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补中益气汤治疗脾胃虚型慢性萎缩性胃炎的临床研究
补中益气汤是金朝著名专家李东元在《脾胃论》中所说的。这是治疗各种气虚证的经典方剂。主要用于慢性循环系统疾病的治疗。本研究观察补中益气汤对脾气虚型慢性萎缩性胃炎大鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响,探讨该方治疗本病的作用机理。1材料和方法1.1动物清洁级12周龄Wistar大鼠50只,体重180-220g,雌雄各半,分笼饲养,每笼5只,常规喂养标准饲料。1.2中药传统水煮法补中益气汤(由黄芪、甘草(炙)各1.5g,人参(去芦)0.9g,当归身(酒焙干或晒干)0.6g,橘皮(不去白)0.9g,升麻0.9g,柴胡0.9g,白术0.9g组成),按照中药传统水煮方法煎煮,100℃恒温水浴加热浓缩,分别得到含生药1g/mL(高剂量)、0.5g/mL(中剂量组)、0.25g/mL(低剂量组)的药液。1.3中药浸食,喂饲参照文献方法略有改进。动物适应性喂养1周后,随机分为5组,即:空白组、模型组和四君子汤低、中、高剂量治疗组,每组10只。除空白组外,其余动物造模:给予0.2%的去氧胆酸钠溶液代水自饮,45d后,加中药煎剂(厚朴、枳实、大黄以3∶3∶2比例制成)给大鼠灌胃,共45d,同时隔日喂饲,日食不限量。自饮去氧胆酸钠14d后,足部皮内注射30%胃组织悬液与等量完全弗氏佐剂混合乳剂0.1mL,7d后再腹腔注射30%胃组织悬液0.1mL,确认模型制作成功。造模后大鼠整体反应判断标准:精神倦怠,嗜卧,懒动,拱背,蜷缩,扎堆;舌淡苔少,眼眯,耳尾色白、毛无光泽;严重时出现受惊动时无神,抓取时挣扎无力;软便,溏便,泄泻,受激排便率增高;食量减少,体重增长减慢或体重下降;体温小变或略有降低。如出现上述表现,则可确认造模成功。1.3补中益气汤药液制备于造模90d开始,补中益气汤各剂量组灌服相应浓度补中益气汤药液1.2mL,模型组灌服1.2mL蒸馏水,每天1次,连续42d。各组动物常规喂养,给药结束后进行有关指标检测。1.4t细胞亚群检测治疗结束后,大鼠禁食不禁水12h,按45mg/kg体重腹腔注射戊巴比妥钠将动物麻醉,摘眼球取血,置于肝素抗凝的试管中,应用EPICS-XL型流式细胞仪(美国Bec:kananCoulLea公司)检测T淋巴细胞亚群(试剂盒由浙江杭州联科生物技术工程公司提供),全部操作按照说明书进行。1.5肝胰腺指数和脾指数的测定大鼠脱颈椎处死,将腹腔打开,切取大鼠胸腺、脾脏,并用滤纸吸干表面的血液,用十万分之一电子天平称重。计算胸腺指数和脾指数:胸腺指数=胸腺重量/大鼠体重×100%;脾指数=脾重量/大鼠体重×100%。1.6统计处理各组数据以均数±标准差表示,组间比较采用方差分析。所有数据输入SPSS13.0统计软件进行处理。2结果2.1补中益气汤治疗cd3+、cd4+阳性细胞数由表1可见,造模后模型组CD3+、CD4+阳性细胞数目明显下降,CD8+阳性细胞数明显升高,CD4+/CD8+比值降低,经补中益气汤治疗后,治疗组CD3+、CD4+阳性细胞数目明显升高,CD8+阳性细胞数明显减少,CD4+/CD8+比值升高,与模型组比较,补中益气汤低、中剂量组有显著差异(P<0.05),高剂量组有极显著性差异(P<0.01),提示补中益气汤有治疗作用。低剂量组与高剂量组补中益气汤比较(P<0.05),提示补中益气汤高剂量组有较好的疗效。2.2补中益气汤对大鼠尾腺指数、脾指数的影响由表2可见,造模后模型组胸腺指数、脾指数明显下降,经补中益气汤治疗后,治疗组胸腺指数、脾指数明显升高,与模型组比较,补中益气汤低、中剂量组有显著差异(P<0.05),高剂量组有极显著差异(P<0.01),提示补中益气汤有治疗作用。低剂量与高剂量组比较(P<0.05),提示补中益气汤高剂量有较好的疗效。3cd4+、cd8+与cd8+的联系,原理如下大量的研究表明,慢性萎缩性胃炎患者存在免疫功能低下,并与胃病的严重程度有关。T细胞分化抗原相应单抗的临床意义主要在于评估机体免疫状态。T淋巴细胞亚群相作用维持着机体的正常免疫功能,在保护机体免受各种病原体感染的过程中起着重要的作用。CD3+是与T细胞抗原受体相关连的一种表面膜抗原,常用于检测成熟T细胞数;CD4+代表辅助性T细胞,功能为协助B细胞、单核及巨噬细胞、杀伤性T细胞发挥免疫功能;CD8+代表抑制和细胞毒性T细胞。在T细胞亚群中,CD4+/CD8+的数量和适当的比例是免疫调节的关键。CD4+、CD8+彼此相互调节,能表现辅助和抑制的作用,是免疫系统的核心。检测T淋巴细胞亚群可以反映机体的免疫功能状态。胸腺和脾脏是机体重要的免疫器官,两者的脏器系数常被用作衡量机体免疫功能的初步指标。补中益气汤是治疗脾气中气下陷的基本方,对于此种病症者临床疗效显著。方中黄芪补中益气、升阳固表为君;人参、白术、甘草甘温益气,补益脾胃为臣;陈皮调理气机,当归补血和营为佐;升麻、柴胡协同参、芪升举清阳为使。综合全方,一则补气健脾,使后天生化有源,脾胃气虚诸证自可痊愈;二则升提中气,恢复中焦升降之功能,使下脱、下垂之证自复其位。有研究表明,补中益气汤有抗基因突变及抗肿瘤作用,强于四君子汤。同时,本方还能调节机体免疫功能,延长动物存活时间。提示在临床上使用抗肿瘤化疗药物时,配合应用本方,可提高疗效,降低化疗药物毒副反应。补中益气汤能使脾虚证患者减退的免疫功能得以在体液和细胞免疫功能方而全而明显提高,尤其是细胞免疫功能,其原因在于补中益气汤直接促进表现为特异性免疫淋巴细胞的分化、增殖,提高非特异免疫的NK细胞活性,嗜中性细胞吞噬指数,同时还能改善消化功能,增加免疫球蛋白的产生。本研究结果表明,慢性萎缩性胃炎外周血CD3+、CD4+阳性细胞数显著降低,CD8+升高,CD
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