冠心病中医证候动物模型研究进展

冠心病中医证候动物模型研究进展

冠状动脉硬化是一种常见的临床疾病。近年来，中医在高血压领域的动态模式建设和病理控制机制的研究方面取得了一些成果。现概述于下。1冠状动脉粥样硬化的动物模型为1.1冠心病心阳虚证大鼠模型建立张明雪等予大鼠高脂饲料(2%胆固醇,10%猪油,0.2%甲基硫氧嘧啶,余为基础饲料),连续6周,并每日冷藏于-2℃~-4℃冰柜中2h,连续6周,接着皮下多点注射脑垂体后叶素(pit)10U/kg,建立冠心病心阳虚证大鼠模型。结果造模各组大鼠血脂增高,光镜下可见主动脉壁有附壁血栓等。该模型采用的造模方法一是给予高脂饮食,使痰浊内生;二是皮下注射pit使冠状动脉痉挛、缺血,导致血运不畅,瘀血内生,同时,pit注射后大鼠表现的寒颤与寒邪伤阳证候类似;三是每日入冰柜冷藏2h,意在模拟寒邪内侵,痹阻气血而致瘀滞内生,从而近似于冠心病阳虚为本、痰瘀为标的病机特点。1.2模型的制备章忱等采用给大鼠喂饲高脂饮食(4%胆固酵、10%猪油、0.4%丙基硫氧嘧啶、85.6%基础饲料)喂养3周,然后用20%乌拉坦(1.2g/kg体重)腹腔注射麻醉动物,仰卧固定。分离左颈外静脉,并注入垂体后叶素制备了胸痹痰浊凝滞证模型。采用以垂体后叶素合高分子右旋糖酐,造成胸痹心血瘀阻证模型。1.3造模前后耳缘静脉放血张页等给新西兰大耳白兔高脂饲料60g(含1g胆固醇,15g蛋黄粉,5g猪油)加普饲喂养,并于造模第2周开始,每周2次耳缘静脉放血15mL/只,至8周结束。认为给予兔高脂饲料喂养,以造成食饵性动脉粥样硬化,同时根据中医“气血相依”、“气为血帅”、“血为气母”理论,于造模第2周放血,以达到放血耗气目的,复制出理论上基本定性定位的气虚痰浊冠心病模型。1.4灌服血府逐瘀汤合瓜白夏汤对大鼠心肌指标的影响朱丽红等以高脂饲料(按胆固醇∶猪油∶丙硫氧嘧啶∶基础饲料=4∶10∶0.2∶86的比例配制)和脂肪乳液(猪油20g溶化后,加胆固醇10g,胆酸钠2g,甲基硫氧嘧啶1g搅匀,加入20mL吐温-80,蒸馏水加至100mL充分混匀)10mL·kg-1·d-1,喂饲大鼠,连续7周,并于第35天施冠状动脉结扎术。观察造模前、后大鼠的心电图改变,检测血脂、心肌酶及血液流变学指标,动物处死后取心脏,称质量计算心脏指数。结发现模型组心电图显示心肌严重缺血,胆固醇、甘油三酯、肌酸激酶、全血比黏度、红细胞压积及心脏指数均比正常组升高(P<0.001),而灌服血府逐瘀汤合瓜蒌薤白半夏汤的治疗组对上述指标均有改善作用。提示采用高脂饮食加冠状动脉结扎术方法复制的动物模型为冠心病痰瘀互结证动物模型。2ami对大鼠血液流变学指标的影响在冠心病及其中医各证型实验研究中,心肌酶、血液流变学、血脂、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、前列环素(PGI2)血浆6-酮-前列腺素(6-keto-PGFlα)、血栓素2(TXB2)、微循环、MDA、肿瘤坏死因子(TNF)、循环内皮细胞(CEC)等指标应用较多。多数实验结果表明,AMI组TNF含量、血浆MDA、全血中CEC、心肌酶水平和血液流变学指标升高,血液黏滞度加大,均显著高于空白对照组。血脂水平升高,NO降低、ET水平升高,血浆6-keto-PGFlα水平降低、TXB2水平升高、微循环障碍。中医药对上述指标有调整作用。2.1血压及心功能指标检测朱琳等采用大剂量异丙肾上腺素(ISOP,50mg/kg)皮下注射造成急性心肌缺血模型,并用欣怡胶囊预防。在ISOP造模前、造模后5min、30min、60min时,分别测定实验各组心率(HR)、平均动脉压(MAP)、左室内压峰值(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、±dp/dtmax(左室压力上升/下降的最大变化速率)等血流动力学指标,作为心功能评价。结果表明与基础值比较,空白对照组心脏舒缩功能减退,MAP、LVSP及±dp/dtmax下降,HR、LVEDP上升(P<0.01)。而欣怡胶囊不同剂量组各项指标均有一定改善,高剂量组更为显著(P<0.05~0.01);提示欣怡胶囊具有改善急性心肌缺血大鼠血流动力学,保护心功能的作用。2.2图结构影响图于震等利用结扎冠状动脉左前降支的方法造成大鼠急性心肌缺血—再灌注损伤,观察九香气雾剂(麝香、冰片为主)对急性心肌缺血—再灌注损伤大鼠心电图的影响。结果表明九香气雾剂能明显降低大鼠因冠脉结扎所致急性心肌缺血期和再灌注期心电图ST段抬高或压低的幅度,与生理盐水组比较均有统计学差异(P<0.05)。谢人明等以垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血为模型,以恬尔心为对照,观察中药益气通脉口服液对心肌缺血的作用。结果表明垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血心电图ST段升高和T波升高;益气通脉口服液具有抗急性心肌缺血作用,且在一定用量范围内有剂量依赖性的对抗作用。2.3中药止血汤对急性心肌缺血兔循环no和et的影响宫丽鸿采用结扎麻醉兔冠状动脉左前降支中段的方法,造成实验性急性心肌缺血的模型,探讨中药活血化瘀汤(人参、黄芪、当归、川芎、桃仁、水蛭、生地、炙甘草)对急性心肌缺血兔循环NO和ET的浓度的影响。结果显示,急性心肌缺血时ET明显升高,NO明显下降,中药活血化瘀汤可以提高NO浓度和降低ET水平。2.4对心肌缺血的作用童延清等观察了心血通注射液(大血藤、丹参、山楂3种中药的水溶性提取物按照8:4:3的比例组成)对大鼠垂体后叶素实验性心肌缺血的血清肌酸磷酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)。结果表明心血通注射液可以抑制CK和LDH的溢出,减小实验性心肌缺血的范围。孙晓红等探讨仙人活心胶囊(淫羊藿、人参、瓜蒌、三七、丹参等)对冠心病心肌缺血心肌损伤的保护作用及其作用机制。结果表明仙人活心胶囊能明显降低血清LDH、α-羟基丁酸酶(α-HBD)、CK及CK-MB活性;能明显改善垂体后叶素所致的大鼠心电图ST-T段的偏移。谭达全等采用垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血模型,观察血府逐瘀汤对大鼠血清乳酸脱氢(LDH)、肌酸激酶(CK)的影响。结果证明,血府逐瘀汤能明显降低CK、LDH的含量,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。2.5益心胶囊对3、6-keto-pgf1表达的影响周亚滨等观察了益心胶囊(丹参、瓜蒌、乳香、五灵脂、延胡索、积壳、柴胡、白芍)对急性心肌缺血家兔模型血浆PGI2及心肌组织6-keto-PGF1α含量的影响。结果显示,模型组6-keto-PGF1α水平明显低于假手术组,两组比较差异显著(P<0.05);益心胶囊组6-keto-PGF1α水平均较模型组升高,差异显著(P<0.05)。提示益心胶囊能够显著提高实验性心肌缺血损伤家兔血浆及心肌组织PGI2含量,对血管内皮细胞功能具有保护作用。2.6克心绞痛滴鼻剂对大鼠心肌生化指标的影响司秋菊等采用脑垂体后叶素20U/kg腹腔注射诱发心肌缺血,并观察了蜈蚣有效成分的作用。结果表明,模型组LDH、MDA明显升高,SOD、NO水平显著降低,蜈蚣治疗组SOD、NO含量显著提高,LDH、MDA明显降低。且蜈蚣大剂量(5g/kg)较小剂量(2.5g/kg)治疗组作用更加明显。王华等采用垂体后叶素及冰水应激法致大鼠心肌缺血模型,并观察克心痛滴鼻剂对模型大鼠心电图、心肌酶、SOD、MDA的影响。结果表明克心痛滴鼻剂可改善心肌缺血大鼠心电图表现,降低LDH、CK及MDA的含量,升高SOD含量。提示克心痛滴鼻剂可改善心肌供血,防治心肌损伤,提高抗氧化能力,从而起到防治冠心病心绞痛的作用。韩丽华等用高脂高胆固醇饲料致兔动脉粥样硬化模型,观察宽胸丹(瓜蒌、陈皮、枳实、川芎、水蛭、苍术、甘草)的作用。结果表明,模型组较正常组SOD活性降低,LPO、oxLDL值增高,差异有显著性(P<0.05);宽胸丹大、小剂量组均能明显增加SOD活性、降低LPO、oxLDL值,与模型组比较差异有显著性(P<0.05),且优于多烯康组(P<0.05)。2.7各组大鼠血浆通脉颗粒干预前后主动脉、冠状动脉的变化肖纯等采用高脂饮食(含5%猪油、0.5%胆固醇)复制成动脉粥样硬化模型,观察通脉颗粒(制首乌、红参,麦冬、川芎、郁金、枳实等)治疗前后血脂水平变化及主动脉和冠状动脉病理形态改变。结果表明各模型组动物在实验结束时血浆甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白均明显上升,但通脉颗粒干预组上升幅度低于模型组,其中大剂量组上升幅度最小,与其他各组比较有显著性差异(P<0.05);空白对照组主动脉、冠状动脉正常,其余各组均有不同程度粥样斑块形成和冠状动脉狭窄;主动脉斑块厚度、斑块覆盖面积占整条主动脉面积的百分比以及狭窄冠状动脉百分比,大小剂量组均比模型组小,而大剂量组最小(P<0.05)。提示通脉颗粒可显著降低动脉粥样硬化免模型的血脂水平、延缓动脉粥样斑块的发生发展。2.8对水肌缺血的作用张赛英等采用结扎冠状动脉所致心肌缺血的大鼠模型,观察心痛灵对实验性心肌缺血的作用。结果表明心痛灵能降低血清酶活性,调节内皮素/降钙素基因相关肽(ET/CGRP)之间的平衡。2.9治疗组采用治疗法,增加生物组织化学细胞增殖,提高表型转变陈可冀等用球囊扩张损伤猪冠状动脉左前降支中段的方法建立再狭窄模型,并在术前2天开始给芎芍胶囊(川芎总酚和赤芍总苷制成芎芍胶囊)小剂量(0.02g·kg-1·d-1)、大剂量组(0.04g·kg-1·d-1),持续至术后4周。结果表明,芎芍胶囊可通过抑制平滑肌细胞的增殖和表型转变(影响平滑肌细胞增殖相关基因蛋白表达和细胞跨膜信号转导),诱导新生内膜中增生的细胞发生凋亡,对动脉损伤后内膜中细胞增殖水平进行调控;减少球囊损伤后新生内膜中的胶原沉积,使其排列趋于规则;抑制动脉损伤术后病理性血管重塑,从而共同起到抑制猪冠状动脉球囊损伤后内膜增厚、减少管腔丧失、预防最狭窄形成的作用。2.10总皂苷对isop所致大鼠心肌缺血病理损伤程度的作用机制探讨张腾等应用异丙肾上腺素(ISOP)复制心肌缺血损伤的动物模型,采用光、电镜技术和基因表达芯片技术验证三七总皂苷的作用并探索其分子作用机制。结果发现三七总皂苷能够显著减轻ISOP所致的大鼠心肌缺血病理损伤程度;在基因表达谱的研究中共筛选出80条差异表达基因,其中模型/正常基因表达谱中筛选出58条差异表达基因,模型/治疗基因表达谱中筛选出24条差异表达基因。认为三七总皂苷可能是通过多条途