贴壁细胞培养常见的贴壁问题及解决方法

贴壁细胞培养常见的贴壁问题及解决方法贴壁细胞培养是一项常见的细胞培养技术，但在实际操作过程中，常常会遇到一些问题。下面将介绍贴壁细胞培养中常见的五大问题，并提供相应的解决方法。1.

传代后部分细胞漂浮原因及解决方法如下：-

传代前细胞密度太大：细胞融合度达到80%时可以进行传代操作，传代密度需要适中，密度过高会导致传代后细胞漂浮。-

细胞状态不好：可以通过提高血清比例、保持稳定的培养环境等方法改善细胞状态。-

吹打次数过多造成机械损伤：在吹打过程中要轻柔操作，当细胞呈单颗粒时可停止吹打，避免产生气泡。-

培养基更换后不适应：可以将培养基换回原来使用的培养基，或者与原培养基比例混合后使用，让细胞有一个适应期。-

培养液配制和储存不当，如pH值过碱、谷氨酰胺含量不足等原因：注意正确配制培养液并储存好，确保培养液的质量。2.

传代后细胞变形原因及解决方法如下：-

变形但细胞仍在生长：可能是血清批次不一样导致的，建议使用同一批次的血清，若更换血清则需要与原血清混合并逐渐过渡。-

变形且细胞不长且碎片增多：可能是传代操作过程中的损伤，如消化不当或细胞受到污染。应根据细胞状态调整消化时间，严格进行无菌操作，确保细胞无外源性污染。3.

细胞生长周期变慢，边养边漂原因及解决方法如下：-

细胞传代时密度太稀或太密：建议在细胞融合度达到80%左右进行传代，传代密度适度，密度过低会延长生长周期，密度过高会造成细胞接触抑制。-

传代操作不当：根据细胞特性调整消化时间，观察细胞回缩变圆并有少量细胞脱落后终止消化，频繁换液和清洗细胞也会影响细胞状态，常规换液时间间隔为2-3天。4.

传代后细胞成团解决方法如下：-

低密度接种，延长换液时间，避免细胞脱落。-

使用多聚赖氨酸包被培养器皿，增加细胞贴壁的牢固度，减少细胞聚集成团的几率。-

重新铺板，并更换新配制的培养基，增加血清的比例但不超过5%。-

接种时减少培养基量，以加快细胞贴壁的速度，等待细胞贴壁后再补加培养基到正常用量。5.

贴壁细胞培养时细胞出现空泡原因及解决方法如下：-

正常的细胞活动：有些细胞会出现正常的自噬行为或其他膜泡活动，无需特殊处理。-

细胞营养不良：可能是由血清不适应、培养基成分改变或换液不及时等原因导致的，可以通过更换适合的血清或及时换液来解决。-

细胞受损：注意培养条件和操作手法，避免机械损伤或pH值过高或过低等情况。通过了解这些常见的贴壁问题及解决方法，可以帮助科研人员在贴壁细胞培养中更好地处理各种技术难题，从而获得高质量的细胞培养结果。苏州阿尔法生物与海星生物深度合作提供以下产品与服务：HyCyte™干细胞、原代细胞、细胞系、三系诱导培养试剂、专用培养基、DMEM培养基、基因编辑试剂盒、细胞株现货、细胞专用血清等细胞生物学试剂。

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