微生物基础革兰阴性杆菌 肠杆菌科菌(全国基层医疗机构抗菌药物合理应用)

全国基层医疗机构抗菌药物合理利用培训微生物基础：革兰阴性杆菌肠杆菌科菌倪语星上海交通大学医学院附属瑞金医院临床常见的革兰阴性杆菌主要分为两大群肠杆菌科非发酵菌群肠杆菌科（Enterobactericaeae）包括致病性较强、能引起人类传染病的菌属--鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌能引起人类腹泻和肠道感染的菌属埃希菌属志贺菌属沙门菌属耶尔森菌属一、概述与医院感染有关的条件致病菌枸橼酸杆菌属克雷伯菌属肠杆菌属泛菌属沙雷菌属变形杆菌属普罗威登菌属摩根菌属有许多细菌既是肠道的正常菌群，也是条件致病菌。在一定的条件下，能引起机会感染或二重感染。1）机体抵抗力下降2）寄居部位的改变3）肠道菌群失调约有40种以上肠杆菌科的菌种可以在临床标本中出现。二、临床意义可致化脓性疾病、肺炎、脑膜炎、菌血症以及伤口、泌尿道和肠道的感染。其中有些细菌是引起医院感染的重要病原。本科细菌占临床分离菌总数的50％和临床分离的革兰阴性杆菌总数的80％，将近50％的菌血症、70％以上的泌尿道感染和大量的肠道感染由肠杆菌科细菌引起。（一）人类肠道外感染除志贺菌外，许多肠杆菌科细菌均可引起肠外感染，如大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌等均可引起泌尿道、呼吸道、伤口和中枢神经系统的感染，且往往为医院感染。鼠疫耶尔森菌能引起甲类传染病：鼠疫。（二）人类肠道感染肠杆菌科细菌也是人和动物肠道感染的重要病原。虽然本科中许多细菌均与腹泻有关，但比较明确的肠道病原菌是肠杆菌科中的埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属和耶尔森菌属。主要引起各种急、慢性肠道感染、食物中毒、旅行者腹泻及肠热症等。三、生物学特性肠杆菌科细菌具有以下共同的生物学特性：1、形态特征：革兰阴性杆状或球杆状、无芽胞、多数有鞭毛，能运动，有致病性的菌株多数有菌毛；2、培养特性：需氧或兼性厌氧，营养要求不高，在普通培养基和麦康凯培养基上生长良好；3、生化特性：发酵葡萄糖（产酸或产酸产气）、触酶阳性、氧化酶阴性、可将硝酸盐还原至亚硝酸盐。肠杆菌科的共同特性1.形态染色相似：革兰阴性杆菌2.培养特性相同：普通培养基上生长良好3.生化反应活泼：发酵葡萄糖，氧化酶阴性，触酶阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐，O/F试验为发酵型。4.抗原构造复杂5.抵抗力弱6.易变异四、微生物学检验标本采集1．肠外标本采自不同的感染部位如血液、体液、呼吸道、伤口、尿液及其他各种标本。2．肠道标本

宜在疾病的早期留取新鲜的粪便标本，挑取其中的脓血和粘液部分进行粪便培养。肠杆菌科细菌与其它革兰阴性杆菌的区别试验肠杆菌科弧菌科非发酵菌巴斯德菌科葡萄糖发酵发酵氧化或不分解发酵氧化酶－＋＋＋形态杆状弧状、杆状杆状球杆状鞭毛周鞭毛或无单鞭毛单、丛、周鞭毛或无无鞭毛1.科间鉴别首先根据苯丙氨酸脱氨酶和VP试验，将肠杆菌科14个菌属分为三个组：1）苯丙氨酸脱氨酶阴性和VP试验阴性：埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸菌属和爱德华菌属。2）苯丙氨酸脱氨酶阴性和VP试验阳性：克雷伯菌属、肠杆菌属、哈夫尼亚菌属、泛菌属、沙雷菌属、耶尔森菌属。3）苯丙氨酸脱氨酶阳性和VP试验阴性：变形杆菌属、摩根菌属、普罗威登斯菌属。2.肠杆菌科分组大肠埃希菌革兰染色革兰阴性直短杆状，多数有鞭毛，能运动，某些菌株尤其是引起肠外感染的菌株有荚膜（微荚膜）和周身菌毛。形态特征大肠埃希菌大肠埃希菌菌落特征（血平板）兼性厌氧，营养要求不高，在普通营养琼脂上生长良好，形成较大的圆形、光滑、湿润、灰白色的菌落，在血琼脂上某些菌株可产生β-溶血。培养特性大肠埃希菌菌落特征（MAC）在肠道选择培养基上可发酵乳糖，形成有色菌落。临床意义肠道外感染：泌尿道感染（最常见）胆道感染、腹膜炎、肺炎菌血症、新生儿脑膜炎肠道感染：ETEC、EPEC、EIEC、EHEC

又可分为3个亚种：肺炎亚种（subsp.pneumoniae）臭鼻亚种（subsp.ozaenae）鼻硬结亚种（subsp.rhinoscleromatis）肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）肺炎克雷伯菌革兰染色（一）形态结构革兰阴性杆菌，无鞭毛，无芽胞肺炎克雷伯菌荚膜染色病人标本直接涂片或在营养丰富培养基上的培养物可见菌体外有明显的荚膜。肺炎克雷伯菌的菌落特征（血琼脂平板）（二）培养特性兼性厌氧，营养要求不高，在初次分离培养基可形成较大、凸起灰白色粘液型的菌落。菌落大而厚实、光亮，相邻菌落容易发生融合肺炎克雷伯菌的菌落特征（MAC）在MAC培养基上发酵乳糖产酸，形成较大的粘液型、红色的菌落，红色可扩散至菌落周围的培养基中。肺炎克雷伯菌粘丝试验用接种针沾取时可挑出长丝状细丝克雷伯菌属与其他条件致病菌鉴别

生化反应

克雷伯菌属肠杆菌属泛菌属哈夫尼菌属沙雷菌属肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌产气肠杆菌阴沟肠杆菌成团泛菌蜂房哈夫尼菌粘质沙雷菌液化沙雷菌吲哚－+－－（－）－－－动力－－++（+）（+）++赖氨酸+++－－+++精氨酸－－－+－－－－鸟氨酸－－++－+++Dnase（25℃）－－－－－－+（+）明胶酶（22℃）－－－－－－++乳糖++++d－－－蔗糖++++d－++山梨醇++++d－++侧金盏花醇+++（－）－－d－阿拉伯糖++++++－+克雷伯菌属的细菌多感染免疫力低下的人群，是医院感染中最重要的条件