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文档简介

现代生物技术概述

ModernBiotechnology将目的基因片断从受体细胞内提取，需要基因的剪刀——限制性核酸内切酶。将目的基因与质粒DNA连接，需要基因的针线——DNA连接酶。将目的基因运入大肠杆菌，需要基因的运输工具——运载体。基因工程操作的工具限制性核酸内切酶1.限制性内切酶作用过程限制性核酸内切酶一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列酶分布在细菌中特点特异性限制性核酸内切酶2.分布：主要在细菌中。3.特点：特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点例如：大肠杆菌的一种限制性核酸内切酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开4.结果：产生黏性未端被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？基因的针线：DNA连接酶

GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAA

AATTC

GG

CTTAA

AATTC

GGCTTAAAATTC

G被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？用同种限制酶切割DNA连接酶磷酸二酯键，不是氢键。DNA连接酶1.连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。2.连接的部位：运载体运载体要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去。能将外源基因送入细胞的工具就是运载体1.条件：①能自我复制②含有限制性内切酶的位点③含有筛选标记，一般为抗性基因④能启动外源目的基因的转录和翻译⑤能在宿主细胞内复制并稳定地保存2.种类：细菌、酵母质粒、改造和修饰后的噬菌体、病毒DNA质粒质粒是能自主复制的

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