Gα亚基的首要效应酶是腺苷酸环化酶，通过腺苷酸环化酶活性的变化调节靶细胞内第二信使cAMP的水平，进而影响信号通路的下游事件。这是真核细胞应答激素反映的重要机制之一。不同的受体一配体复合物或者刺激或者克制腺苷酸环化酶活性，这类调控系统重要涉及5种蛋白组分：①刺激性激素的受体(receptorforsitimulatoryhormone，Rs)，②克制性激素的受体(receptorforinhibitoryhormone，Ri)，③刺激性G蛋白(sitimulatoryG—proteinscomplex，Gs)，④克制性G蛋白(inhibitoryG—proteinscomplex，Gi)，⑤腺苷酸环化酶(adenylylcyclase，AC)。(1)cAMP-PKA信号通路对肝细胞和肌细胞糖原代谢的调节正常人体维持血糖水平的稳态，需要神经系统、激素及组织器官的协同调节。肝和肌肉是调节血糖浓度的重要组织。脑组织活动对葡萄糖是高度依赖的，因而在应答胞外信号的反映中，cAMP水平会发生快速变化，几乎住20S内cAMP水平会从5X10-8mol／L上升到10-6mol／L水平。细胞表面G蛋白偶联受体应答多个激素信号埘血糖浓度进行调节。以肝细胞和骨骼肌细胞为例，cAMP—PKA信号对细胞内糖原代谢起核心调控作用，这是一种短期的快速应答反映。当细胞内cAMP水平增加时，cAMP依赖的PKA被活化，活化的PKA首先磷酸化糖原磷酸化酶激酶(GPK)，使其激活，继而使糖原磷酸化酶(GP)彼磷酸化而激活，活化的GP刺激糖原的降解，生成葡糖一1一磷酸；另首先，活化的PKA使糖原合酶(GS)磷酸化，克制其糖原的合成。另外，活化的PKA还能够使磷蛋白磷酸酶克制蛋白(IP)磷酸化而被激活，活化的IP与磷蛋白磷酸酶(PP)结合并使其磷酸化而失活(图9一19A)；当细胞内cAMP水平减少时，cAMP依赖的PKA活性下降，致使磷蛋白磷酸酶克制蛋白(IP)磷酸化过程逆转，造成磷蛋白磷酸酶(PP)被活化。活化PP使糖原代谢中GPK和GP去磷酸化，从而减少其活性，造成糖原降解的克制，活化PP还促使GS去磷酸化，成果GS活性增高，从而增进糖原的合成。(2)cAMP—PKA信号通路对真核细胞基因体现的调控cAMP—PKA信号通路对细胞基因体现的调节是一类细胞应答胞外信号缓慢的反映过程，由于这一过程涉及细胞核机制，因此需要几分钟乃至几小时。这一信号通路控制多个细胞内的许多过程，从内分泌细胞的激素合成到脑细胞有关长久记忆所需蛋白质的产生。该信号通路涉及的反映链可表达为：激素一G蛋白偶联受体一G蛋白一腺苷酸环化酶一cAMP—cAMP依赖的蛋白激酶A一基因调控蛋白一基因转录。信号分子与受体结合通过Gα激活腺苷酸环化酶，造成细胞内cAMP浓度增高，cAMP与PKA调节亚基结合，造成催化亚基释放，被活化的PKA其催化亚基转位进入细胞核，使基因调控蛋白(cAMP应答元件结合蛋白，CREB)磷酸化，磷酸化的基因调控蛋白CREB与核内CREB结合蛋白(CBP)特异结合形成复合物，复合物与靶基因调控序列结合，激活靶基因的体现。2.2.3激活磷脂酶C、以lP3和DAG作为双信使G蛋白偶联受体介导的信号通路通过G蛋白偶联受体介导的另一条信号通路是磷脂酰肌醇信号通路，其信号转导是通过效应酶磷脂酶C完毕的。(1)IP3一CaH信号通路与钙火花胞外信号分子与GPCR结合，活化G蛋白(Goα或Gqα)，进而激活磷C(PLC)，催化PIP2水解生成IP3和DAG两个第二信使。IP3通过细胞内扩散，结合并启动内质网膜上IP3敏感的Ca2+通道，引发Ca2+顺电化学梯度从内质网钙库释放进入细胞质基质，通过结合钙调蛋白引发细胞反映。IP3的重要功效是引发贮存在内质网中的ca2+转移到细胞质基质中，使胞质中游离Ca2+浓度提高。依靠内质网膜上的IP3门控Ca2+通道(IP3-gatedCa2+channel)，将储存的Ca2+释放到细胞质基质中是几乎全部真核细胞内ca2+动员的重要途径。IP3门控Ca2+通道由4个亚基构成，每个亚基在N端胞质构造域有一种IP，结合位点，IP3的结合造成通道开放，Ca2+从内质网腔释放到细胞质基质中。在细胞中发现的多个磷酸肌醇加到内质网膜泡的制备物中，只有IP3能引发Ca2+的释放，表明IP，含有效应特异性。IP3介导的Ca2+水平升高只是瞬时的，由于质膜和内质网膜上Ca2+泵的启动会分别将Ca2+泵出细胞和泵进内质网腔。首先，细胞质基质中的Ca2+会增进IP3门控Ca2+通道的启动，由于Ca2+会增加通道受体对IP3的亲和性，促使储存Ca2+的更多释放。另首先，细胞质基质中Ca2+浓度升高，又会通过减少通道受体对IP3的亲和性，克制IP3诱导的胞内储存Ca2+的释放。当细胞中IP3通路受到刺激时，这种由细胞质基质中Ca2+对内质网膜上IP3门控Ca2+通道的复杂调控会造成细胞质基质中Ca2+斗水平的快速振荡。(2)DAG—PKC信号通路作为双信使之一的DAG结合在质膜上，可活化与质膜结合的蛋白激酶C(PKC)。PKC有两个功效区，一种是亲水的催化活性中心，另一种是疏水的膜结合区。在静息细胞中，PKC以非活性形式分布于细胞质中，当细胞接受外界信号刺激时，PIP2水解，质膜上DAG瞬间积累，由于细胞质中Ca2+浓度升高，造成细胞质基质中PKC与Ca2+结合并转位到质膜内表面，被DAG活化，进而使不同类型细胞中不同底物蛋白的丝氨酸和苏氨酸残基磷酸化。PKC是Ca2+和磷脂酰丝氨酸依赖性的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，含有广泛的作用底物，参加众多生理过程，既涉及许多细胞“短期生理效应”如细胞分泌、肌肉收缩等，又涉及细胞增殖、分化等“长久生理效应”。DAG只是PIP2水解形成的临时性产物，DAG通过两种途径终止其信使作用：一是被DAG激酶磷酸化形成磷脂酸，进入磷脂酰肌醇代谢途径；二是被DAG脂酶水解成单酰甘油。由于DAG代谢周期很短，不可能长久维持PKC活性，而细胞增殖或分化行为的变化又规定PKC长久产生效应。现发现另一种DAG生成途径，即由磷脂酶催化质膜上的磷脂酰胆碱断裂产生DAG，用来维持PKC的长久效应。在许多细胞中，PKC的活化可增强特殊基因的转录。已知最少有两条途径：一是PKC激活一条蛋白激酶的级联反映，造成与DNA特异序列结合的基因调控蛋白的磷酸化和激活，进而增强特殊基因的转录；二是PKC的活化，造成一种克制蛋白的磷酸化，从而使细胞质中基因调控蛋白摆脱克制状态释放出来，进入细胞核刺激特殊基因的转录。2.2酶联受体介导的信号转导普通与酶连接的细胞表面受体又称催化性受体(catalyticreceptor)，现在已知的这类受体都是跨膜蛋白，当胞外信号(配体)与受体结合即激活受体胞内段的酶活性，这类受体最少涉及5类：①受体酪氨酸激酶；②受体丝氨酸／苏氨酸激酶；③受体酪氨酸磷酸酯酶；④受体鸟苷酸环化酶；⑤酪氨酸蛋白激酶联受体。2.2.1受体酪氨酸激酶及RTK-Ras蛋白信号通路受体酪氨酸激酶(receptortyrosinekinase，RTK)又称酪氨酸蛋白激酶受体，是细胞表面一大类重要受体家族，迄今已鉴定有50余种，涉及7个亚族。全部RTK的N端位于细胞外，是配体结合域，C端位于胞内，含有酪氨酸激酶构造域，并含有自磷酸化位点。它的胞外配体是可溶性或膜结合的多肽或蛋白类激素，涉及多个生长因子、胰岛素和胰岛素样生长因子等。RTK重要功效是控制细胞生长、分化而不是调控细胞中间代谢；Ephrin(Eph)受体亚族是一大类与膜结合配体互相作用的受体，人类中已鉴定出8个组员，重要功效是刺激血管发生、指导细胞和轴突迁移。现在对RTK—Ras信号通路已有较多的理解，特别是细胞如何克服Ras活化所能维持的时间较短，局限性以保障细胞增殖与分化所需持续性信号刺激的问题已获得较进一步的认识。配体结合所诱发的RTK的激活刺激受体的酪氨酸激酶活性，随即再刺激Ras—MAPK磷酸化级联反映(phosphorylationcascade)途径和其它几个信号转导通路。多个信号蛋白如Ras、酪氨酸激酶Src、蛋白激酶C、蛋白激酶B等都可激活不同的Raf，其中Ras蛋白激活Raf是最具代表性的。Ras—MAPK磷酸化级联反映的基本环节以下：(1)活化的Ras蛋白与Raf的N端构造域结合并使其激活，Raf是丝氨酸／苏氨酸(Ser／Thr)蛋白激酶(又称MAPKKK)，它使靶蛋白上的丝氨酸／苏氨酸残基磷酸化；丝氨酸／苏氨酸残基磷酸化的蛋白的代谢周转比酪氨酸残基磷酸化的蛋白慢，这有助于使短寿命的Ras—GTP信号事件转变为长寿命的信号事件。(2)活化的Raf结合并磷酸化另一种蛋白激酶MAPKK，使丝氨酸／苏氨酸残基磷酸化造成MAPKK的活化。(3)MAPKK是一种双重特异的蛋白激酶，它能磷酸化其唯一底物MAPK的苏氨酸和酪氨酸残基使之激活。(4)促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen—activatedproteinkinase，MAPK)在该信号通路的蛋白激酶磷酸化级联反映中是一种特别重要的组分。活化的MAPK进入细胞核，可使许多底物蛋白的丝氨酸／苏氨酸残基磷酸化，涉及调节细胞周期和细胞分化的特异性蛋白体现的转录因子，从而修饰它们的活性。总而言之，RTK～Ras—MAPK信号通路可概括为以下模式：配体一RTK—Ras—Raf(MAPKKK)一MAPKK—MAPK一进入细胞核一其它激酶或基因调控蛋白(转录因子)的磷酸化修饰，对基因体现产生多个效应。2.2.2P13K-PKB(Akt)信号通路P13K—PKB(Akt)信号通路始于RTK和细胞因子受体的活化，产生磷酸化的氨酸残基，从而为募集P13K向膜上转位提供锚定位点。磷脂酰肌醇一3一激酶(P13K)最初是在多瘤病毒(polyoma，一种DNA病毒)研究中被鉴定的。迄今发现在人类基因组中P13K家族有9种同源基因编码，P13K既含有Ser／Thr激酶活性，又含有磷脂酰肌醇激酶的活性。P13K由2个亚基构成：一种P110催化亚基；一种p85调节亚基，含有SH2构造域，可结合活化的RTK和多个细胞因子受体胞内段磷酸酪氨酸残基，被募集到质膜，使其催化亚基靠近质膜内小叶的磷脂酰肌醇。在膜脂代谢中，含有磷脂酰肌醇激酶活性的P13K催化PI一4一P(PIP)生成PI-3，4一P2(PIP2)，催化PI一4，5一P2(PIP2)生成PI-3，4，5一P3(PIP3)。这些与膜结合的Pl一3-P为多个信号转导蛋白提供了锚定位点，进而介导多个下游信号通路。因此，P13K一蛋白激酶B(proteinkinaseB，PKB)信号途径可视为细胞内另一条与磷脂酰肌醇有关的信号通路，也是RTK介导衍生信号通路。许多蛋白激酶都是通过与质膜上PI-3一P锚定位点的结合而被激活的，然后这些激酶再影响细胞内许多靶蛋白的活性。PKB是一种相对分子质量约为6．0X104的Ser／Thr蛋白激酶，与PKA和PKC都有很高的同源性，故又称为PKA与PKC的有关激酶(relatedtotheAandCkinase，RAC—PK)，该激酶被证明是反转录病毒癌基因v—akt的编码产物，故又称Akt。丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶(PKB／Akt)由480个氨基酸残基构成，是重要的信号转导分子，除中间激酶构造域外，其N端还含有一种PH构造域，能紧密结合PI一3，4一P2和PI一3，4，5一P3分子的3位磷酸基团。在静息状态下，2种磷脂酰肌醇组分均处在低水平，PKB以非活性状态存在于细胞质基质中，在生长因子等激素刺激下，PI_3一P水平升高，PKB凭借PH构造域与3位P结合而转位到质膜上，同时PKB被PH构造域掩盖而克制的催化位点活性得以释放。事实上，PKB转位到细胞膜上对其部分活化是必须的也第一步；它的完全活化还需要另外2种Ser／Thr蛋白激酶，一种是PDKl借助其PH构造域转位到膜上并使PKB活性位点上的核心苏氨酸残基磷酸化，另一种是PDK2(普通是mTOR)磷酸化PKB上丝氨酸残基，上述2个位点被磷酸化后，PKB才完全活化。完全活化的PKB从质膜上解离下来，进入细胞质基质和细胞核，进而磷酸化多个对应的靶蛋白，产生影响细胞行为的广泛效应，诸如增进细胞存活、变化细胞代谢、致使细胞骨架重组等。2.2.3TGF-p—Smad信号通尽管TGF一声能够诱发复杂而多样的细胞反映，但TGF-fl受体所介导的信号转导通路却又相对简朴并且基本相似，即一旦受体与配体结合形成复合物后便被激活，那么受体的激酶活性就能在细胞质内直接磷酸化并激活特殊类型的转录因子Smad，进入核内调节基因体现，故称“TGF-fl—Smad信号通路”。在TGF-fl—Smad信号通路中，Smad蛋白最初在线虫和果蝇发现，分别是Sma和Mad，而后在爪蟾、小鼠和人类中又发现其有关蛋白，故以Sma和Mad的缩写Smad家族命名这类基因转录调控蛋白。现已知有三种Smad转录因子起调控作用，涉及受体调节的R—Smad(Smad2、Smad3)、辅助性co-Smad(Smad4)和克制性或颉颃性I—Smad(imp-f1)，三种Smad在信号通路中分别发挥不同作用。R—Smad是RI受体激酶的直接作用底物，含有MHl和MH2两个构造域，中间为可弯曲的连接区。位于N端的MHl构造域含有特异性DNA结合区，同时也包含核定位信号(NLS)序列；MH2构造域与活化受体结合、R—Smad蛋白磷酸化以及R—Smad蛋白分子的寡聚化有关，并含有潜在转录激活功效。当R—Smad未被磷酸化而处在非活化状态时，NLS被掩盖，此时MHl和MH2构造域不能与DNA或CO—Smad相结合。当RI受体被激活后，将R—Smad近C端的丝氨酸残基磷酸化并造成构象变化使NLS