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文档简介

实验九

荧光法测定硫酸奎宁分析化学教研室分析化学实验2023/9/301.分子荧光分析法简介2023/9/30S2S1S0T1发射荧光发射磷光系间跨越内转换振动弛豫l2l1l

3

l

2T22023/9/30荧光(fluorescence)

:物质接受光子能量后,被激发,从激发态的最低振动能级返回基态时发射的光.荧光分析法:根据物质的荧光谱线位置及强度进行物质鉴定和含量测定的方法2023/9/301.特点（1）灵敏度高

比紫外-可见分光光度法高2～4个数量级；（2）选择性强

既可依据特征发射光谱，又可根据特征吸收光谱；（3）试样量少

缺点：应用范围小。2.荧光分析法的应用2023/9/302.应用(1)无机化合物的分析

与有机试剂配合物后测量,可测量约60多种元素(2)生物与有机化合物的分析

免疫荧光技术有些荧光染料可以和免疫球蛋白结合而不破坏抗体的免疫活性。这种以荧光标记的抗体溶液可以作为特异性试剂，使免疫学技术和荧光分析方法相结合，进行免疫细胞学的研究。这种方法具有荧光分析的敏感性和免疫反应的特异性。2023/9/30药物研制：组合化学药物分析：可卡因、吗啡、鸦片碱、巴比妥类、酚噻嗪、阿托品、异烟肼、利血平、色胺、阿司匹林、青霉素、四环素等药物的分析(3)新药研制和药物分析(4)其他

环境、自来水和污水水质监测食品科学:食品添加剂、维生素含量和霉素等的分析化学、化工和材料科学常规分析、新化合物的光化学行为研究等无机离子及其配合物的分析晶体材料的共振荧光2023/9/301.实验目的2.实验原理3.实验内容4.注意事项本实验内容2023/9/301.熟悉VARIAN荧光分光光度计的原理和使用2.掌握激发光谱和发射光谱的概念及测定方法3.掌握用标准曲线法进行荧光定量分析实验目的2023/9/30VARIAN荧光分光光度仪

2023/9/30荧光分光光度计基本流程如图：2023/9/30光谱扫描的实现:仪器有两套光栅分光系统，根据激发和发射光栅动的形式可形成两种光谱：激发光谱：激发光栅转动发射光谱：发射光栅转动2023/9/30Lightsource

excitation

emissionSampleDetectorMonochromatorMonochromator

荧光物质的激发光谱

固定发射光波长.以不同波长的入射光激发荧光物质,化合物发射的荧光强度F与入射光波长的关系曲线λ

200250300350400450500nm2023/9/30

excitation

emissionSampleDetectorMonochromatorMonochromatorLightsource2.发射光谱(或荧光光谱

)固定激发光波长.化合物发射的荧光中各种波长组分的荧光强度.200250300350400450500nm2

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