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文档简介
微生物发酵技术
-种子的扩大培养种子的扩大培养种子扩培概述01种子培养方法0203种子扩培工艺04种子扩培参数1.种子扩培概述定义：种子扩大培养，简称种子扩培，是指将保存的处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得的供生产车间发酵罐接种用的一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。广义的种子：是指利用微生物生产中所用到的各种孢子、摇瓶菌丝、种子罐菌丝的总称。狭义的种子：指用于接种的各种菌丝。作用：发酵接种量的需要；菌种的驯化需要；缩短发酵时间、保证生产水平需要……2.种子培养方法表面培养法：指表面皿培养，液面形成生物膜。特点：接近自然，但种子生长速度慢。常用茄子瓶、克氏瓶、瓷盘培养。固体培养法：用天然的固体物料培养，另加入生长因子、微量元素以补充养料。不使用琼脂，和1中的固体培养基不同。主要用于孢子制备，大规模生产也有应用，养分传递慢，生长较慢，也易染菌。常用三角瓶、蘑菇瓶、克氏瓶和培养皿等。液体深层培养法：将孢子悬浮于培养基中，物质、氧的传递快、生长快，工业生产主要用此法，也用于一级、二级种子罐。3.种子扩培工艺实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此形象地将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。如包括琼脂斜面、固体培养基扩大培养或摇瓶液体培养。车间种子阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工厂归为发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。如种子罐扩大培养。扩培一般工艺流程：斜面沙土管冷干管液氮管实验室种子制备生产现场种子制备
二级斜面一级斜面米孢子
母瓶
子瓶
一级种子罐发酵罐
二级种子罐三级种子罐菌种保藏4.种子扩培参数接种龄：是指种子罐中培养的菌丝体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。
通常，接种龄以菌丝处于对数生长期，且培养液中菌体量还未达到最高峰时较为合适。种子罐级数：种子在种子罐中需扩大培养的次数。一般根据菌种生长特性、孢子发芽及菌体繁殖速度，以及所采用发酵罐的容积而定。谷氨酸及其他氨基酸发酵所采用的菌种生产繁殖很快，常用一级种子扩大培养；庆大霉素、卡那霉素一般用二级种子扩大培养；有些酶制剂生产也用二级种子扩大培养；链霉素采用三级种子扩大培养；放线菌的细胞生长繁殖较慢，常采用三级种子扩大培养；种子罐的级数越少，越利于简化工艺和控制，并可减少由于多次移种而带来染菌的机率。发酵级数：种子罐级数+1：谷氨酸及其他氨基酸发酵常用一级种子扩大培养，即二级发酵；庆大霉素、卡那霉素一般用二级种子扩大培养，即三级发酵；有些酶制剂生产也用二级种子扩大培养，即三级发酵；链霉素采用三级种子扩大培养，即四级发酵；放线菌的细胞生长繁殖较慢，常采用三级种子扩大培养，即四级发酵；必须考虑应该尽量延长发酵罐生产产物的时间，缩短由于种子发芽、生长而占用的非生产时间，以提高发酵罐的生产率。接种量：指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。
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