野生短葶飞蓬中总黄酮含量测定

野生短葶飞蓬中总黄酮含量测定

短枝飞蓬（花卉和竹子）也被称为小慈碱和细慈碱。它的干燥是菊花科的一种常见草本植物。主要产于云南、四川、贵州、湖南、广西、西藏等省区。短葶飞蓬中含有野黄芩苷、黄酮等活性成分,具有散寒解表、祛风除湿、活血舒筋、消食积、止痛和扩张血管等功效,对各种脑血管意外导致的瘫痪及脑炎后遗症等有显著的治疗效果。总黄酮能舒张15-MPG2α所致的离体冠状动脉收缩,进一步舒张离体猪冠状动脉段;此外,黄酮类化合物还具有抗炎、抗菌、抗病毒、雄性激素等作用。研究表明,短葶飞蓬中总黄酮含量随季节变化、个体差异、器官分别及生长发育期等变化有一定的差异,但对不同地点的短葶飞蓬中总黄酮含量的比较分析鲜见报道。为此,笔者采用紫外分光光度法对不同产地的短葶飞蓬中总黄酮含量进行测定,并进行分析,旨在为中药短葶飞蓬的良种选育和GAP种植提供依据。1材料和方法1.1材料表面1.1.1研究的对象于2009年5月收集9个不同产地的野生短葶飞蓬资源,并移栽至云南省农业科学院药用植物研究所种植资源圃中。1.1.2主要试剂芦丁对照品,由中国药品生物制品检定所提供;无水乙醇,市售分析纯;水为重蒸水。1.1.3超声仪器设备UV2550双通道紫外可见分光光度仪,由岛津公司生产型超声波清洗机由上海声源超声仪器设备有限公司生产;0.45μm过滤膜,由天津Aulomaticscience公司生产;AR1140型万分之一分析天平,由美国NJ公司生产;DFT100型中药粉碎机,由浙江温岭市林大机械有限公司生产。1.2方法1.2.1样品前处理随机取采自不同地点的短葶飞蓬各30株,洗净,干燥后单株粉碎,过80目筛,准确称取1.0g样品,加水煮2次,每次1.5h,合并煎液,经0.45μm过滤膜过滤、浓缩,加无水乙醇使水醇比为20∶80,冷藏48h,过滤,收集滤液,用分光光度计比色测定,每个样品重复3次。1.2.2c4分析测定方法参考文献资料。计算芦丁标准品的回归方程为A=0.4458C-0.0178,R2=0.9994。精密吸取提取滤液1.0ml,置于25ml容量瓶中,用浓度为65%的乙醇定容,测定吸光度,代入标准回归方程,计算总黄酮含量1.3处理数据2结果与分析2.1不同产地间短冒充聚酰胺含量的差异性分析不同产地短葶飞蓬中总黄酮含量测定结果见表1。由表1可知,昆明小哨、昆明筇竹寺、文山丘北县、昭通巧家药山、昆明双龙镇、禄劝县转龙镇、禄劝县雪山乡、腾冲芒棒乡2和腾冲芒棒乡19个产地的短葶飞蓬中总黄酮总体平均含量为12.620%,总体平均变异系数(CV)为25.6%。各产地中腾冲芒棒乡1产短葶飞蓬中总黄酮平均含量最高,为15.760%,单株最大含量达18.54%,单株最小含量为10.794%;禄劝县雪山乡产短葶飞蓬中总黄酮平均含量最低,为8.850%,单株最大含量为14.660%,单株最小含量为3.650%。其他产地总黄酮含量大小为:昆明双龙镇>禄劝县转龙镇>腾冲芒棒乡2>昆明小哨>文山丘北县>昭通巧家药山>昆明筇竹寺。由表1还可知,同一产地不同短葶飞蓬植株间总黄酮含量变异系数不同,禄劝县雪山乡样品间变异系数最高,昆明双龙镇样品间变异系数最小。表明禄劝县雪山乡样品间总黄酮含量差异较大,昆明双龙镇样品间总黄酮含量较为平均。以总黄酮含量为考察指标可知,腾冲芒棒乡1产的短葶飞蓬适于中药材的采集;但从含量株间变异系数及平均含量综合考虑,昆明双龙镇的短葶飞蓬适于育种药材的采收。2.2不同产地间短葶飞蓬中总黄酮含量差异性分析方差分析表明,各产地短葶飞蓬中总黄酮含量差异极显著(F=19.467,P<0.01)。LSD最小显著差数多重比较结果可知,昆明小哨与昆明筇竹寺、禄劝县雪山乡、腾冲芒棒乡1(F=19.467,P<0.01)之间总黄酮含量均数差分别为3.9133、4.2851和2.6266,差异极显著;与昆明双龙镇、禄劝县转龙镇之间均数差分别为2.0686、1.8578,差异显著。昆明筇竹寺产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明小哨、文山丘北县、昆明双龙镇、禄劝县转龙镇、腾冲芒棒乡2、腾冲芒棒乡1之间均数差分别为3.9133、3.7915、5.9819、5.7711、4.8727、6.5399,差异极显著;与昭通巧家药山之间均数差为2.2546,差异显著。文山丘北县产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明筇竹寺、禄劝县雪山乡、腾冲芒棒乡1之间均数差分别为3.7915、4.1633、2.7484差异极显著与昆明双龙镇禄劝县转龙镇之间均数差为2.1904、1.9796,差异显著。昭通巧家药山产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明双龙镇、禄劝县转龙镇、禄劝县雪山乡、腾冲芒棒乡2、腾冲芒棒乡1之间均数差分别为3.7274、3.5166、2.6263、2.6181、4.2854,差异极显著;与昆明筇竹寺之间均数差为2.2546,差异显著。昆明双龙镇产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明筇竹寺、昭通巧家药山、禄劝县雪山乡之间均数差5.9819、3.7274、6.3537,差异极显著;与昆明小哨、文山丘北县之间均数差为2.0686、2.1904,差异显著。禄劝县转龙镇产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明筇竹寺、昭通巧家药山、禄劝县雪山乡产短葶飞蓬中总黄酮含量之间均数差分别为5.7711、3.5166、6.1429,差异极显著;与昆明小哨、文山丘北县之间均数差为1.8578、1.9796,差异显著。禄劝县雪山乡产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明小哨、文山丘北县、昭通巧家药山、昆明双龙镇、禄劝县转龙镇、腾冲芒棒乡2、腾冲芒棒乡1之间均数差分别为4.2851、4.1633、2.6263、6.3537、6.1429、5.2445、6.9117,差异极显著。腾冲芒棒乡2产短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明筇竹寺、昭通巧家药山、禄劝县雪山乡之间均数差分别为4.8727、2.6181、5.2445,差异极显著。腾冲芒棒乡产1短葶飞蓬中总黄酮含量与昆明小哨、昆明筇竹寺、文山丘北县、昭通巧家药山、禄劝县雪山乡之间均数差分别为2.2666、6.5399、2.7484、4.2854、6.9117,差异极显著。差异显著性分析结果表明,不同产地间短葶飞蓬中总黄酮差异显著,昆明双龙镇与腾冲芒棒乡1之间差异性不显著。以总黄酮含量为考察指标,综合考虑样品间总黄酮差异性与平均含量,昆明双龙镇与腾冲芒棒乡1两地短葶飞蓬样品适于中药材采收。3植株间变异系数对植株总黄酮含量的影响试验结果表明,不同植株、不同产地的短葶飞蓬中总黄酮含量均有一定差异,不同采集地点的短葶飞蓬中总黄酮平均含量依次为腾冲芒棒乡1>昆明双龙镇>禄劝县转龙镇>腾冲芒棒乡2>昆明小哨>文山丘北县>昭通巧家药山>昆明筇竹寺>禄劝县雪山乡。植株间变异系数大小依次为禄劝县雪山乡>昆明筇竹寺>禄劝县转龙镇>昭通巧家药山>腾冲芒棒乡1>腾冲芒棒乡2>文山丘北县>昆明小哨>昆明双龙镇。同一产地植株间变异系数越小,表明植株中总黄酮含量越稳定;含量平均值越大表明总黄酮含量越高。综合考虑总黄酮平均含量与变异系数,腾冲芒棒乡1样品适于中药材采集,昆明双龙镇所产样品适于中药育种