复方丹参片中冬虫夏草生长量测定的研究

复方丹参片中冬虫夏草生长量测定的研究

复方丹参是由三七、丹参和婆罗洲三味药物加工而成的片剂。具有活血化瘀、理气止痛的功效。其中丹参祛瘀止痛,活血通经,清心除烦70,三七散瘀止血,消肿定痛11,冰片开窍醒神,清热止痛136,三味药相辅相成,缺一不可。复方丹参片中丹参和三七的成分定量测定研究文献较多,且已采用指纹图谱的方法进行了控制研究,而冰片定量测定报道较少,冰片在处方中投料量较少,且具有挥发性,在生产总混不易混匀,为考察本品中冰片的含量均匀度,特制定本法,从而达到控制本品中冰片的含量均匀度,经试验研究选用气相色谱法来测定本品中冰片的含量,方法可行,质量可控。1含量测定用日本岛津公司2010气相色谱仪,FID检测器;龙脑对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:110881-200706,含量以99.2%计,供含量测定用);异龙脑对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:1512-200201,供含量测定用);其余试剂均为分析纯。2方法和结果2.1设备进样量和分流比色谱柱DB-WAX(柱长30m,内径0.53mm,膜厚度0.25μm),进样口温度180℃,检测器温度200℃,柱温135℃,进样量为1μL,分流比5∶1。2.2龙脑对照品溶液取水杨酸甲酯适量,精密称定,加乙酸乙酯制成每1mL含5mg的溶液,作为内标溶液。另取龙脑对照品和异龙脑对照品各10mg,置20mL量瓶中,加乙酸乙酯使溶解并稀释至刻度。精密量取5mL,至10mL量瓶中,加内标溶液1mL,加乙酸乙酯至刻度,摇匀即得。2.3超声处理法取本品10片,糖衣片除去包衣,研细,精密称取0.3g,置10mL量瓶中,加乙酸乙酯8mL,超声处理(功率320W,频率40kHz)30min,放冷,加内标溶液1mL,加乙酸乙酯至刻度,摇匀,滤过,即得。2.4线性关系研究2.4.1乙酸乙酯溶液l40mg,异龙脑对照品26.45mg,置20mL量瓶中,加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(浓度为1.037mg/mL)。2.4.2龙脑回归方程2项的对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、8.0mL至10mL量瓶中,加乙酸乙酯稀释至刻度,摇匀。进样1μL。结果得龙脑回归方程为:Y=17.3X-0.0948(n=6,r=0.9997)。异龙脑回归方程为:Y=17.2X-0.0837(n=6,r=0.9997)。结果表明:龙脑在进样量为7.6~121.6ng范围内时,进样量与龙脑峰面积呈良好的线性关系。异龙脑在进样量为6.6~105.8ng范围内时,进样量与异龙脑峰面积呈良好的线性关系。2.5精密度与准确度对同一供试品溶液,按正文拟订的色谱条件,连续测定6次。结果6次测定平均含龙脑为2.3920mg/片,RSD为0.31%(n=6),异龙脑为1.4038mg/片,RSD为0.38%(n=6),试验表明,本法的精密度较好。2.6重现性和重现性对同一批样品,按定量测定的方法平行测定6份,结果含龙脑平均值为2.3838mg/片,RSD为0.79%(n=6),含异龙脑平均值为1.3947mg/片,RSD为0.81%(n=6),结果表明,本法的重现性较好。2.7稳定性研究对同一供试品溶液,每隔一定时间测定一次,共测定4次,试验表明,在25h内,被测物稳定。2.8标准物质回收率的测定2.8.1准确称取龙脑对照样品14，然后制备98mg,异龙脑对照品10.01mg,置25mL量瓶中,加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液。2.8.2龙脑、异龙脑的测定645mg/g,异龙脑4.473mg/g)9份,称取约0.15g,精密称定,置10mL量瓶中,第1~3份精密加入对照品贮备液1mL,第4~6份精密加入对照品贮备液2mL,第7~9份精密加入对照品贮备液3mL,照供试品溶液项下的方法制备、测定。结果表明,用本法测定龙脑、异龙脑的量,回收率符合规定。结果见表1,表2。2.9供试品溶液制备项的测定按处方量比例称取除冰片外其余药味,按制法制成阴性样品,照供试品溶液制备项下的方法提取,测定。结果在龙脑和异龙脑峰相应的保留时间无干扰峰,表明处方中其它成分对测定无影响,见图1。2.10样品测定取5批样品,按2.3项下方法制备供试品溶液,平行测定2份,计算冰片的含量,结果见表3。2.11冰液制备pla研钵样品,制备成冰液取本品1片,糖衣片除去包衣,研细,置10mL量瓶中,用乙酸乙酯8mL分次洗涤研钵,洗涤液并入量瓶中,超声处理30min,放冷,加内标溶液1mL,加乙酸乙酯至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,按样品的定量测定方法测定冰片含量均匀度,结果见表4。3内标溶剂的选择3.1内标的选择取水杨酸甲酯和异丙醇,各加乙酸乙酯配制成每1mL含5mg,做为内标溶液。按上述方法测试,结果水杨酸甲酯出峰时间(24min)和龙脑峰(18min)较接近,峰面积大小也较合适,而异丙醇在35min都未出峰,故内标溶剂选择水杨酸甲酯。3.2不同厂家,不同的批号之间,冰片的含量差异较大,冰片的均匀度均较差,