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文档简介

(2021届安徽省滁州市定远县民族中学高三5月模拟检测)1.高纤维素含量的生活垃圾通

常可用好氧堆肥的方式进行生物降解。请回答下列问题:

(1)纤维素分解菌通过产生纤维素酶分解纤维素,其中间产物为,进一

步分解为葡萄糖是利用纤维素酶组分中的。

(2)实验室研究常采用固定化技术分解生活垃圾样品。将纤维素酶进行固定化处理,一般

不使用法,原因是

(3)好氧堆肥中期堆体温度高达65℃,在此期间分离出的菌种多为嗜热菌,试说明原因:

(4)将嗜热菌从堆肥系统中分离出来后,为扩大培养应使用(液体/固体)

培养基。

(5)好氧堆肥中的微生物包括细菌和真菌等,但相较于真菌,细菌常成为优势菌。试从物

质运输效率的角度说明原因

(6)生活垃圾中的致病菌会使降解产物造成二次污染。为避免二次污染,应对降解产物进

行处理。

【答案】(1).纤维二糖(2).葡萄糖甘酶(3).包埋法(4).酶分子体积小,容

易从包埋材料中漏出(5).高温堆体环境嗜热菌可以生长繁殖,而其他微生物难以生存

(6).液体(7).细菌体积小,与营养物质接触的相对表面积更大,物质运输效率更高,生

长繁殖速度更快⑻.灭菌

【解析】

【分析】

(1)纤维素酶是一种复合醐,-一般认为它至少包括三种组分,即G醐、Cx醐和葡萄糖昔酶,

前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

(2)酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定化,而细胞多采用包埋法固定法。这是因为

细胞体积大,而酶分子很小;体积大的细胞难以被吸附或结合,而体积小的酶容易从包埋材

料中漏出。

【详解】(1)据分析可知,纤维素酶是一种复合酶,纤维素分解菌通过产生纤维素酶分解纤

维素,其中间产物为纤维二糖,进一步分解为葡萄糖是利用纤维素酶组分中的葡萄糖甘酶。

(2)由于酶的体积相对较小,包埋法使用载体的孔道较大,容易使酶从包埋材料中漏出,

所以一般酶的固定不使用包埋法。

(3)嗜热菌能在较高的温度下生存,好氧堆肥中期堆体温度高达65℃,在此期间分离出的

菌种多为嗜热菌,说明高温堆体环境嗜热菌可以生长繁殖,而其他微生物难以生存。

(4)液体培养基培养微生物,可使其与营养物质充分接触,繁殖速度更快,因此,将嗜热

菌从堆肥系统中分离出来后,为扩大培养应使用液体培养基。

(5)细菌属于原核生物,真菌属于真核生物,原核生物的相对•表面积大,与外界进行物质

交换的速率更快,因此,细菌成为优势菌。

(6)为避免二次污染,应对降解产物进行灭菌处理。

【点睛】解答本题的关键是明确纤维素分解菌中的酶,以及原核生物和真核生物物质运输效

率的比较。

(2021届安徽省合肥市高三5月第三次教学质量检测)2.某研究小组欲从土壤中筛选能高

效分解尿素的细菌(目标菌),培养基成分如下表所示。

回答下列问题

KH2Po41.4g

Na2HPO42.1g

MgSO4*7H2O0.2g

葡萄糖10.0g

尿素1.0g

琼脂15.0g

用蒸储水定容导报1000mL

(1)培养基中KH2P和NazHPCU的作用是为细菌生长提供无机营养和。

(2)在土壤微生物中,只有部分种类的细菌可以合成腺酶,而其他种类不能合成,则能在

此培养基上生存的是,原因是。

(3)为对分离得到的菌种作进一步的鉴定,常在固体培养基中加入酚红试剂,若菌落周围

出现红色环,可以初步鉴定该种细菌为目标菌,其原理是培养基上

的菌落即为分解尿素能力强的菌种。

【答案】(1).维持培养基pH相对稳定(2).能合成胭酶的细菌(3).可以分解尿

素获得N元素(4),胭酶能分解尿素产生氨,与酚红作用显红色,红色环越大,能力越强

(5).红色环大

【解析】

【分析】

培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,若pH升高,指示剂将

变红,这样,我们就可以初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

【详解】(1)培养基中KH2P04和Na?HP04一方面可以为细菌生长提供无机营养,还可以维

持培养基pH的相对稳定。

(2)由于该培养基中的唯一氮源是尿素,只有部分能够合成胭酶的细菌能分解尿素,获得

N元素,才能在此培养基上生存。

(3)由于服酶能分解尿素产生氨,与酚红作用显红色,红色圈越大,能力越强,故培养基

上红色圈大的菌落即为分解尿素能力强的菌种。

【点睛】需要考生注意该培养基上的唯一氮源是尿素,据此答题。

(2021届安徽省合肥市高三第二次教学质量检测)11.格瓦斯是一种在东欧广泛流传的低度

酒精饮料,其制作过程如下:

①将发酵面包制成的面包液、糖化液装人发酹罐,加入保加利亚乳酸菌、酵母菌进行发酹;

②发酵液经过严格的过滤:

③过滤液经5~8s迅速升温到127℃进行高温杀菌,冷却后即可饮用。

回答下列问题:

(1)面包液、糖化液可为微生物生长提供以及水和无机盐等营养物质。

过程①装人发酵罐的发酵液、糖化液一般可不进行灭菌处理,原因是在______________的发

酵液中,酵母菌、乳酸菌可以生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受

到抑制。过程③中瞬时高温灭菌的优点是。

(2)不同酵母菌产生酒精的能力差异较大,其产酒精能力与耐受酒精的能力有关。若从经

诱变剂处理的酵母菌种群中分离出产酒精能力较强的酵母菌,可采用法接

种,挑取菌落进行液体培养,测定培养液中的含量。

【答案】(1).碳源、氮源(2).缺氧、呈酸性(3).既能杀死微生物,又不破坏营

养成分⑷.稀释涂布平板(5).酒精

【解析】

【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌,其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制

作的原理:

(1)在有氧条件下,反应式如下:C6H12。6+6或。+6。2彗6co2+12H2O+能量;

(2)在无氧条件下,反应式如下:C6H12。6普2co2+2C2H50H+能量。

2、稀释涂布平板法和平板划线法是常用的接种方法,这两种方法都可将聚集的菌种逐步分

散到培养基的表面,最终得到由一个细胞繁殖而来的菌落。要计数应用稀释涂布平板法。

【详解】(1)面包液、糖化液中含有蛋白质、糖类、水和无机盐等,可为微生物的生长提供

碳源、氮源以及水和无机盐等营养物质。在缺氧、酸性的发酵液中,酵母菌可以牛.长繁殖,

而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。过程③中瞬时高温灭菌的优点

是既能杀死微生物,又能使营养成分不被破坏。

(2)利用选择培养基,从发酵液中分离得到产酒精能力比较强酵母菌,可向培养基中添

加较高浓度的酒精进行筛选,用稀释涂布平板法接种。挑取菌落进行液体培养,测定培养液

中酒精的含量,以检测其产酒精的能力。

【点睛】解答本题的关键是熟练掌握发酵原理和发酵过程,利用所学基本知识解决问题;并

能利用选择培养基进行菌种选育过程。

(2021届安徽省淮南市高三二模(4月))11.某种细菌能够产生一种脂肪酶,该酶可催化

植物油与甲醇反应合成生物柴油。作为一种可再生清洁能源,生物柴油的使用可减少对化石

燃料的消耗,对缓解温室效应具有重要的应用价值。回答下列问题:

(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发,宜选用法从油料作物中提取。

(2)筛选产脂肪酶的细菌时,培养基中除植物油外还需要含有等物质。

(3)对细菌培养基进行灭菌,宜采用法。欲对该固体培养基培养的细菌进

行计数,可采用法接种以获得单细胞菌落。为确定培养基灭菌是否彻底,正确的

做法是,如果则可说明所用培养基是无菌的。

(4)从纯化培养得到的细菌中分离提取脂肪酶后,可与混合,通过测定单位时间、

单位体积中生物柴油的生成量,来确定该脂肪酶的活性。

【答案】⑴.压榨(或萃取)(2).氮源、水和无机盐(3).高压蒸汽灭菌(4).

稀释涂布平板(5).将未经接种的灭菌培养基与接种后的培养基在相同且适宜的条件下

进行培养(6),培养一段时间后未接种组不形成菌落(7).植物油与甲醇

【解析】

【分析】1、植物有效成分的提取可用蒸储法、压榨法或萃取法,因为植物油不挥发,所以

不适合采用蒸储法提取,应用压榨法或萃取法提取;

2、植物油中不含矿物质元素,只为微生物提供碳源,培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌,测定

微生物的数量,可以用显微镜直接计数或稀释涂布平板法,分离出的脂肪酶要对其活性进行

检测,以确定其实用价值。

【详解】(1)根据题意,生产生物柴油的植物油不易挥发,所以不适合采用蒸储法提取,应

采用压榨法或萃取法提取;

(2)细菌的培养需要碳源、氮源、水和无机盐等物质,植物油属于碳源;

(3)对细菌培养基进行灭菌,因为培养基中含有水分,因此利用高压蒸汽灭菌法进行灭菌,

对细菌进行计数,采用稀释涂布平板法接种获得单菌落,通过计数菌落来估算细胞数量,为

了确定培养基灭菌是否彻底,需要设置对照组,将未经接种的灭菌培养基与接种后的培养基

在相同且适宜的条件下进行培养,若对照组上不形成菌落则灭菌彻底;

(4)脂肪酶可催化植物油与甲醇反应合成生物柴油,则可以将植物油和甲醇混合,测定单

位时间、体积中柴油的生产量来确定酶活性。

【点睛】生物技术实践的题目,为了考查知识点宽度,一般不再是单一某一方面的知识,这

种题型符合这种趋势,也综合考查学生掌握的情况。这种综合题型的出现,给我们一种信号,

就是在复习时要把每一专题复习牢固,在这个基础上注意各个章节,各个知识点之间的联系,

争取形成一些知识网络,把其中有关联的部分进行总结概括,将来考试时随时提取任何一部

分知识点。

(2021届安徽省马鞍山市高三第三次教学质量检测)11.为研究大熊猫竹纤维消化机制,某

科研小组利用大熊猫粪便开展分离纤维素分解菌等相关实验。回答下列问题:

(1)科研小组对大熊猫粪便样品进行选择培养,目的是;所使用的培养基是

(填“固体”或“液体”)培养基。

(2)将选择培养的样品稀释液涂布到鉴别培养基上,长出菌落后加入刚果红(CR)溶液,

10~15min后将其倒去再加入氯化钠溶液,氯化钠溶液能够;此时产生纤维素

酶的菌落周围出现透明圈,透明圈直径与菌落直径比值越说明分解纤维素能力

越强;为进一步确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行产纤维素酶的实验。

(3)利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对分离纯化的纤维素酶进行纯度鉴定,该技术使得

电泳迁移率完全取决于蛋白质分子的大小,原因是。为节约成本,提高酶的稳

定性,工业生产上常采用酶的技术。

【答案】(1).增加纤维素分解菌的浓度(2).液体(3).洗去结合不牢的刚果红

(使透明圈清晰)⑷.大(5).发酵⑹.SDS所带负电荷量大大超过了蛋白质分

子原有的电荷量,掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别(7).固定化

【解析】

【分析】

1、纤维素酶是一种复合酶,可以把纤维素分解为纤维二糖,进一步分解为葡萄糖使微生物

加以利用,故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中,纤维素分解菌能够很好地生长,其他微

生物则不能生长。

2、在培养纤维素分解菌的培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,

当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,

从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】(1)科研小组利用大熊猫粪便开展分离纤维素分解菌等相关实验。科研小组采用液

体培养基对大熊猫粪便样品进行富集培养、选择培养,目的是增加纤维素分解菌的浓度。

(2)氯化钠溶液能够洗去结合不牢的刚果红,从而使得实验现象更明显;纤维素分解菌能

够分解培养基中的纤维素,使纤维素与刚果红形成红色复合物消失,形成透明圈,故透明圈

的直径与菌落的宜径比值越大,说明分解菌的分解纤维素能力越强;为进一步确定得到的是

纤维素分解菌,还需进行发酵产纤维素酶的实验。

(3)SDS所带的电荷量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的

电荷差别,使电泳迁移速率完全取决于分子大小。为节约成本,提高酶的稳定性,工业生产

上,常用酶的固定化技术。

【点睛】本题主要考察微生物培养与分离、酶的应用和分离蛋白质的方法,目的是考察学生

对所学基础知识的理解和掌握,题目难度容易。

(2021届安徽省芜湖市安徽师大附中高三5月最后一卷)11.微生物广泛分布在自然界中,

它们个体微小,与人类关系密切。人类只有清楚地认识它们,才能合理利用它们。请回答下

列与微生物的培养、分离、计数、鉴定和菌种保藏等方面的问题:

(1)制备牛肉膏蛋白陈固体培养基在熔化琼脂时需要不断用玻棒搅拌,目的是

o配制好的培养基转移到锥形瓶中后,可采用方法进行灭

菌。待培养基冷却至50℃左右时,在倒平板。

(2)在牛肉膏蛋白陈固体培养基上纯化大肠杆菌时,最常用的是—和,两者分别

是通过在固体培养基表面连续划线、对菌液进行一系列的梯度稀释措施来实现分离纯化的。

(3)对微生物的计数除用显微镜直接计数外,还可以利用稀释涂布平板法统计样品中的活

菌数目,该方法每隔24h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,其好

处。

(4)观察菌落特征能够鉴别不同种类的微生物,其原理是。

(5)将菌种试管放入4C的冰箱中为临时保藏,这种方法菌种保存的时间不长,原因是

【答案】(1).防止琼脂糊底而导致烧杯破裂(2).高压蒸汽灭菌(3).酒精灯火焰

附近(4).平板划线法(5).稀释涂布平板法(6).防止因培养时间不足而导致遗

漏菌落的数目(7).在一定的培养条件下,不同种微生物形成的菌落特征不同(或同种微

生物表现出稳定的菌落特征)(8).菌种易被污染或产生变异

【解析】

【分析】1、微生物常见的接种的方法:①平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制

成平板,接种,划线,在恒温箱里培养。在划线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随

着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法:将待分离的菌液

经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。

2、对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法,需要长期保存的菌种,可以采用甘油

管藏的方法。临时保藏的菌种容易被污染或产生变异,因此保存时间不长。

【详解】(1)配制牛肉膏蛋白腺固体培养基,在熔化琼脂时需要不断用玻棒搅拌,目的是防

止琼脂糊底而导致烧杯破裂。配制好的培养基转移到锥形瓶中后,可采用高压蒸汽灭菌方法

进行灭菌。待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,以防止杂菌污染。

(2)纯化大肠杆菌时,最常用的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法。

(3)用稀释涂布平板法统计样品中的活菌数目时,每隔24h统计一次菌落数目,并选取菌

落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

(4)在一定的培养条件下,不同种微生物形成的菌落特征不同(或同种微生物表现出稳定

的菌落特征),所以观察菌落特征能够鉴别不同种类的微生物。

(5)对于频繁使用的菌种,可以采用将菌种试管放入4℃的冰箱中临时保藏,但是,这种

方法保存的时间不长,菌种容易被污染或产生变异。

【点睛】本题考查培养基制备、微生物的接种、计数和菌种保存方法等知识,要求考生能

结合所学知识回答问题。

(2021届安徽省芜湖市高三5月教育教学质量监控)11.某兴趣小组以“血红蛋白的提取和

分离”为课题,进行科学实践活动。分析并回答下列问题:

(1)该小组在提取哺乳动物的血红蛋白时,对样品进行处理主要包括、血红蛋

白的释放和分离血红蛋白溶液。对样品进行粗分离时需进行透析,透析技术的原理是

(2)透析后可以用法进一步纯化血红蛋白。使用该方法时,先分离出来的是相

对分子质量__________(填“大”或“小”)的蛋白质。装填色谱柱时,不能有气泡存在,

一旦发现气泡必须重装,这是因为。

(3)实验最后还要使用对蛋白质进行纯度鉴定。在此过程中,影响蛋白质迁移

速度的因素包括蛋白质分子的大小,带电性质以及分子的形状等。加入SDS后,使得蛋白

质的迁移率只取决于。

【答案】(1).红细胞的洗涤(2),小分子可以自由进出透析袋(半透膜),而大分子

不能通过⑶.凝胶色谱⑷.大⑸.气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降

低分离效果⑹.电泳法⑺.分子大小

【解析】

【分析】

1.血红蛋白的提取和分离一般可分为四步:样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。

2.样品处理包括四个步骤,即红细胞的洗涤、血红蛋臼的释放、分离血红蛋白溶液和透析。

3.样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的蛋白质除去;

4.凝胶色谱法:凝胶色谱法也称做分配色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有

效方法。所用的凝胶实际上是一-些微小的多孔球体,这些小球体大多数是由多糖类化合物

构成的,如葡聚糖或琼脂糖。在小球体内部有许多贯穿的通道,当相时分子质量不同的蛋白

质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进人凝胶内部的通道,路程较长,移动速度

较慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进人凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程

较短,移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。

5.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子,如多肽、核

酸等都具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下,

这"带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带

电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实

现样品中各种分子的分离。

【详解】(1)该小组在提取哺乳动物的血红蛋白时,对样品进行处理主要包括红细胞的洗涤、

血红蛋白的释放和分离血红蛋白溶液,其中对红细胞的洗涤是为了去除杂蛋白,以便获得较

纯净的血红蛋白,对样品进行粗分离时需进行透析,透析技术的原理是小分子可以自由进出

透析袋(半透膜),而大分子不能通过,从而去除分子量较小的杂质。

(2)透析后可以用凝胶色谱法进一步纯化血红蛋白。使用该方法时,由于分子量大的蛋白

质不能进入凝胶颗粒的内部,从而先分离出来,而分子量较小的蛋白质则洗脱出来的速度较

慢。装填色谱柱时,不能有气泡存在,因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分

离效果,因此,若凝胶柱中一旦发现气泡则必须重装。

(3)实验最后还要使用电泳法对蛋白质进行纯度鉴定。在此过程中,影响蛋白质迁移速度

的因素包括蛋白质分子的大小,带电性质以及分子的形状等。而SDS带有大量的负电荷,同

时会使蛋白质变性,因此加入SDS后,则会使得蛋白质的电荷被遮盖从而均带上负电,因此

此时的迁移率只取决于分子相对质量的大小,从而完成对蛋白质的鉴定过程。

【点睛】熟知蛋白质的提取和分离的流程及其相关原理是解答本题的关键,能根据所学知识

进行合理的分析、综合是解答本题的必备能力,SDS的作用是解答本题的易露点。

(2021届安徽省宿州市高三三模)11.S蛋白和N蛋白是某病原体的两种主要抗原。科学家

将控制S蛋白和N蛋白合成的基因转入大肠杆菌,通过培养工程菌,从中提取S蛋白和N

蛋白,以制造基因工程疫苗。请回答:

(1)培养工程菌使用的培养基应为(填“固体”或“液体”)培养基,培

养基中的蛋白陈可为工程菌

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