人兽共患寄生虫病的免疫学及分子生物学诊断检测技术

人兽共患寄生虫病的免疫学及分子生物学诊断检测技术Q1包虫病在我国的流行现状如何？如何预防感染？包虫病在我国的流行现状还是比较严重的，尽管人体病例并不多（17万以上），但流行面积很大，受威胁的人群数量很大（约6600万），关键是受威胁的人群比较特殊，一般集中在少数民族地区及边陲地区。包虫病分为两型，一种是囊型，一种是泡型；泡型包虫病尽管病例不多，我国每年感染病例约16000例，但十年病死率高达94%，被称为“虫癌”。1983年初冬我到甘南牧区屠宰场检查牛羊包虫病感染情况，那时候几乎每头牛羊都感染包虫。经过多年的防控，现在牛羊的包虫感染率已大幅下降，但病畜仍超过3000万只(头)，年直接经济损失约30亿；2011-2015防控总经费约76亿元。包虫病的防控从技术层面讲并不难，因为包虫病的传播必须通过终末宿主狗吃了牛羊体内的包囊，在狗的小肠里经过40到45天发育为成虫，成虫排出来的虫卵，再去感染人或牛羊。所以防控犬包虫感染最关键。对犬的防控目前采取“犬犬投药、月月驱虫”的防控措施，之所以采取这种措施是因为棘球绦虫在犬的小肠里经过40到45天发育成熟，一旦发育成熟后排出的虫卵就具有感染性，所以我们要月月驱虫，这样即便狗感染了棘球绦虫，也没有发育成熟，将虫子杀死在没有感染性之前。第二就是对中间宿主牛羊进行疫苗接种；第三就是加强卫生、饲养管理。Q2PCR-ELISA技术比荧光定量PCR技术有啥优势？PCR-ELISA技术结合了PCR和ELISA两个技术的优势，用ELISA来检测PCR产物，其敏感性进一步放大，所以它的主要优势为敏感性更高。Q3猪带绦虫现在感染率较低，肉检还有意义吗？不仅仅是猪带绦虫，包括旋毛虫、猪肉孢子虫目前的感染率都比较低，但这些寄生虫病的危害还是比较严重。猪带绦虫尽管感染率低，但是对人体危害还相当严重，人一旦感染，猪带绦虫会进入人体的肌肉、脑里面，后果非常严重，所以依然要严格防控。Q4筛选诊断靶基因的时候最应该注意的是什么呢？不管是病毒病、细菌病、寄生虫病的分子诊断检测方法，靶基因筛选是最重要的。如果病原的基因组序列已报道，就要去找这个病毒、细菌、寄生虫种所特有的序列，要求种间序列差异尽量大，而种内序列变异尽量小；如果是进行同一种类不同基因型鉴定或群体遗传结构研究，就要选择种内序列变异很大的序列，一般是非编码序列，例如微卫星序列、核糖体DNA基因间隔序列等。Q5请介绍一下宠物市场上检测弓形虫的方法有哪些及该病的流行率？我们国家的宠物行业发展非常迅速，宠物中危害很大、尤其是对猫危害很大的寄生虫病就是弓形虫病。市面上有很多针对宠物弓形虫病的检测试剂盒，有ELISA的，也有用MAT的，效果都不错。宠物猫的弓形虫感染率并不高，10%左右；但是流浪猫、农村家养猫的弓形虫感染率还是很高。Q6聚集性的宠物店怎么预防、治疗弓形虫病呢？先通过检测试剂盒检测宠物猫是否感染弓形虫，然后对猫粪便进行集中高温处理。Q7人应该怎么防控弓形虫病？弓形虫病属于典型的病从口入的病，只要不乱吃（不吃半生不熟的东西），注意卫生，饭前洗手就能预防。弓形虫病在南美洲人群流行很严重，毒力较强。在我们国家流行的弓形虫主要基因型为Chinese1(ToxoDB#9)，毒力比较弱；尽管有约10%（1.4亿）的人群感染，但绝大多数为隐性感染没有症状（有点像现在的新冠病毒感染）；但对于免疫缺陷患者，感染弓形虫病的后果就会很严重，甚至致死。不少艾滋病患者就是死于弓形虫继发感染。Q8片形吸虫、华支睾吸虫人体感染在我国被低估了，需要怎样引起人们和国家的重视？片形吸虫和华支睾吸虫为分类学上两类不同的吸虫，但它们的成虫都寄生于人体肝脏，它们在我国人体的感染率确实被低估了，尤其是大片吸虫病之前在我国云南省暴发过一次。华支睾吸虫在人医称为肝吸虫，我国是华支睾吸虫的主要感染地区，官方数据大约有600万人感染，现在国家也很重视，去年国家医学口立项的国家重点研发计划项目，人体寄生虫学方面唯一的项目就包括有华支睾吸虫。Q9国内现在弓形虫病疫苗研发是什么情况？像新冠病毒一样，防控弓形虫病最高效的手段应该是接种疫苗，但目前还没有高效、安全的弓形虫病疫苗。因此，研发安全、高效的弓形虫病疫苗是弓形虫病研究的终极目标。我国对研发弓形虫病疫苗比较重视，但困难重重，因为弓形虫基因组较大，编码8000多个基因，筛选高保护性毒力基因不易；单个基因DNA疫苗、重组蛋白疫苗只能提供部分保护。基因敲除弱毒疫苗可能是弓形虫病疫苗的研发方向，但是目前报道的弱毒疫苗的保护