实验复习全集

实验复习专题实验一用显微镜观察多种多样的细胞一、显微镜操作技能及相关知识总结1.注意事项(1)调节粗准焦螺旋使镜筒下降时，两眼要注视物镜与盖玻片之间的距离，到快接近时(距离约为0.5cm)停止下降。(2)首先用低倍镜观察，找到要放大观察的物像，移到视野中央，然后换上高倍物镜。(3)换上高倍物镜后，不能再转动粗准焦螺旋，而只能用细准焦螺旋来调节。(4)观察颜色深的材料，视野应适当调亮，反之则应适当调暗；若视野中出现一半亮一半暗，则可能是反光镜的调节角度不对；若观察花生切片标本材料一半清晰一半模糊不清，则可能是花生切片厚薄不均造成的。2．目镜与物镜的结构及其长短与放大倍数之间的关系(1)物镜越长，放大倍数越大，距装片距离越近，如H1；反之则放大倍数越小，距装片距离越远，如H2。(2)目镜越长，放大倍数越小；反之则放大倍数越大。3．高倍镜与低倍镜的比较物像大小看到细胞数目视野亮度物镜与载玻片的距离视野范围高倍镜大少暗近小低倍镜小多亮远大4.显微镜成像特点显微镜下所成的像是倒立的虚像，即上下、左右均是颠倒的。细胞在显微镜下的像偏右上方，实际在载玻片上是偏左下方，要将其移至视野中央，应将载玻片向右上方移动，即物像位于哪个方向，则应向哪个方向移动装片，即“同向移动”原则。但研究细胞质环流方向时，显微镜下观察到的方向和实际环流方向一致。5．显微镜的放大倍数

(1)显微镜的放大倍数是指物体的长度或宽度的放大倍数，而不是面积或体积。(2)总的放大倍数是目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。6．判断污物存在的位置(1)污物可能存在的位置是：物镜、目镜或装片。(2)判断方法：分别移动载玻片、物镜和转动目镜，观察污物是否移动，来判断污物所处的位置。应用指南：视野中细胞数目的相关计算。若视野中细胞成单行，则计算时只考虑长度或宽度，可根据放大倍数与视野范围成反比的规律计算。若视野中充满细胞，计算时应考虑面积的变化，可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算。二、显微观察类实验总结用显微镜观察的方式分为两种：1．原色观察：即观察材料不用染色，直接用显微镜观察即可。相关实验有：使用高倍显微镜观察几种细胞、用高倍显微镜观察叶绿体、观察植物细胞的吸水和失水等。2．染色观察：即观察材料要经染色剂染色后才可用显微镜观察。相关实验有：观察DNA和RNA在细胞中的分布、用高倍显微镜观察线粒体、观察细胞的有丝分裂或减数分裂等。实验二检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质一、实验原理生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。3．蛋白质＋双缩脲试剂―→紫色

二、实验流程图示先根据选材预测实验结果，然后再实验验证，因此本实验属验证性实验。1．还原糖的检测和观察结论：还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，说明组织样液中有还原糖。注：溶液颜色的变化过程为浅蓝色―→棕色―→砖红色2．脂肪的检测和观察方法一：花生种子匀浆＋3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色方法二：3．蛋白质的检测和观察选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液结论：说明组织样液中存在蛋白质4．淀粉的检测和观察实验注意问题1．实验材料的选择(1)还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅，易于观察。可选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等，但不能选用甜菜、甘蔗，因为它们所含的蔗糖是一种非还原糖；马铃薯因含淀粉较多也不能做实验材料；不能选西瓜、血液(含葡萄糖)、含还原糖的绿色叶片等做实验材料，以避免颜色的干扰。(2)脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选富含脂肪的花生种子。(3)蛋白质的鉴定实验中，最好选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋的蛋清。2．做鉴定蛋白质的实验时，在鉴定之前，可以留出一部分样液，以便与鉴定时样液的颜色变化作对照，这样可以增强说服力。3．蛋白质要稀释主要是防止蛋白质与双缩脲反应后黏固在试管内壁上，使反应不彻底，也不易刷洗试管。比较项目斐林试剂双缩脲试剂不同点使用方法甲液和乙液混合均匀后方可使用，且现配现用使用时先加A液再加B液呈色反应条件需水浴加热不需加热即可反应反应原理还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原为Cu2O具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2＋反应生成络合物颜色砖红色紫色浓度乙液CuSO4溶液浓度为0.05g/mLB液CuSO4溶液浓度为0.01g/mL相同点都含有NaOH溶液、CuSO4溶液两种成分，且所用NaOH溶液浓度都是0.1g/mL【辨析比较】斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析双缩脲是一种物质，其结构式为：因其结构含有肽键，所以在碱性环境中与Cu2＋反应生成紫色络合物。因此把与其反应的NaOH溶液和CuSO4溶液称为双缩脲试剂。应用指南：该实验原理、方法、步骤可用于对生物组织、消化液(如唾液)、食品(如奶粉)进行某种成分的检测或鉴定，也可用于医学上某些疾病的诊断，如糖尿病、肾炎等。实验三观察DNA和RNA在细胞中的分布(2)盐酸可改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离。2．实验流程冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s3．实验现象及相关结论现象结论绿色明显集中且接近细胞中央DNA主要分布于细胞核中

绿色周围的红色范围较广RNA广泛分布于细胞质中比较归纳教材中鉴定类实验1．本实验的注意事项(1)几种液体在实验中的作用①0.9%的NaCl溶液：保持口腔上皮细胞正常形态②8%的盐酸： a.改变细胞膜的通透性

b．使染色体中DNA与蛋白质分离③蒸馏水：a.配制染色剂；b.冲洗载玻片(2)关于甲基绿和吡罗红溶液的配制：甲基绿吡罗红染色液包括A液和B液，使用时现用现配。(3)由于绿色植物叶肉细胞含叶绿体，为避免色素的干扰，该实验不宜选用绿色植物的叶肉细胞。(4)DNA和RNA在细胞核和细胞质中都有分布，只是量的多少不同。2．某些特定化学物质的检测方法验证鉴定类实验常用的试剂或指示物作用现象碘液检测、鉴定淀粉淀粉遇碘变蓝Ca(OH)2溶液检测、鉴定CO2CO2使Ca(OH)2溶液变浑浊斐林试剂

检测、鉴定还原糖砖红色沉淀重铬酸钾鉴定酒精变为灰绿色双缩脲试剂检测、鉴定蛋白质

紫色苏丹Ⅲ/Ⅳ染液检测、鉴定脂肪

橘黄色/红色在“观察DNA和RNA在细胞中分布”的实验中，下列说法正确的是(

)A.染色时先用甲基绿染液，再用吡罗红染液B.用8%的盐酸目的之一是使DNA与蛋白质分离，使DNA水解C.酒精灯烘干载玻片，可迅速杀死细胞，防止细胞死亡时溶酶体对核酸的破坏D.用高倍显微镜可以比较清楚地看到呈绿色的染色体和呈红色的RNA分子实验四观察叶绿体和线粒体1.实验原理(1)叶肉细胞中的叶绿体，呈绿色、扁平的椭球形或球形，散布于细胞质中，可以在高倍显微镜下观察它的形态。(2)线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中，健那绿染液能使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色。通过染色，可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。2．实验过程(1)观察叶绿体制作黑藻叶片临时装片→低倍镜下找到叶片细胞→高倍镜下观察。(2)观察线粒体取材→染色→制片→低倍镜下找到口腔上皮细胞→高倍镜下观察。1.材料选择普通光学显微镜能够观察的材料，必须是薄的、近乎透明的。观察叶绿体时选择黑藻，是因为叶片是绿色的单层细胞，不需加工即可进行观察。2．制作装片和镜检临时装片中的材料要随时保持有水状态，以保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞质基质中，否则，细胞失水收缩，将影响细胞器形态的观察。规律总结：叶绿体的形态、运动、分布与功能的关系(1)叶绿体呈扁平的椭球形，利于运动。(2)叶绿体的运动使其在不同光照强度下改变方向，在强光下，以其侧面朝向光源，避免被强光灼伤；在弱光下，以其正面朝向光源，以接受充足的光照。(3)叶绿体在细胞中的分布不均匀，叶肉细胞栅栏组织中的叶绿体比海绵组织中的多，可以接受更多的光照。实验五观察植物细胞的质壁分离及复原1.实验原理：成熟的植物细胞构成渗透系统可发生渗透作用。2．质壁分离与复原实验流程3．质壁分离的原因(1)外因：外界溶液浓度>细胞液浓度(1)在实验中，当质壁分离现象出现后，观察时间不宜过长，以免细胞因长期处于失水状态而死亡，影响质壁分离复原现象的观察。(2)不选动物细胞做实验材料是因为动物细胞无细胞壁，不会在失水时发生质壁分离现象。(3)本实验所用的方法为引流法，采用了自身对照(前测和后测)。(4)当以可吸收的物质做溶质时(如甘油、尿素、KNO3、乙二醇等)，可出现质壁分离和自动复原现象。(5)质壁分离时，原生质层的外界面是细胞膜。质壁分离实验的拓展应用及方法1．判断细胞的死活5．鉴别不同种类的溶液(如KNO3和蔗糖溶液)实验六探究影响酶活性的条件1.温度对酶活性的影响(1)实验原理②温度影响酶的活性，从而影响淀粉的水解，滴加碘液，根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。(2)实验设计思路(3)实验设计程序本实验应注意：①不宜选用斐林试剂，因为斐林试剂与还原糖只有在加热的条件下才有砖红色沉淀生成，而该实验需严格控制不同的温度；②也不宜选用过氧化氢酶催化H2O2分解，因为过氧化氢酶催化的底物过氧化氢在加热的条件下分解也会加快。(2)实验程序序号实验操作内容试管1试管2试管31注入等量过氧化氢酶溶液2滴2滴2滴2注入等量不同pH的溶液1mL蒸馏水1mL盐酸1mLNaOH3注入等量的H2O2溶液2mL2mL2mL4观察现象有大量气泡产生无气泡产生无气泡产生关于酶的实验设计或评价的题目1．需要严格按照实验设计的原则如单一变量原则、等量原则等进行设计：根据实验的单一变量原则，探究某一因子对实验的影响时，其他无关变量要保证相同且为最佳条件，否则就不能得出正确的实验结果。2．注意排除酶的特性本身的影响，例如专一性的影响，酶是否能够催化底物反应；例如高效性可导致酶在短时间内催化底物反应完成，而影响实验结果，因此应将酶和底物先达到反应条件一段时间，使相应条件下酶的活性影响到一定程度后，再混合继续实验。实验七探究酵母菌细胞的呼吸方式1.实验原理(1)酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生存，属于兼性厌氧菌。酵母菌进行有氧呼吸能产生大量的CO2，在进行无氧呼吸时能产生酒精和CO2。(2)CO2可使澄清的石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。(3)橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下可与乙醇发生化学反应，变成灰绿色。2．实验流程实验中的关键步骤(1)通入A瓶的空气中不能含有CO2，以保证使第三个锥形瓶中的澄清石灰水变混浊的是由酵母菌有氧呼吸产生的CO2所致。(2)B瓶应封口放置一段时间，待酵母菌将B瓶中的氧气消耗完后，再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶，确保是无氧呼吸产生的CO2通入澄清的石灰水中。该实验为对比实验，有氧和无氧条件下的实验都为实验组。实验八绿叶中色素的提取和分离1.实验原理(1)叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇(或丙酮)中，所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。(2)色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢，因而可用层析液将不同色素进行分离。2．实验流程基本技术要求(1)实验成功的关键①叶片要新鲜、颜色要深绿。②滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以免滤液挥发。③滤液细线不仅要细、直，而且要含有比较多的色素。④滤纸上的滤液细线不能没入层析液中。(2)注意事项①制备定性滤纸条时，注意双手尽量不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。②根据烧杯的高度制备滤纸条，让滤纸条长度高出烧杯1cm，高出的部分做直角弯折。③画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中。④研磨要迅速、充分。a.因为无水乙醇容易挥发；b.为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素；c.叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。⑤制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角，这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，便于观察实验结果。(1)从色素带的宽度可推知色素含量的多少；(2)从色素带的位置可推知色素在层析液中溶解度大小；(3)在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a与叶绿素b，距离最远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。实验九观察植物细胞的有丝分裂一、实验原理1．植物的分生组织细胞有丝分裂较为旺盛。2．有丝分裂各个时期细胞内染色体行为变化不同，根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。3．细胞核内的染色体(质)易被碱性染料着色。二、实验流程图示洋葱根尖培养：实验前3～4d，待根长到5cm1.实验成功的关键(1)剪取生长旺盛、带有分生区的根尖，同时注意剪取的时间，一般在上午10点至下午2点左右，此时分生区细胞分裂旺盛。(2)解离充分，使细胞分离开，是实验成功的必备条件。(3)染色液的浓度和染色时间必须掌握好，应注意染色不能过深，否则镜下一片紫色，无法观察。(4)压片时用力必须恰当，过重会将组织压烂，过轻则细胞未分散，二者都将影响观察。2．本实验的注意事项(1)解离完一定要漂洗，目的是洗去多余的盐酸，防止解离过度和影响染色。(2)将染色质和染色体染色，时间不要太长，3～5min。(3)加盖玻片时，注意防止产生气泡。(4)用显微镜观察装片时，要遵循“先低后高”的原则。(5)观察时应先找到呈正方形的分生区细胞，观察时，要注意边观察边移动装片，观察有丝分裂各个时期。(6)在观察装片时，装片的移动方向与物像的移动方向相反。实验十观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片1.实验原理蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞，再形成精子。此过程要经过两次连续的细胞分裂：减数第一次分裂和减数第二次分裂。在此过程中，细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化，因而可据此识别减数分裂的各个时期。2．实验流程1.判断各期细胞的依据是减数分裂过程中各个时期染色体变化的特点。2．可通过观察多个精原细胞的减数分裂，推测出一个精原细胞减数分裂过程中染色体的连续变化。原因是：

(1)同一生物的细胞所含遗传物质相同，增殖过程相同。

(2)同一时刻不同细胞可能处于不同细胞周期的不同阶段。3．先用低倍镜观察找到各期细胞，再用高倍镜仔细观察染色体的形态、位置和数目。小鼠常被用作研究