食品微生物检验常用的试剂及其配制-培养基的配制

常见培养基的配方及其特点目录/Contents1基础培养基培养基鉴别和选择培养基23加富培养基01基础培养基（1）马铃薯葡萄糖培养基（简称PDA）（分离培养霉菌用）

马铃薯300g蔗糖（或葡萄糖）20g

琼脂20g蒸馏水1000mLpH自然培养基的配制：将马铃薯去皮切块，加1000mL蒸馏水，煮沸10～20min。用纱布过滤，补加蒸馏水至1000mL。加入葡萄糖和琼脂，加热溶化，分装，121℃高压灭菌20min。01基础培养基

（2）牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH7.0~7.2水1000mL121℃灭菌20min。01基础培养基（3）吲哚培养基（蛋白胨水）用于细菌靛基质试验胰酪蛋白胨10g氯化钠5gL-色氨酸0.5g蒸馏水1000mLpH7.4。121℃灭菌15min。（4）玉米粉琼脂（培养真菌用）玉米浸粉7.0g琼脂15.0gpH值6.0±0.201基础培养基（5）月桂基硫酸盐胰蛋白胨MUG培养基胰蛋白胨20.0g氯化钠5.0g乳糖5.0g磷酸氢二钾2.75g月桂基硫酸钠0.1g磷酸二氢钾2.75gpH值6.8±0.2温度25℃（6）改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂蛋白胨20.0g山梨醇10.0g三号胆盐1.5g氯化钠5.0g中性红0.03g结晶紫0.001g琼脂15.0gpH值7.2±0.201基础培养基（7）营养琼脂斜面蛋白胨5.0g牛肉粉3.0g琼脂15.0gpH值7.3±0.1（8）PSE琼脂（用于粪链球菌的选择性分离和计数（SN标准）蛋白胨20.0g酵母浸粉5.0g牛胆汁物10.0g柠檬酸钠1.0g氯化钠5.0g柠檬酸铁铵0.5g叠氮化钠0.25g七叶苷1.0g琼脂15.0gpH值7.1±0.201基础培养基（9）沙氏琼脂培养基（用于真菌检测）蛋白胨10.0g葡萄糖40.0g琼脂20.0gpH值5.6±0.2（10）葡萄糖琼脂胰蛋白胨10.0g酵母粉1.5g氯化钠5.0g溴甲酚紫0.015g葡萄糖10.0g琼脂12.0gpH值6.9-7.101基础培养基（11）葡萄糖胰蛋白胨琼脂胰酪蛋白胨10.0g葡萄糖5.0g琼脂15.0g溴甲酚紫0.04pH值6.7±0.1（12）LB（Luria-Bertani）培养基蛋白胨10g酵母膏5g氯化钠10g蒸馏水1000mLpH7.0。121℃灭菌20min。01基础培养基（13）麦氏（Meclary）琼脂（酵母菌）葡萄糖1g氯化钾1.8g酵母浸膏2.5g醋酸钠8.2g琼脂15-20g蒸馏水1000mL113℃灭菌20min。（14）玉米粉蔗糖培养基玉米粉60g磷酸二氢钾3g维生素B1100mg蔗糖10g七水合硫酸镁1.5g水1000mL121℃灭菌30min，维生素B1单独灭菌15min后另加。01基础培养基（15）马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红（rosebengal，玫瑰红水溶液）100mL琼脂15~20g蒸馏水800mLpH自然112℃灭菌30min。临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。01基础培养基（16）查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH自然121℃灭菌20min。01基础培养基（17）无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）甘露醇（或葡萄糖）10g磷酸二氢钾0.2g七水合硫酸镁0.2g氯化钠0.2g二水合硫酸钙0.2g碳酸钙5g蒸馏水1000mLpH7.0~7.2。113℃灭菌30min。01基础培养基（18）营养肉汤（NB）（一般细菌培养,转种,复壮,增菌等（GB标准）（19）乳糖蛋白胨培养液（“水的细菌学检查”用）（20）煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）（用于大肠菌群、大肠杆菌的测定(GB2008、SN标准)）（21）BBL琼脂培养基（用于双岐杆菌分离培养（GB标准））（22）疱肉培养基基础（加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB标准)）（23）柠檬酸盐培养基（用于测定血清，血浆及相关液体等样本）02鉴别和选择培养基（1）伊红美蓝培养基（EMB培养基）蛋白胨10.0g乳糖10.0g磷酸氢二钾2.0g琼脂15.0g伊红0.4g美蓝0.065gpH值7.1±0.2培养基的配制：将已灭菌的蛋白胨水培养基（pH7.6）加热熔化，冷却至60℃左右时，再把已灭菌的乳糖溶液，伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。摇匀后，立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度，115℃灭菌20min。02鉴别和选择培养基（1）伊红美蓝培养基（EMB培养基）蛋白胨10.0g乳糖10.0g磷酸氢二钾2.0g琼脂15.0g伊红0.4g美蓝0.065gpH值7.1±0.2培养基的配制：将已灭菌的蛋白胨水培养基（pH7.6）加热熔化，冷却至60℃左右时，再把已灭菌的乳糖溶液，伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。摇匀后，立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度，115℃灭菌20min。02鉴别和选择培养基（1）伊红美蓝培养基（EMB培养基）蛋白胨10.0g乳糖10.0g磷酸氢二钾2.0g琼脂15.0g伊红0.4g美蓝0.065gpH值7.1±0.202鉴别和选择培养基（2）复红亚硫酸钠培养基（远藤氏培养基）（3）SS琼脂（用于沙门氏菌，志贺氏菌的选择性分离培养）（4）卵黄琼脂培养基基础（用于肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养（GB标准））(5)沙门氏菌显色培养基（用于沙门氏菌的显色培养，沙门氏菌显紫色）03加富培养基（1）EEM培养基（用于致病性大肠杆菌的增菌培养和肠杆菌的增菌培养）（2）肠道菌增菌肉汤（EE）（用于肠道菌的增菌培养(GB标准)）（3）MEE肉汤（用于肠道菌的选择性增菌培养(SN标准)）（4）THB培养基（用于链球菌增菌培养）（5）肠球菌肉汤（用于肠球菌增菌培养）（6）改良Giolitti-Cantobi肉汤（用于金黄色葡萄球菌的增菌培养）（7）普通肉汤培养基（用于金黄色葡萄球菌的增菌培养（SN标准））（8）胰蛋白胨大豆肉汤（增菌培养）常用培养基的制备目录/Contents1配制培养基的准备工作培养基制备培养基制备的基本程序201配制培养基的准备工作（1）水和药品的准备配制培养基用的水最好用蒸馏水，但精细的试验需要使用重蒸馏水。化学药品要用分析纯或化学纯，称量要准确，每称一种药品都必须准确记载，以便事后查对。01配制培养基的准备工作（2）器皿和用具的准备器皿种类为：不同型号的试管、烧杯、锥形瓶、三角瓶、玻璃棒、滴管、平皿、培养瓶、培养基分装器、移液管、容量瓶等。制备培养基所用的试管、烧杯、锥形瓶、三角瓶、玻璃棒、滴管、平皿、培养瓶等玻璃仪器在使用前，先要用肥皂水洗刷，再用清水反复冲洗干净，最后用蒸馏水冲一遍，晾干或烘干备用。02培养基制备的基本程序（1）培养基配方的选定（2）培养基的制备记录每制备一次培养基都要作记录，包括培养基名称，配方及其来源和各种成份的编号，还要记录好pH值、消毒温度、消毒时间和制备的日期及其制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制备好的培养基一同存放、以防发生混乱。（3）培养基成分的称取（4）培养基各成份的混合和溶化02培养基制备的基本程序（5）培养基pH的初步调整用5%的NaOH或5%HC1将培养基pH调至所需范围。（6）培养基的过滤02培养基制备的基本程序（7）培养基的分装培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、