不同生姜提取物对雄性小鼠生殖毒性的研究课件

不同生姜提取物对雄性小鼠生殖毒性的研究答辩人：沈雪指导老师：卢静

军需科技学院食品质量与平安系研究内容研究背景研究目的研究方法试验结果结论研究背景国外已有人用生姜甲醇提取物体外作用于人的精液，分析生姜对雄性生殖系统的影响，结果发现生姜对人的精液参数产生了毒性作用

研究目的体外实验证实生姜对人的精液参数产生毒性作用，体外实验所获得的结果可能与人体或动物的整体试验结果存在一定的差异，把结果外推到人体体内实验可能有一些问题，因此有必要进行整体动物实验。初步探讨采用整体动物实验，生姜提取物对雄性生殖系统的影响，为生姜新产品的开发提供毒理学依据。

研究方法小鼠生殖脏器系数测定小鼠睾丸染色体畸变试验

小鼠精子畸形试验

试验方法20g姜粉生姜提取物50℃水浴3h

生姜醇提物生姜水提物每次加200mL水200mL乙醇煮煎3次

过滤浓缩

动物分组阴性对照组〔NCG〕环磷酰胺注射组〔CP〕生姜水提物灌胃组〔AEG〕生姜水提物灌胃和环磷酰胺注射组〔AEG+CP〕生姜醇提物灌胃组〔EEG〕生姜醇提物灌胃和环磷酰胺注射组〔EEG+CP〕动物分组动物处理方法给予受试物前隔夜禁食16小时，不禁水。按照体重给予受试物，环磷酰胺0.1ml/10g体重腹腔注射，生姜提取物和生理盐水均以0.1ml/10g体重灌胃。连续处理五天

生殖脏器系数测定计算公式：睾丸〔附睾/精囊〕脏器系数〔%〕=×100

小鼠睾丸染色体畸变试验适用于检测环境有害物质对整体哺乳动物睾丸生殖细胞染色体的损伤，是目前常用的一种较好的检测外源性化合物生殖毒性的方法。

小鼠睾丸染色体畸变试验操作：

小鼠处死→双侧睾丸→磷酸盐缓冲液〔1mL〕→剪碎→离心管定容离心10min→KCl溶液恒温20min→离心10min→固定液10min→离心10min→固定20min→混匀→滴片→染色

小鼠精子畸形试验优点：敏感性高、简明、快速、终点明确精子收集：小鼠处死→双侧附睾→磷酸盐缓冲生理盐水〔1ml〕→剪碎→再加1～2ml稀释→静止3～5分钟→精子悬液制片：涂片→枯燥→无水甲醇固定〔5分钟〕→染色〔2%伊红10～20分〕→洗片→观察试验结果

显微镜下观察1生殖脏器系数的测定2小鼠睾丸染色体畸变试验3小鼠精子畸形试验4

显微镜下观察睾丸染色体

显微镜下观察精子生殖脏器系数的测定组别睾丸脏器系数附睾脏器系数精囊脏器系数NCG0.463±0.04950.245±0.0560.659±0.226*CP0.337±0.1360.180±0.290.368±0.102AEG0.418±0.0770.207±0.0230.509±0.085EEG0.452±0.1310.230±0.0470.562±0.153*AEG+CP0.393±0.2080.222±0.0420.686±0.1187*EEG+CP0.493±0.0200.368±0.0420.522±0.081*表示与cp组比较P<0.05小鼠睾丸染色体畸变试验组别动物数（只）镜检细胞数（个）染色体畸变率（%）NCG55003.80±1.48*CP550011.0±3.54AEG55004.40±2.80*EEG55004.20±1.30*AEG+CP55007.40±1.52*EEG+CP55007.60±2.07**表示与cp组比较P<0.05小鼠精子畸形试验结论生姜提取物

1不能对小鼠的生殖脏器系数产生不利影响2不能诱发小鼠睾丸染色体畸变3不能诱发小鼠精子畸形结论生姜提取物

1改善了环磷酰胺作用下生殖脏器系数降低的状况2对环磷酰胺诱发的小鼠