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文档简介
北京热景生物技术产品专员肖瑞峰肝纤维化UPT定量检测平台目录1.根本概念5.肝纤维化诊断的重要性2.肝纤维化的诊断及其临床意义3.哪些情况须做肝纤检查4.肝纤维化的逆转6.上转发光肝纤维化产品一、根本概念
肝纤维化(hepaticfibrosis)是指肝脏内弥漫性细胞外基质(特别是胶原)过度沉积。
肝纤维化(liverfibrosis,LF)是慢性肝病开展为肝硬变的必经阶段。LF是由于肝脏细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)合成和降解失衡的结果。LF为可逆性病变,肝硬变那么不可逆转。假设能早期发现,给予有效地治疗那么可防止开展为肝硬变。肝纤维化肝纤维化不是一个独立的疾病,而是许多慢性肝脏疾病共同的病理学变化,其病因大致可分为感染性、先天性代谢缺陷、化学代谢缺陷等。二、肝纤维化的诊断及其临床意义血清学检查肝活组织病理学检查影像学检查CⅣ、PCⅢ、LN、HA、TIMP-1肝活检标本连续切片、染色超声检查、CT检查、磁共振检查、放射性核素扫描诊断方法优缺点比较肝组织活检&影像学&血清学肝组织活检法:肝活检〔肝穿刺〕是一种创伤性检查,存在一定并发症,不能反复取材,诊断误差,穿刺后疼痛,多数患者不愿意接受这项检查。影像学法:X线和B超不能对纤维化作出确诊和鉴别诊断,对轻或中度肝纤维化患者检测不灵敏,因此有一定的局限性。血清学法:取材方便,价格低廉,从生化代谢方面判定肝纤维化的活动度,可进行动态观察,无创性检查,对肝纤维化的诊断价值较大。对肝病患者常规检测血清透明质酸(HA)、III型胶原前肽(PIIIP)、IV型胶原(IV-C)、层粘连蛋白(LN)等工程以反映肝纤维化的活动性、相对严重程度、早晚期、代偿能力、疗效观察、预后等。1995年中华医学会?病毒性肝炎防治方案?推荐血清学检查1、血清透明质酸的检测〔HA〕存在密切的关系肝血窦毛细血管化,肝血窦内皮细胞受损伤
血浆中HA的摄取和降解↓HSC活化,合成HA↑血清HA水平明显↑肝纤维化的形成过程中2、血清Ⅲ型前胶原氨基端肽的检测〔PCⅢ〕Ⅲ型前胶原〔PCⅢ〕PⅢNP临床研究发现,血PⅢNP水平与肝纤维化程度呈正相关,是反映肝纤维增生的指标。肽酶因血清PⅢNP水平与PCⅢ呈正相关,故临床上较常进行操作较为简单的PCⅢ检测。3、血清Ⅳ型胶原的检测〔CⅣ〕血清Ⅳ型胶原〔CⅣ〕肝纤维化门静脉高压程度与肝脏炎症活动指数关系较小是肝纤维化早期最早出现的胶原4、血清层粘连蛋白的检测〔LN〕ⅣCLN基底膜的骨架肝纤维化、肝硬化“肝窦毛细血管化〞5、组织金属蛋白酶抑制因子-1〔TIMP-1〕
组织金属蛋白酶抑制剂-1〔TIMP-1〕在慢性肝病患者的血清中的含量随肝纤维化的进展而增加,TIMP-1上升是机体降解胶原能力下降,肝硬化形成的标志。三、哪些情况须要做肝纤检查?慢性肝病患者都应做肝纤维化的检查例如:1、感染性肝病〔慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、慢性丁型肝炎患者〕;2、酒精性、化学毒物或药物性慢性肝病患者;3、遗传代谢肝病〔肝豆状核变性等〕;4、自身免疫性〔自身免疫性肝炎〕;慢性肝病肝硬化中间阶段ECM在肝内过多的沉积肝纤维化肝纤维化在一定条件下可被逆转,早期发现、阻断、肝纤维化,治疗慢性肝病十分重要!
四、肝纤维化的逆转五、肝纤维化诊断的重要性:〔1〕肝纤维化是各种肝病开展成肝硬化的必经病理过程;〔2〕肝纤维化是阻止开展肝硬化过程中唯一可靠的治疗时机;〔3〕世界范围内对慢性肝病治疗的两大策略既抗病毒治疗和阻止肝纤维化的发生。“谁能阻止或延缓肝纤维化,谁将能治愈大多数慢性肝炎〞HansPopperPage
18上转发光〔UPT〕免疫分析系统Page
19上转发光免疫分析技术〔UPT〕
上转发光免疫分析技术〔UPT〕免疫层析准确定量普通荧光材料紫外光区高能光子可见光区低能光子红外光区低能光子波长变长,能量变低紫外光区可见光区红外光区上转换发光材料可见光区高能光子上转发光〔UPT〕免疫分析系统红外光可见光红外光可见光UCP颗粒外表硅化外表功能化连接生物活性分子上转发光〔UPT〕免疫分析系统上转发光〔UPT〕免疫分析系统上转发光〔UPT〕免疫分析系统UPT-3生物传感器扫描方向试纸条位置检测信号质控带检测带试纸条位置检测信号质控带检测带C值T值T/C值检测结果上转发光〔UPT〕免疫分析系统着色颗粒定性检测敏感性低稳定性差准确定量敏感性高稳定性好底衬样品垫结合垫分析膜吸水垫结合物检测带质控带激发光发射光光学标记物UPT-3生物传感器扫描方向试纸条位置检测信号质控带检测带试纸条位置检测信号质控带检测带C值T值T/C值检测结果上转发光〔UPT〕免疫分析系统敏感性:独有的上转换发光现象,不存在来自外界背景干扰;稳定性:以红外光激发的结构内部的纯粹物理发光过程;平安性:惰性合成材料、红外光激发、可见光发射使得基于UCP的检测对于检测者、被检测品、环境均无任何危害;上转发光〔UPT〕免疫分析系统Page
28上转发光〔UPT〕免疫分析系统热景肝纤维化诊断优势上转换发光法:无外界背景干扰;准确定量;敏感性高;稳定性好;平安性好;仪器小巧,使用灵活;操作简便,样本准备加样分析仪定量测定结果报送;检测卡常温反响,60min出具结果;配套试剂无需冷藏,随到随测;可进行单人份检测,仪器直接读取样本检测浓度;每小时可完成将近100次检测;检测方法a.将检测卡、稀释液及待测样本平衡至室温〔20~25℃〕。b.拆开检测卡的铝箔袋包装,将检测卡放置在平整的外表上。c.在检测卡外壳上写上待测样本的编号。d.取40μl样本参加60μl稀释液,混匀后,取70μl参加加样孔中。〔如肝纤四项同时检测,可取200μl样本参加300μl稀释液,混匀后,取70ul参加加样孔中〕。e.室温放置1小时。f.在上转发光免疫分析仪上测量。g.数据处理:与肝纤维化五项定量测定试剂盒配套的上转发光免疫分析仪具有计算浓度功能,测量完成后仪器自动将浓度值显示在屏幕上。上转发光〔UPT〕免疫分析系统竞品分析化学发光法HALNCIVPIIINPTIMP-11、需加校准品,酶结合物;2、加样后37℃温育,洗涤五次,加发光液A、B,检测,步骤复杂,繁琐;3、孵育及振荡需盖上盖板膜;4、根据待测样本相对发光强度返算待测物浓度;5、定量测定;6、本钱较高。北京科美、深圳市新产业、源德、安图、北京北方生物技术、华大吉比爱、北京华科泰生物、北京热景生物竞品分析增强化学发光免疫分析法HALNCIVPIIINPTIMP-11、需用全套标准品进行标准曲线的绘制;2、加酶结合物、发光底物;3、加样后37℃温育1h,洗涤,加发光物质,步骤复杂,繁琐;4、用光子计数仪测定发光值;5、定量测定。北京泰格科信生物科技、广东虹业抗体科技竞品分析时间分辨荧光免疫HACIVPIIINP1、每次分析实验都要做标准曲线分析;2、每次检测都要重新配置标记物;3、加样后,室温振荡1h测量;4、外在因素会造成荧光信号的降解;5、定量测定;6、适用仪器-时间分辨荧光分析仪;7、结果比色对时间要求较高。北京北方生物技术研究所、苏州新波生物技术竞品分析酶联免疫法HACIVPIIINP1、适合大批量标本测定;2、各个样本操作间隔小,易互相影响;3、加样后,室温振荡1h测量;上海贝西生物科技、深圳市安群生物工程上转发光与其它方法比照上转发光〔UPT〕肝纤维化产品HA:透明质酸HA京药监械〔准〕字2021第2400191号IV型胶原CIV京药监械〔准〕字2021第2400186号III型前胶原氨基端肽PIIINP京药监械〔准〕字2021第2400190号层粘连蛋白LN京药监械〔准〕字2021第2400187号血清组织金属蛋白酶抑制因子-1TIMP-1京药监械〔准〕字2021第2400191号肝纤五项项目名称样本采集要求检测方法参考范围常见临床意义肝纤五项HA血清3-5ml上转发光法准确定量敏感性高稳定性好安全性好反映肝脏损伤,可以明确区分早、晚期纤维化LN与纤维化程度和门脉高压正相关,纤维化后期升高尤为显著PIIINP反映慢性肝纤维化的活动性,早期即显著升高CIV主要用于观察肝硬化的指标,其浓度与肝纤维化程度相关TIMP-1TIMP-1上升是机体降解胶原能力下降、肝硬化形成的标志。肝纤五项项目名称样本采集要求检测方法主要优势常见临床意义肝
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