药物分析笔记

第一章绪论第一节 药物分析的性质和任务一、药物分析在实际生活中应用广泛：车祸→油漆→红外检测→罪犯体育比赛→兴奋剂检查→质谱检查物质中的碎片机构→百万分之一梅花K胶囊→杂质检查→差向四环素含量超标药物分析定义：研究鉴定药物的化学组成和测定药物组分含量的原理和方法的一门应用科学。药物：化学结构已经明确的天然药物、合成药物及制剂，合成药物的原料、中间体和副产品，以及制剂的赋形剂和附加剂，药物的降解产物和体内代谢产物等。药物→制剂的赋形剂、附加剂→制剂→体内→降解产物、体内代谢物原料→中间体副产品分析：药物的真伪真：药物的化学组成→真：多少，药物的含量伪：药物的杂质 →伪：多少，杂质的限量举例：阿莫西林药物药物分析的内容：检测药物的性状→鉴定药物的化学组成→检查药物的杂质限量→测定药物的含量。药物分析的任务：根据药品质量标准的规定及药品生产质量管理规范的有关规定，全面控制药品质量，保证用药安全。第三节 药品检验工作的依据和程序一、药品检验工作的依据：1、三级标准：中国药典、部颁标准、地方标准2、生产企业：为了提高和保证产品质量，自订内控质量标准3、医疗单位自制的制剂：卫生行政部门批准的质量标准进行检验。4、进出口药品：由口岸药检所按有关质量标准或合同规定检验。二、药品检验工作的程序：程序：取样→外观性状观测→鉴别→检查→含量测定→写出检验结果和检验报告书操作方法：按《中华人民共和国专业标准药品检验操作标准汇编》1、取样→少量、代表性、均匀1/42、性状观察：观色、嗅、味、物理常数→初步判定真伪观察：色、嗅、味、外观 如：维生素 C变黄失效测定：物理常数（熔点、沸点、比重、折光率等）3、鉴别原则：鉴别方法必须准确，灵敏、简便、快速→判别药物真伪4、检查杂质检查（纯度检查）→检查所含杂质是否低于最大允许量（不测定准确含量）5、含量测定测出含量是否符合药典、部颁标准、地方标准6、填写检验报告书检验记录：真实、完整、科学（实验记录）检验报告：记录内容，检测结果，结论，处理意见→实验报告如：葡萄糖检验：经检验乙醇溶液的澄清度不符合规定处理意见：可用做口服葡萄糖，不得供制备注射液第二章 药品质量标准一、药品质量的特性1、疗效确切2、使用安全，毒副作用小3、稳定性好，有效期长4、给药方便→剂型5、包装适当→便于储存、运输和使用6、价格便宜二、药品质量标准定义：把反映药品质量特性的技术参数、指标明确规定下来，形成技术文件，规定药品质量规格及检验方法中国药典 中华人民共和国卫生部药品标准 地方标准国家标准 经整理可上升为部颁标准中国药典修订后部颁标准 地方标准整理后可上升第二节

现行药典和部标准一、中国药典英文全称：PHARMACOPOEIA OF THE PEOPLES‘S中文全称：中华人民共和国药典缩写： CHP.（2000）世界上第一本药典《唐朝的新修本草》→解放前沿用国外药典→

REPUBLIC OF1953年药典→

CHINA1963年药典→文革→1977年药典→1985年药典→1990年药典→1995年药典→2000年药典现行药典增加了和修订了最多的是：1、抗生素2、生化及生测药品新增了技术1、毛细管电泳法2、热分析法3、X-射线粉末衍射法等三种仪器分析方法三、正确阅读、理解和执行药典内容1、凡例：对药典的总说明，记载了药典中各种术语的含义及其使用时应注意的事项。例：正文中的醋酸，凡例中规定为浓度为 36%-37%C2H4O2的浓度，而不是使用冰醋酸如4%（g/ml）醋酸溶液1000ml的正确方法是：取醋酸（36%—37%）105ml，加水稀释至1000ml，摇匀。规定取用量为“约”若干时，系指取用量不得超过规定量的±10%精密称定时，指称量应准确至所取重量的千分之一。如：取阿司匹林约，精密称定。取用量不得超过±10%*即→→精密称定→*1/1000=→热水： 系指70℃—80℃冷库：〈8℃阴凉库：〈20℃室温：25℃2、品名目次按笔形排列，即目录3、正文如青霉素 G结构式：类别：分子量和分子式：来源： → 合成或天然性状： → 如白色粉末鉴别：纯度检查： → 杂质限量控制含量测定：类别：剂量：规格：贮藏：制剂：4、附录：在正文中用到的通用试剂、通用方法：1、通用试剂的配法，如酸性氯化亚锡2、通用物理常数测定法： 如熔点、折光率、电导度等3、通用试验法：如分光光度法、电位滴定法、永停滴定法等5、索引中国药典列有汉语拼音索引和英文名称索引，其按字母顺序排列，检索药典正文品种。6、国外药典USP.美国药典BP. 英国药典JP. 日本药局方第三节 药品质量标准的制订制订原则：保证用药安全有效，同时利于促进生产 →标准太低，难以保证用药安全，药品标准太高，不利于药品生产一般情况下：注射药〉口服药〉外用药国家标准由卫生部药典委员会组织制订和修订除法定标准外，药品生产企业也可以制订内部质量标准，用于控制药品质量。企业内部标准和国家标准的区别在于企业标准没有法定作用。企业内部标准的质量指标和检测项目，通常比法定质量标准高。第三章 药物的鉴别第一节常用鉴别方法一、药物鉴别的目的和特点1、药物鉴别的目的鉴别定义：就是依据药物的组成、结构与性质通过化学反应、判断药物的真伪。鉴别试验仅使用于鉴别药品的真伪对于原料药还应结合外观和物理常数进行确认

仪器分析或测定物理常数，来2、特点A、 为已知物的确证试验 ------供试品为已知物，鉴别的目的是确证供试品的真伪B、 鉴别试验为个别分析，非系统分析 ------一般只作一、二或三、四项试验C、 通常采用不同方法鉴别，综合分析D、鉴别制剂，要注意辅料干扰，鉴别复方制剂，注意各成分干扰二、化学鉴别法定义：根据药物与化学试剂在一定条件下发生离子反应或官能团反应产生不同颜色，生成不同沉淀，放出不同气体，呈现不同荧光，从而作出定性分析结论。药物+化学试剂—→反应—→不同颜色—→不同沉淀—→分析—→结论—→不同气体—→不同荧光化学鉴别法：专属性强、灵敏度高这里对无机药物的鉴别不作叙述，只对有机药物做阐述三、紫外-可见分光光度法1、基本概念紫外区：含有芳环或共轭双键的药物有特征吸收可见光区：含有生色团和助色团的药物有特征吸收举例：化装品中的防晒霜中含有吸光物质。2、具体方法A、对比吸收曲线的一致性按药品质量标准将供试品和对照品用规定溶剂分别配成一定浓度的溶液，内绘制吸收曲线，供试品和对照品的图谱一致。一致：吸收曲线的峰位、峰形和相对强度一致举例：供试品药品质量标准 + 规定溶剂—→溶液—→测定吸收曲线—→比较图谱对照品

在规定波长区B、对比最大吸收波长和相应吸收度的一致性供试品药品质量标准+规定溶剂—→溶液—→测定吸收曲线—→比较图谱对照品λmax AmaxC、对比最大吸收和最小吸收波长的一致性maxλminD、对比最大、最小吸收波长和相应吸收度比值的一致性Amax/Amin举例：说明解释四、红外光谱法有机药物在红外光区有特征吸收讲解红外吸收的原理 简单介绍电子跳跃是红外吸收的主要因数具有专属性强 准确度高的特点方法：1、供试品的红外光谱与相应的标准红外光谱直接比较， 核对----中国药典有专用红外光谱集2、供试品的红外光谱与对照品的红外光谱比较，核对讨论：方法简单，但无法消除不同仪器、不同操作人员造成的差异对照品不容易得到。五、熔点测定法熔点：指一种物质照药典方法测定时，由固体熔化成液体的温度，或熔融同时分解的温度或在熔化时自初熔至全熔的一段温度熔点：可鉴别药物的 真伪和纯度六、薄层色谱法举例：中药中使用较多、特殊杂质的检查第二节一般鉴别试验一、芳香第一胺类鉴别反应芳伯胺基 + 亚硝酸钠---→重氮盐 +碱性B萘酚试剂 →橙色 猩红色RRNH2+HNOH++N2N+OHNaOHN NROH二、茚三酮反应OCC(OH)2CO茚三酮三、加碱加热后放出氨或胺的反应OORCNH2+NaOHRCONa+NH3或RNH2.HX+NaOHRNH2酰胺、内酰胺、磺酰胺和胺类等能与酸生成盐的药物，在过量碱作用下水解，受热时放出胺或氨，有氨或胺臭，并可使红色石蕊试纸变蓝四、高锰酸钾褪色反应含不饱和双键或含有侧链芳烃的药物，在酸性溶液中与高锰酸钾试液作用，可将高锰酸钾还原，使紫色消退。五、托烷生物碱类鉴别反应专属性反应山莨菪碱、东莨菪碱、阿托品等剂型药物结构中含有莨菪酸。反应条件：发烟硝酸、醇制氢氧化钾，颜色显示深紫色COOHCOOHCHCH2OHCHCH2OHCHCH2OHHNO3O2NNO2KOHNO2O2NNO2 NO OK六、枸橼酸盐鉴别反应枸橼酸+高锰酸钾 →硫酸汞 →白色沉淀→溴水 →白色沉淀白色白色七、乳酸盐鉴别反应乳酸+溴→亚硝基铁氰化钠→暗绿色[Fe(CN)5NO]2-CH3CH(OH)COOH-CH3CHO[Fe(CN)5ON=CHCHO]4第四章 药物检查法第一节

概述主要内容：主要讲授药物的一般杂质检查和特殊杂质检查，查法和溶出度测定法。

并介绍固体制剂的含量均匀度检杂质定义：是指药物中存在的无治疗作用或影响疗效，甚至对人体健康有害的物质。杂质分类：分为一般杂质和特殊杂质一般杂质：指自然界中分布较广，容易引入的杂质，如酸、碱、水分，重金属等。检查方法：一般在药典附录中。特殊杂质：在个别药物生产，贮存过程中引入的，如阿司匹林中的水杨酸。检查方法：一般放在药典的正文中。杂质检查的意义：药物中含有杂质是影响药物纯度的主要因素，杂质增多，不但可以使药物含量和活性降低，毒副作用增加，而且还可能使药物发生理化常数，外观性状的变化，因此有必要对杂质做检查。但杂质检查要求不能太高，要求太高，会增加生产成本，同时我们讲要求也不能太低，太低，会影响药物的疗效，影响健康，人就不安全了。所以杂质检查必须在有利于生产的前提下，不影响疗效，不影响健康，制订恰当的检查项目和限度。明确应该检查什么量是多少药物中的杂质是影响药物纯度的因素，所以我们讲杂质检查，也叫纯度检查。第二节 药物中杂质的来源和杂质限量计算一、 药物中杂质的来源1、生产过程中引入A、原料不纯B、有一部分原料没有反应完全C、反应中间产物和副产物在精制时没有除净D、与生产器皿接触均会不同程度地引入杂质例：用水杨酸为原料合成阿司匹林，由于反应不完全，可能引入水杨酸杂质，或者反应中间产物，使用金属器皿，可引入铁、铜、锌等金属杂质。2、贮存过程中引入药物在贮存过程中受温度、湿度、日光、空气、微生物等外界条件的影响，发生水解、氧化、分解、聚合、并异构化、发霉等变化，产生杂质。例：阿司匹林水解产生水杨酸维生素C见光→氧化→颜色变黄麻醉用乙醚→日光→氧化→有毒的过氧化物四环素→酸性条件下→发生差向异构化，毒性增高，如梅花K胶囊事件微生物污染→发霉→引起内毒素，如输液反应上海某厂生产的输液，细菌无处不在。二、杂质限量药物中只要不对人体有害，不会影响疗效和药物的稳定性，允许有一定量的杂质存在。一般我们不测定其准确含量（到底有多少量）我们只测定其最大允许量（有没有超过最大允许量）→所以杂质检查，我们也称为限度检查。杂质限量定义：是指药物中所含杂质的最大允许量， 通常用大于、小于或等于百分之几或百万分之几表示，% PPM操作：取一定量待检杂质的纯品或对照品 （中国生物制品检定所提供） 配成标准溶液，同时取一定量供试品配成供试品溶液，经同样处理后，比较结果。注意：同样处理是指加同样的溶剂，同样量的溶剂稀释到同一容量等。供试品沉淀比浊法同样处理后颜色比色法斑点大小比标准品（纯品或对照品）.较颜色.深浅比.较等等杂质限量计算：杂质限量%=允许杂质存在的最大限量/供试品的量100%杂质限量%=允许杂质存在的最大限量/供试品量106供试品中杂质限量 =标准溶液体积 标准溶液浓度杂质限量用 L表示；体积用 V表示；浓度用 C表示；则公式为：L%V.C100%Ms或L%V.C106Ms（1）药品中杂质限量的计算L举例1：检查对乙酰氨基酚中的氯化物，取对乙酰氨基酚，加水100ml，加热溶解，冷却，滤过，取滤液25ml，依法检查氯化物，所产生的浑浊与标准氯化钠溶液 （每1ml相当于10ug的Cl-）制成的对照液比较，不得更浓，问氯化物的限量V.C100%5.0ml10ug/ml1060.01%L%2.0g/100ml2.5ml100%Ms（2）标准溶液体积的计算V举例2：检查葡萄糖中的重金属，取葡萄糖，加水23ml溶解，加醋酸盐缓冲液（）2ml，依法检查重金属，含重金属不得超过百万分之无，问应取标准铅溶液（每1ml含铅10ug）多少毫升L.S51064.0g2mlV10106g/mlC（3）供试品克数的计算S举例3：中国药典规定检查砷盐时，应取标准砷溶液（每1ml相当于1ug的AS）制备的标准砷斑，今依法检查溴化钠中的砷盐，规定含砷量不得超过%，问应取供试品多少克C.V1106g/ml2.0ml0.5gS4106L（4）标准溶液浓度的计算C举例4：精密称取三氧化二砷，置1000ml容量瓶中，加NaOH溶液（1→5）5ml，溶解，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，临用前，精密量取贮备液，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，即配成标准砷溶液，求砷贮备液的浓度和标准砷溶液的浓度（ug/ml）讲解：NaOH溶液（1→5）：加水使成5ml的溶液。乙醇-水（1：5）：乙醇和水混合，以1：5体积比混合。0.1320106ug2As砷贮备液浓度=As2O3100ug/ml1000ml标准砷溶液的浓度=10ml100ug/ml1ug/ml1000ml要求：复杂计算举例：今取溴化钠，检查砷盐，与标准砷溶液制备的标准砷斑比较，不得超过规定限量（%）。L.S0.5g0.0004%C1ug/mlV 2.0ml（5）特殊杂质限量计算举例5：取磷酸可待因，按中国药典（1995）检查吗啡限量的比色法配成供试品溶液，用无水吗啡2mg，加盐酸（9→100）配成100ml标准溶液，取此标准溶液，按同一方法制成对照液检查结果，供试品溶液与对照品溶液比较，不得更深，求磷酸可待因中吗啡的限量是多少2mgC.V5.0ml100ml100%0.10%L0.10103mgS第三节 一般杂质的检查定义：一般杂质是指在自然界中分布比较广泛， 在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质。检查方法：一般在药典的附录中加以规定。一般杂质的检查项目有： PH值，溶液的澄清毒，颜色、氯化物、硫酸盐、重金属等本章主要掌握各杂质检查的方法、原理、反应条件及试验注意点等！ ！！一、氯化物检查法1、检查意义氯化物极易引入，虽然微量氯化物对人体无害，但检查氯化物含量，可以考察药品的纯杂程度，也就是说，控制氯化物的量，可以提高或保证药品的纯度，因此，我们认为氯化物是一种“指示性杂质”。2、检查原理和反应条件原理：Cl-+Ag+硝酸AgCl白色沉淀方法：供试品+AgNO3硝酸氯化银沉淀标准氯化钠溶液黑色背景下，垂直向下观察，比浊讲解：纳氏管（介绍）加硝酸作用：为什么加硝酸，不加盐酸、硫酸或其他酸1、可消除SO32-、CO32-、PO43-、C2O42-、BO2-等杂质离子的干扰；2、可加速氯化银沉淀的生成；3、可改善氯化银浑浊的均一性，提高检查准确毒。在50ml溶液中以含硝酸10ml为宜，过多会增大氯化银的溶解度而降低反应灵敏度。试验注意点：1、为了控制氯化银见光分解，应在暗处放置 5min；2、如供试品是碱性，应先中和为中性，再作检查；3、如供试品中含 I-、Br-，应先除去 I-、Br-；I-Cl-

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Ag+ AgIAg+ AgCl碘化银沉淀不溶于稀氨水，而氯化银沉淀可溶于稀氨水，然后可用碱恢复，再按常规检查氯化物；Br-离子则可加入 H2O2，氧化成 Br2，然后蒸除。4、如供试品中有 KMnO4，加乙醇脱色后检查；5、供试品如有颜色，则采用内消色法+Ag+过滤滤液加入标准氯化钠溶液供试品Cl-分两份Ag+比浊如糖浆、中药制剂等二、硫酸盐检查法1、检查原理SO42-+2+酸性BaBaSO4白色浑浊试剂：BaCl2标准溶液：K2SO4溶液酸：HCl，盐酸检查中所产生的浑浊程度与硫酸盐杂质的含量， 硫酸钡微粒大小有关， 所以应严格控制试验条件：1、酸度：规定 50ml溶液中加入稀盐酸 2ml，PH 12、BaCl2浓度：25%BaCl2试液，产生的浑浊度较稳定3、标准K2SO4溶液用量：以 ~为宜，供试品取用量应相匹配4、加入BaCl2试液后，应立即摇匀；5、黑色背景下，从上而下观察。三、硫化物检查法1、检查原理供试品中的硫化物与稀盐酸在 80~90℃作用10min，生成硫化氢气体，与醋酸铅试纸作用生成黑色的硫化铅斑点，称为硫斑。与标准硫化钠溶液比较， Na2SS2+H2S

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2H+ H2SPb2+ PbS + 2H+2、仪器装置D旋塞、E盖子之间有醋酸铅试纸颈长：18CM3、试剂配制醋酸铅试纸制备：取醋酸铅10g→加新煮沸过的冷水溶解→加醋酸溶解→加新沸冷水至100ml→滤纸条浸湿后取出→100℃干燥，即得新煮沸冷水：为了防止水中少量的22-等。CO、S标准硫化钠溶液制备：Na2S1g→加水200ml→测定后→稀释每1ml含硫5ug的标准溶液为什么要测定后稀释：因硫化钠易潮解，→所以要测定其实际含量4、检查操作供试品1ml放入A瓶中标准氯化钠溶液→加水10ml、稀盐酸10ml→迅速装好导气管C→ 80~90℃水浴10min → 比较硫斑颜色注意：试验前导气管应事先装好醋酸铅试纸。四、硒盐检查法1、检查原理有机药物→有机破坏→硝酸溶液吸收→盐酸羟胺还原（氧瓶燃烧）SeO3+H2OH2SeO4H2SeO4+2NH2OHH2SeO3+N2+3H2OH2SeO3PH2±0.2二氨基萘 反应10min 4.5-苯并苯硒二唑Na2SeO3标准 亚硒酸钠环己烷提取紫外扫描波长378nm测定吸收度A比较A供〈 A标试验注意点：1、有机破坏完全，否则影响试验结果2、显色剂二氨基萘易氧化，以新配制为宜3、PH严格控制在 2±以内4、反应时间应为 100min5、提取溶剂环己烷量必须一致五、氰化物检查法氰化物有剧毒，所以甲丙氨酯、苯妥英钠等药物应检查氰化物限量检查方法有二种：第一方法：改进普鲁士蓝法仪器装置如硫化物检查装置，不同之处在于将醋酸铅试纸改为碱性硫酸亚铁试纸检查原理：CN-+H+HCN酸为弱酸：酒石酸Fe2++6HCN+-[Fe（CN）6]4-+6H2O6OH亚铁氰根取下试纸，加 FeCl3+HCl，5min内不显绿色或蓝色3[Fe（CN）6]4-+4Fe3+H+Fe[Fe(CN)]346普鲁士蓝如：供试品中 CN-〉5ug，就会出现绿色或蓝色。试验注意点：1、反应条件应为弱酸性，一般用酒石酸2、小火加热微沸 1min，保证HCN向上挥发3、供试品如能分解产生 CN-，则不能使用此法，如硝普钠第二法：气体扩散—三硝基苯酚锂法仪器装置如 P394-3检查原理：-+6H2OHCN-CN+OH反应在室温下暗处放置过夜OLiOONNOLi++22+3N+2HCNOCO2-NCNO2异红紫酸锂，在与标准KCN溶液比较试验注意点；1、溶液PH值应为~ → 不影响HCN的生成和扩散2、溶液体积应为 5ml3、反应温度应为 25℃，反应时间应为 15小时4、三硝基苯酚锂试液应为 1ml，反应完全后，加水 2ml稀释5、做空白试验六、铁盐检查法1、检查原理采用硫氰酸盐检查铁盐

HONH+HCO-+OH-3CNNO2500nm波长处有最大吸收酸性Fe3++-[Fe(SCN)n]+3-nn=1～6nSCN红色可溶性硫氰酸铁配位化合物标准铁盐溶液：硫酸铁铵 FeNH4（SO4）2、反应条件（1）、用稀盐酸调节酸性在中性或碱性溶液中，三价铁离子易发生水解水解Fe3++HO[Fe（H）2+++22O5OH]H棕色水合羟基铁离子或Fe3++3H2O水解+Fe（OH）33H+红棕色氢氧化铁沉淀所以要调节酸性一般：50ml溶液中加稀盐酸 4ml为宜注意：调节酸性可以使用其他酸，但不能使用氧化性酸，如用后将硝酸除净。原因：

HNO3，如果必须使用，则在使1、因为硝酸可以破坏显色剂

SCN-13NO-+-+3SO4+3CO2+16NO+5H2O33SCN+10H2-2、亚硝酸与SCN-生成红色的亚硝酰硫氰化物（NOSCN），对结果测定有影响HNO+-++NO.SCN+H2O2SCNH（2）、加过量显色剂Fe3++-酸性[Fe(SCN)n]+3-nn=1～6nSCN此络合反应为可逆反应加入过量显色剂，有利于反应完全，并且能消除Cl-干扰一般：50ml溶液中加3ml（1→100）显色剂（3）、加氧化剂，过硫酸铵（NH4）2S2O8作用：1、氧化Fe2+→Fe3+2、防止光线使硫氰酸铁还原或分解2Fe2++(NH4)2S2O8H+++2Fe3+(NH4)2SO4SO2-44）、Fe3+含10~50ug含量为宜太深、太浅都不能用肉眼观察比较5）提取比色供试管、标准管色调不同时，可采用提取比色，用正丁醇或异戊醇提取络合物，比色。如：检查枸橼酸钠中铁盐，为避免枸橼酸钠的干扰，加盐酸 3ml使酸度提高，但酸度增加使硫氰酸铁所呈颜色变浅，故用正丁醇提取后比色，而枸橼酸钠则留在水层中不影响。七、砷盐检查法中国药典中砷检查法有二种第一种：古蔡氏法（药典中均用此法），第二种：二乙基二硫代氨基甲酸银法（附录中收载，但不使用）二种方法所采用的还原剂一样，反应时间、反应温度（25~40℃），45min都一样区别在于显色剂使用不一样，结果比较方法也就不同。一、古蔡氏法1、仪器装置仪器如硫化物检查法装置不同点：1、用溴化汞试纸代替醋酸铅试纸2、导气管中加塞醋酸铅棉花（高度 60~80mm）2、检查原理金属Zn与酸作用生成新生态的氢，与药物中的微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢AsO3-+3Zn++AsH3Zn2++3H2O39H3+AsH3遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑AsH3+2HgBr22HBr+AsH（HgBr）2黄色砷斑AsH3+3HgBr23HBr+As（HgBr）3棕色砷斑5价砷也能被金属Zn还原为砷化氢，但生成AsH3的速度较3价砷慢，所以，在反应液中加入碘化钾、酸性氯化亚锡来还原五价砷为三价砷。AsO43- +2I-+AsO43- +Sn2++生成I2被氧化：

2H+ AsO33-2H+ AsO33-

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I2Sn4+

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H2OH2OI24I-

+Sn2+2I-+Sn4++Zn2+ZnI42-在形成络合物的同时，消耗Zn2+，有利于AsH3反应不断进行总结：加KI的作用1、还原五价砷为三价砷2、和Zn2+络合，有利于 AsH3的生成3、抑制锑化氢生成加酸性SnCl2的作用1、还原五价砷为三价砷2、与Zn生成锌锡齐，从而使氢气均匀连续发生3、抑制锑化氢生成锑化氢可以和溴化汞试纸作用生成锑斑，影响试验结果。SbH3 +HgBr2 SbH2（HgBr）?+ HBr在试验条件下，由于加了KI、SnCl2，供试品中有100ug的锑存在也不会干扰测定结果醋酸铅棉花的作用：如果供试品中含有少量硫化物，则会产生H2S气体，干扰试验结果H2S或SO2HNO3处理，氧化成硫S2-H2S

++

2H+ H2SHgBr2 HgS+ 2HBr所以，加入醋酸铅棉花来吸收硫化氢气体H2S+Pb（Ac）2PbS+2HAc醋酸铅棉花用量多或塞得过紧会影响AsH3的通过，用的少或塞得松，则不能完全吸收H2S气体；中国药典规定：醋酸铅棉花用量60mg重量，高度大约60~80mm，来控制松紧度，这样即使供试品中有 1000ugS2-存在也不干扰测定结果。3、反应条件反应液酸度、酸性氯化亚锡试液用量，锌粒大小与用量、反应温度都会影响氢气发生速度，从而影响砷化氢气体的产生1）、反应酸度：相当于盐酸液2mol/l2）、KI浓度：%；SnCl2浓度：%3）Zn粒大小：60目，用量2g4）反应温度：25~40℃水浴5）反应时间：1小时4、试验中注意点：（1）溴化汞试纸与砷化氢作用灵敏，但形成的砷斑不稳定，所以在反应中应保持干燥和避光，试验结束后立即与标准砷斑比较，否则时间长，砷斑会褪色。（2）如供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等，则在酸性溶液中容易生成气体，可与HgBr2作用生成HgS或金属Hg，干扰检查，应在检查前加入酸盐，再做检查。S2-SO2-HNO2-33SO4SO2-233）如供试品为含锑药物，如葡萄糖酸锑钠，则不能采用此方法，而改用白田道夫法白田道夫法：2As3+ + 3SnCl2 +6HCl 2As + 3SnCl4+6H+二、二乙基二硫代氨基甲酸银法（ Ag-DDC法）1、检查原理砷化氢生成的原理同古蔡氏法，AsH+6Ag(DDC)AsAg3.3Ag(DDC)+3HDDC3AsAg3.3Ag(DDC)+3As(DDC)3+6Ag+3.HDDCNN由于吡啶有恶臭，因此中国药典改用%三乙胺的氯仿溶液2、仪器装置P50图4-7采用平底玻璃管溶液接受砷化氢气体将AsH3气体导入盛有Ag（DDC）溶液的D管内反应时间：45min反应温度：25~40℃水浴试验结束后，添加氯仿至，在白色背景下，从上而下观察比色本法用于硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐以及含锑药物，都不产生干扰，但灵敏度较低。八、重金属检查法重金属系指在实验条件下能与显色剂作用显色的金属杂质常用的显色剂： H2S（有恶臭，现已不用）、硫代乙酰胺（ CH3CSNH2）、硫化钠（Na2S）金属杂质：银、铅、汞、铜、镉、铋、砷、锑、锡、锌、钴、镍等由于在药品生产过程中遇到铅的机会较多，同时铅在体内又易积蓄中毒，故检查重金属时以铅为代表检查。（一）、硫代乙酰胺法1、检查原理CHCSNH+H2OPH=3.5+H2SCH3CONH232H2S+Pb2+PbS+2H+2、操作纳氏管2支供试品溶液PH3.5醋酸缓冲液 硫代乙酰胺 白纸上，自上而下透视标准 铅溶液溶液PH值对于金属离子与 H2S呈色影响较大在PH3~，硫化铅（PbS）沉淀较完全酸度增大，硫化铅沉淀颜色变浅，甚至不显色，因此，供试品如用强酸处理过，应在加硫代乙酰胺前用氨水调PH值。3、实验注意点（1）供试品如有颜色，可采用 A、外消色法（加稀焦糖溶液或无干扰的有色溶液）调颜色一致。B、内消色法一份PH3.5醋酸缓冲液过滤硫代乙酰胺滤液加入标准铅溶液硫代乙酰胺供试品分两份比浊一份（2）、供试品中若有微量高铁盐（Fe3+），在弱酸性溶液中氧化H2S而析出S，产生浑浊，影响比色。3H2S+2Fe3+S+2FeS+6H+所以，应在检查前先加入抗坏血酸（VitC）或盐酸羟胺，还原高铁离子。VitCFe2+Fe3+（3）多数药物在酸性条件下检查重金属，一些溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中产生沉淀的药物，如磺胺类，巴比妥类药物，均在碱性溶液中溶解，因此检查重金属，显色剂不能用硫代乙酰胺，而改用硫化钠：Na2S（4）供试品如为铁盐，如枸橼酸铁铵，则应将铁离子先除去，再检查。水层 加氨试液呈碱性 加KCN去除微量Fe3+ Na2S 检查5）含芳环或杂环的有机药物，如甲硝唑，应先行炽灼破坏，使与有机分子结合的重金属流离，再检查。炽灼温度一般控制在500~600℃温度过高，重金属损失，如铅在 700℃经6小时炽灼，损失 68%。炽灼残渣加硝酸加热处理， 使有机物进一步破坏完全， 但必须蒸干除尽氧化氮， 否则亚硝酸可氧化硫化氢为硫，影响比色，然后再加盐酸，成铅离子后，再作检查。（二）、微孔滤膜法当供试品中重金属量低于2-5×10-6时，用目视比色法观察较困难，改用微孔滤膜法，使重金属硫化物富集于滤膜上，提高检查灵敏度。1、仪器P43图4-52、操作供试品溶液PH3.5醋酸缓冲液2ml稀释10ml放置10分钟标准铅溶液硫代乙酰胺1.0ml50ml注射器压滤 取下滤膜、干燥、比较如果供试品溶液浑浊，应先预滤，然后再用微孔滤膜法检查。九、氧瓶燃烧法有些有机药物中含卤素、硫、硒等元素，它们以共价键形式与碳原子结合，不能检出，需经有机破坏后才能检出。有机破坏有许多种，氧瓶燃烧是其中一种。氧瓶燃烧法定义：氧瓶燃烧法是将有机药物在充满氧气的燃烧瓶中进行燃烧。有机药物→ 燃烧→ 用规定的吸收液吸收 →分析检查1、仪器装置燃烧瓶有 500ml、1000ml、2000ml规格的硬质锥形瓶瓶塞上有一根铂丝（直径 1mm），成网状或螺旋状铂丝作用：A、本身性质较稳定，不易燃烧B、具有催化作用2、操作固体供试品包裹法：50730固体30液体供试品包裹法：液体201316×66×35625实验操作前：用少量水封闭瓶口实验操作时：按紧瓶塞，以免气体逸出实验操作后：充分振摇，完全吸收，注意瓶口洗涤实验中燃烧不完全的原因：1、通氧气不足2、供试品受潮3、供试品包得过紧或过松4、燃烧瓶不严密，有氧气逸出十、酸碱度检查法药典中规定：用碱液进行滴定或规定的 PH值低于，称为“酸度”用酸液进行滴定或规定的 PH值大于，称为“碱度”用酸或碱液分别滴定者或规定的 PH值跨越上下两侧的称为“酸碱度”检查时，一般以新煮沸放冷的蒸馏水（除去CO2，有弱酸性）为溶剂，不溶于水的药物，用中性乙醇等有机溶剂溶解。常用的检查方法：（一）、酸碱滴定法在一定指示液条件下，用酸或碱滴定液滴定供试品溶液中碱性或酸性杂质，以消耗一定体积的酸或碱滴定液来控制药物中所含酸性或碱性杂质的杂质的限量供试液（一定体积）加入指示剂用酸或碱滴定液滴定如：检查氯化钠中的酸碱度取供试品5g，加新沸冷水50ml溶解，加溴麝香草酚蓝指示液（~，黄~蓝）2滴，如显黄色（示为酸性），加NaOH（l）应变蓝色，即5gNaCl中酸性杂质应为NaOH中和，也即在100gNaCl中允许的酸性杂质限量应为。如显蓝色或绿色（示为碱性），加盐酸（l）应变为黄色，同理，在100gNaCl中允许碱性杂质限量为。（二）、指示剂法在一定量的供试品中加入规定的指示液，根据指示液的颜色变化来控制酸碱性杂质的限量。如：检查蒸馏水中的酸碱度取蒸馏水 10ml，加甲基红指示液 2滴，不得显红色；另取蒸馏水 10ml，加溴麝香草酚蓝指示液 5滴，不得显蓝色。甲基红 PH ~ 红→ 黄溴麝香草酚蓝 PH ~ 黄→ 蓝 ——→蒸馏水的 PH ~（三）、PH值测定法用电位法测定药物供试液中所含酸、碱杂质的氢离子浓度，较其他二种方法准确，直观。准确：用 PH计直接测定直观：数字直接显示十一、溶液澄清度检查药物中有不溶性杂质，影响药物的溶液澄清度，所以应作澄清度检查。检查原理：供试品溶液与标准浊液比较标准浊液制备：乌洛托品+肼?(CH2)6N4+NH-NH络合物白色22HCHO乌洛托品结构：NNN能在水中分解产生甲醛，甲醛和肼反应产生白色沉淀%硫酸肼水溶液 +%乌洛托品水溶液（等量混合）→ 24小时避光放置，白色混悬液→ 作标准贮备液 →取标准贮备液 →稀释 1000ml→成浊度标准原液 →按表中数据配制标准浊液（分级）。共分5个级别：级别号：、1、2、3、4供试品溶液配制后和标准级别的浊液比较，决定供试品溶液的澄清度。检查时：供试品溶液标准浊液

比浊用玻璃管中， 40mm高度 → 黑色背景，从上而下观察比较，或垂直伞棚灯，照度 1000Lx，水平方向比较。药典中规定：澄清：供试品溶液的澄清度相当于所用溶剂，或未超过号浊度标准液。检查：如葡萄糖中检查糠醛（不溶性）十二、溶液颜色检查法有些药物在制备过程中有色杂质未除净，或在贮存过程中新生成有色杂质，都会使溶液呈现颜色。（一）、比色法标准色液：重铬酸钾溶液（橙色）硫酸铜溶液（蓝色）氯化钴溶液（红色）配成黄绿、黄、橙黄、橙红、棕红五种贮备液颜色分别调和成 10种颜色检查时：供试品溶液与标准颜色的溶液比较（二）、紫外分光光度法通过吸收度控制有色杂质的限量如：VitC50mg/ml 测定440nm、420nm波长处的吸收度，规定 A分别小于和。十三、干燥失重测定法定义：指药物在规定条件下，经干燥后，所减少的重量，主要指水分，也包括其他挥发性物质如乙醇等。常用测定方法（根据干燥方法不同分为）（一）、常压恒温干燥法称量瓶 → 烘箱内，规定温度干燥 → 从减失的重量计算干燥失重要求：1、适用于受热较稳定的药物2、干燥温度一般为 105℃，除规定外3、干燥时间一般 2~4小时，除规定外4、供试品厚度不超过 5mm，疏松物质厚度不超过 10mm→为使水分及挥发性物质易于挥散。5、供试品为大颗粒结晶，必须研细至粒度 2mm。（二）、减压干燥法在减压条件下，可降低干燥温度和缩短干燥时间， 故适用于熔点低， 受热不稳定及难赶除水分的药物，如肾上腺素（三）干燥剂干燥法适用于不论常压或减压条件下加热烘干均容易分解、升华、挥发的药物。常用干燥剂：五氧化二磷、硫酸、硅胶P2O5：吸水效力、吸水容量、吸水速度均较好，但价格较贵，并且不能反复使用。H2SO4：吸水效力、吸水速度次于五氧化二磷，但吸水容量较五氧化二磷好，用后加热除水分后可重复使用。硅胶：吸水效力、吸水速度均次于五氧化二磷、硫酸，但使用方便，价廉，可反复使用。变色硅胶：加 Co2+，变色 1g硅胶吸水 20mg后就开始变色→ 150℃干燥十四、易炭化物检查检查药物中的有机杂质有机物遇浓硫酸→发生炭化或氧化→呈色→比色法检查与标准比色液比较：标准比色液（氯化钴溶液、重铬酸钾溶液、硫酸铜溶液）不同比例配制例：检查阿司匹林中的易炭化物取比色管两支甲：5ml（氯化钴、重铬酸钾、硫酸铜、水）乙：硫酸 5ml，加入阿司匹林甲溶液15min后白色背景乙溶液乙管不得比甲管深侧面透视十五、炽灼残渣检查法主要检查无机杂质第四节特殊杂质的检查第五节含量均匀度检查法和溶出度测定法500~600℃炽灼残渣：取一定量供试品经缓缓炽灼至完全炭化 → 放冷，加 H2SO4~1ml → 除硫酸后 → 高温 700~800℃完全炭化 → 残留不挥发性硫酸盐即为炽灼残渣→ 称重确定限量加硫酸目的：使有机物完全炭化或灰化如要作重金属检查：炽灼温度在（略）固体制剂检查要求（一）、含量均匀度检查法1、检查目的：含量均匀度定义：含量均匀度系指小剂量片剂、膜剂、胶囊剂或注射用灭菌粉末等制剂中的每片（个）含量偏离标示量的程度。检查目的：保证用药安全和有效2、检查原则：符合下述原则的固体制剂应检查含量均匀度：1）、单剂含量小的品种2）、单剂中主药含量少，辅料多的品种3）、急救、毒剧药物或安全范围小的品种4）剂型以口服固体制剂为主3、检查初试：取10片（个）→测定每片含量→计算相对标示量百分含量（X%）→计算平均值（X）计算偏离量：A100X(XX)2计算标准差：Sn1判断：以含量差异限度为±15%举例（1）如果A1.80S15.0供试品含量均匀度符合规定（2）如果ASf15.0供试品含量均匀度不符合规定（3）如果A1.80Sf15.0同时AS15.0则必须复试（另取20片复试）复试结果：计算30片偏离量： A 100 X(XX)2计算30片标准差：Sn=30n11）如果2）如果

A1.45S15.0A1.45Sf15.0

供试品含量均匀度符合规定供试品含量均匀度不符合规定如果差异限度为± 10%或±20%则改为或 就可以了（二）、溶出度测定法1、测定目的溶出度定义：溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。药物只有溶出后，才被机体吸收检测目的：控制固体制剂质量2、收载原则1）非易溶药物或治疗量与中毒量接近的口服固体制剂2）控制药物缓慢释放的制剂品种3）因制剂工艺造成溶出差异，临床疗效不稳定的口服制剂测定溶剂以水、缓冲液、稀酸、稀碱为主3、测定方法（1）、第一法---- 转蓝法杯1000ml仪器 P81b测定法：除另有规定外一般：溶剂 900ml，加温37±℃（体温）取片剂6片→45min 后，取样点取样（液面下 10mm） →滤膜滤过（30S内完成）计算溶出量：溶出量，%=溶出质量/标示量×100%（2）桨法同转蓝法 杯1000ml胶囊上浮，用耐腐蚀金属轻绕外壳3）小杯法杯容量100~250ml4、结果判断1）6片溶出量均不低于规定限度（Q），除另规定，Q=为标示量70%→合格（2）1~2片低于Q，但不低于 Q-10%，并且平均溶出量不低于规定限度 Q → 合格（3）1片低于Q-10%，另取6片复试复试结果，12片中1~2片低于Q-10%，且平均溶出量不低于规定限度 → 结果合格举例：书中例子第五章 芳酸类药物的分析第一节 概述一、芳酸类药物分类（1）水杨酸及其衍生物 阿司匹林为代表（2）苯甲酸及其衍生物 丙磺舒为代表（3）布洛芬类 布洛芬为代表（4）其他类 萘普生二、含量测定1、直接酸碱滴定法含有流离羧基的药物 如：水杨酸、苯甲酸、阿司匹林、丙磺舒等2、用非水酸碱滴定或双相滴定法 如芳酸盐类，水杨酸钠、苯甲酸钠盐3、水解后剩余滴定法加入碱液使酯键水解，用酸回滴剩余碱如芳酸酯类，阿司匹林等4、亚硝酸钠滴定法（重氮化）含有氨基的芳酸衍生物，如对氨基水杨酸钠5、紫外分光光度法、高效液相色谱法（ HPLC）第二节 水杨酸类药物分析药物：水杨酸及其钠盐， 阿司匹林、对氨基水杨酸钠1、鉴别（1）显色法水杨酸水溶液 +FeCl3 → 紫堇色水杨酸钠 →酸化后呈同样颜色反应COOHCOO-OOH中性Fe+3HCl+FeCl33H331红色 三水杨酸络铁酸COOHCOO-OOHFe弱酸性Fe+12HCl6+4FeCl323紫堇色 二水杨酸络铁酸铁阿司匹林加水煮沸水解后呈色COOHCOOHOCOCHOHFeCl33+H2O呈色2）红外光谱法水杨酸红外光谱P883）熔点测定法水杨酸熔点 mp 158~161℃2、检查水杨酸中检查苯酚，还有一般杂质，如重金属等阿司匹林中检查，一般杂质、重金属、溶液澄清度等特殊杂质：水杨酸、乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）这些都为过敏杂质，可引起寻麻疹，支气管哮喘等过敏反应OCOCHOCOCHCOOHOCOCH333COOCOCOOASAN ASSACOOH OHOCOSSA（1）苯酚检查 限量 %（2）阿司匹林检查水杨酸 A、原料带来 B、水解产生限量 %COOH 0.1g供试品OH 硫酸铁铵显色比色标准水杨酸溶液0.1mg（3）阿司匹林片剂作溶出度检查P92 转蓝法 30min Q=80%3、含量测定（1）直接酸碱滴定COOHCOONaOHOH+NaOH+H2OCOOHCOONaOCOCH3OCOCH3+NaOH+H2O溶剂：中性乙醇指示剂：酚酞指示剂滴定液：mlNaOH滴定液计算公式：T.F.V阿司匹林%100%MsT----滴定度，每1ml滴定液相当于多少克数每1mlNaOH滴定液相当于阿司匹林1ml0.1mol/ml180.16g/mol18.016mg18.02mgV---滴定液体积数Ms---供试品克数F----浓度校正因子0.1008mol/l如：1.0080.1mol/lP91 例子5-1

F0.1015mol/l1.0150.1mol/l阿司匹林百分含量 =%2）非水滴定（碱量法）适用于原料药非水环境下滴定（一般滴定为水溶液）溶剂：如冰醋酸指示剂：结晶紫滴定液：l高氯酸滴定液3）双相滴定法水杨酸钠一方面碱性较弱，在水中直接用酸滴定，反应不完全，另一方面，中和产物水杨酸微溶于水，滴定过程中易析出沉淀产生浑浊，干扰测定。因此采用双相滴定法。双相滴定法定义：在水和不溶于水的有机溶剂两相中进行酸碱滴定法，叫双相滴定法或两相滴定法。一般适用于芳酸类水溶性盐的含量测定。如：水杨酸钠片中加乙醚用

lHCl

滴定指示剂：甲基橙终点：出现红色HCl乙醚水层（4）两步滴定法阿司匹林片剂在制备过程中加入枸橼酸或酒石酸作稳定剂，另外在贮存过程中水解产生水杨酸和醋酸。由于这些杂酸的存在，直接用标准碱液滴定会消耗部分滴定液体积，使测定结果偏高。第一步：中和供试品（液滴定

10→

片

M总→Ms）→中性（酚酞粉红色

中性乙醇溶解15S）

→ 酚酞指示剂

→

NaOH

滴定酒酒酒酒酒酒酒酒+NaOH酒酒酒酒酒酒COOHCOONaOCOCH3OCOCH3NaOH第二步

水解上述供试品 → 加一定体积过量滴定液（L）回滴多余 NaOH

NaOH（L）

→ 水浴加热

15min

→ 放冷，用硫酸空白试验：加热时

NaOH

易吸收空气中

CO2，降低浓度影响结果，应在同样条件下做空白试验。COONaCOONaOCOCH3OH+NaOH酒酒酒酒+CH3COONa2NaOH酒酒酒酒 + H2SO4 Na2SO4 + 2H2O设：空白试验消耗硫酸液 V供试品消耗硫酸液V则每片百分含量

空白供试品

mlml18.02mgCH2SO42(V空V供)0.1T.F.V阿司匹林%Ms(g)Ms标示量%=每片实际测定含量（g）/每片标示量（g）每片百分含量（%）×平均片重（g）/每片标示量（g）18.02mg(V空CH2SO42M(g)V供)10=0.1Ms(g)每片表示量(g)举例：P9418.02mg(39.88ml23.84ml)0.05015mol/l23.584g0.1mol/l10阿司匹林%0.3484g0.3g99.41%第三节 苯甲酸类药物分析药物：苯甲酸及其钠盐丙磺舒泛影酸氨甲苯酸一、苯甲酸的分析1、鉴别苯甲酸 + FeCl3 → 赫色沉淀（苯甲酸二羟六苯甲酸络铁）丙磺舒 + FeCl3 → 米黄色铁盐沉淀2、含量测定苯甲酸 → 含流离羧基 → 直接酸碱滴定法苯甲酸钠 → 双相滴定法二、氨甲苯酸结构NH2CH2 COOH由于分子中同时氨基和羧基，因此以两性离子状态存在[H3N+CH2 COO-]由于氨基离子酸性弱， PKa〉9，因此不能用碱直接滴定在滴定前必须用 HCHO（甲醛）将氨基固定，使羧基流离，酸性增强，然后用碱滴定HCHO+COO-COOH+H3NCH2H2C=NCH2NaOHH2C=N CH2 COONa第六章 芳胺及芳烃胺类药物分析第一节 概述本类药物具有芳胺或芳烃胺结构1、酰苯胺类，如对乙酰氨基酚2、对氨基苯甲酸酯类，如盐酸普鲁卡因3、苯乙胺类，如盐酸去氧肾上腺素1、鉴别1）、药物中含有酚羟基或水解后能产生酚羟基者，可与三氯化铁作用呈现特殊颜色反应。紫堇色→褐色如：对乙酰氨基酚 → 蓝紫色（2）、芳伯胺基的药物可用芳伯胺的颜色反应进行鉴别芳伯胺 + 亚硝酸钠 → 重氮盐 → 碱性B-萘酚 → 显色（红色→ 紫红色）3）、苯乙胺类拟肾上腺素药物容易被氧化而呈色因此可用碘、过氧化氢等氧化显色。4）紫外分光光度法、红外分光光度法2、含量测定1）含有氨基呈碱性，因此可用非水滴定法测定含量，如：利多卡因、肾上腺素2）含有芳伯胺基，可用永停滴定法（亚硝酸钠滴定法）（3）有些药物有紫外吸收，可用紫外分光光度法。第二节 酰苯胺类药物的分析主要药物：对乙酰氨基酚，贝诺酯，利多卡因，布比卡因基本结构R3R1 NH CO R2R4贝诺酯：对乙酰氨基酚 + 乙酰水杨酸一、对乙酰氨基酚1、结构N-（4-羟基苯基）乙酰胺MFCHNO2892、鉴别（1）含酚羟基+ FeCl3 → 呈现蓝紫色[酒]3-FeCH3CONHO生成络离子（2）+稀HCl水解→流离芳伯胺基结构→加亚硝酸钠、盐酸→生成重氮盐→加碱性B-萘酚→红色偶氮化合物OHOHOHHClNaNO2酒HClNHCOCH3NH2N+.ClNOHOHHONNNaOH（3）紫外吸收酸性甲醇溶液 249nm波长处，有最大吸收， E1%=8803、检查主要检查酸度、溶液澄清度、氯化物、硫酸盐等（1）酸度、生产过程中可能引进酸性杂质B、也可能在贮存过程中水解产生醋酸中国药典规定：1%水溶液， PH应控制在 ~（2）对氨基酚、原料中带入B、水解产生对氨基酚有毒（粒细胞障碍） 、并且使产品颜色加深（对氨基酚不稳定，易变色） ，应严格控制检查原理：OHOH-+ Na2[Fe(CN)5NO] Na2[Fe(CN)5HO NH2]NH2蓝绿色络合物酒酒酒1.0g酒酒酒20ml 酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒 1ml酒酒酒酒50ug酒30min 酒酒酒酒50ug限量 0.005%1.0g（3）有关杂质 对氯乙酰苯胺酒酒酒1.0g酒酒5ml200ul酒酒酒酒酒酒40ul50ug/ml酒酒酒 酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒50ug/ml40ul限量0.005%1.0g/5ml200ul4、含量测定紫外分光光度法 P120取本品约40mg→%NaOH50ml溶解→稀释至250ml→取5ml→加%NaOH10ml→稀释至100ml→257nm波长测定吸收度A。1%吸收系数 E=715举例：6-1供试品量 42mgA= 计算对乙酰氨基酚百分含量0.59421%(g/ml)100ml250ml对乙酰氨基酚%7155ml100%42mg98.93%片剂：计算相对标示量百分含量相对标示量百分含量 =百分含量×平均片重 /标示量举例：6-2标示量 平均片重=100.5831%(g/ml)100ml3.366715250ml5ml相对标示量百分含量%g44.9mg10100%0.3g101.87768%101.9%5、片剂溶出度取本品，采用转蓝法1000ml稀酸溶剂，30min→取5ml→过滤→取滤液1ml→加%NaOH稀释至50ml→257nm波长测定吸收度A限度为标示量的80%------合格举例：6-3A50ml1%(g/ml)1000ml溶出量，%E1ml100%表示量本试验结果：%、%、%、%、%、%平均值：%，低于规定限度80%，并且有一片低于Q-10%（70%）为%所以，本批药品溶出度不合格。二、利多卡因1、结构CH3C2H5NHCOCH2 N .HClC2H5CH32、鉴别（1）加三硝基苯酚利多卡因+三硝基苯酚→黄色沉淀↓mp.228~232℃（2）加硫酸铜试液利多卡因 + 硫酸铜试液 → 深蓝色络合物络合物结构：H3CC2H5N CH2CONC2H5H3CCuCH3C2H5NCOCH2 NC2H5CH33）加CoCl2或Co(NO3)2利多卡因 +CoCl 2 → 蓝绿色沉淀↓4）由于2个甲基空间位阻的影响，酰胺结构不易发生水解，生成芳伯胺因此，无芳伯胺显色反应即：加亚硝酸钠，加?-萘酚无反应第三节 对氨基苯甲酸酯类药物分析药物：苯佐卡因、普鲁卡因、丁卡因基本结构：对氨基苯甲酸酯HN COOR1R2一、普鲁卡因1、结构H2N COOCH2CH2N(C2H5)22、鉴别1）芳伯胺基团→芳伯胺反应在酸性条件下加亚硝酸钠，生成重氮盐，再加?-萘酚，生成有色偶氮化合物芳伯胺 + NaNO2→重氮盐→碱性 ?-萘酚→有色偶氮化合物（2）酯键 → 加碱水解NH2 COOCH2CH2N(C2H5)2NaOHHOCH2CH2N(C2H5)2酒酒酒酒NH2 COONaHCl 酒酒酒酒酒酒酒酒酒NH2 COOH酒酒（3）如为盐酸盐 → 氯化物鉴别反应Cl- + Ag+ AgCl 酒酒3、检查对氨基苯甲酸 → 来源于原料或分解产物酒酒酒2.5mg/ml10ul酒酒酒10ul酒酒酒酒酒酒30ug/ml酒酒展开剂苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4）限度%4、含量测定亚硝酸钠滴定法→芳伯胺NH2 COOCH2CH2N(C2H5)2+NaNO2 + 2HCl[N N+ COOCH2CH2N(C2H5)2].Cl-重氮化反应历程：NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNoCl+H2OArNH2NoClArNHNOArNNOH酒ArN+NCl-第一步为慢反应，整个反应取决于第一步（1）加KBr，使反应速度加快KBrH+HBrHNO2+HBrNOBr+H2O由于NOBr生成的速度比NOCl生成的速度快300倍，所以使NO+的浓度增大，加速反应（2）加HCl盐酸盐较硫酸盐溶解度大，反应速度也较快，因此多采用盐酸理论上芳伯胺和盐酸的比例为 1：2，但实际使用更多原因：、强酸性介质中，可加速反应B、重氮化合物在酸性溶液中较稳定C、防止生成偶氮氨基化合物ArN+N+ArNH2Ar-N=N-NH-Ar+HCl-Cl芳伯胺成盐酸盐，此反应就不会进行了但酸度过大，可阻碍芳伯胺基流离，影响重氮化反应，所以，一般比例：芳伯胺：盐酸=1：~63）反应温度温度高，反应速度就快，但温度高，使亚硝酸挥发，重氮盐分解。所以，测定一般在低温下进行，15~25℃为了使亚硝酸不分解挥发，滴定管管尖应插入液面底下 2/3然后再提取处管尖，再滴定到终点

处，将大部分滴定液滴入反应，第四节 苯乙胺类药物分析一、鉴别此类药物大多有酚羟基1、加三氯化铁显色 P1312、易被氧化剂氧化显色常用氧化剂，碘、过氧化氢、铁氰化钾I2HOCHCH2NHCH3OCHCH2NHCH3酒H2O2OHHOOHO肾上腺素红在酸性条件下，去甲肾上腺素较稳定，不被碘氧化酒酒I2Na2S2O3酒酒酒酒酒酒酒I酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒2PH3.563、络合反应去氧肾上腺素+CuSO4→紫色络合物（氨基醇反应）第七章 巴比妥类药物的分析第一节 概述巴比妥类药物是丙二酰脲（巴比妥酸） 5位次甲基上的 2个氢原子被烃基取代后的产物，为环状酰脲类镇静催眠药。结构：OR1 CNHCOR2CNHO具有1，3-二酰亚胺基团，能发生酮式 -烯醇式互变OOR1CNHR1CNHCCOCCOH酒酒酒R2CNHR2CNOO酒酒OHR1 C NCOH酒酒酒R2CNO烯醇式结构可电离出氢离子，因此，具有弱酸性巴比妥类药物具有两步电离，因此如二元酸：PH8一钠盐PH12二钠盐OOR1CNHPH8R1CNHCONaCCOHNaOHCR2CNR2CNOONaOHPH12ONaR1 C NC C ONaR2 C NO巴比妥类药物性质：1）、酸性溶液中不溶，易溶于乙醚、氯仿等有机溶剂中2）、钠盐易溶于水，不溶于有机溶剂中3）、钠盐加酸，析出巴比妥类药物4）、巴比妥类药物本身没有紫外吸收，但一钠盐或二钠盐有紫外吸收PH10240nm一钠盐PH13255nm二钠盐2402555）具有酰亚胺结构，与碱溶液共沸即水解发生氨气可使红色石蕊试纸变蓝OR1CNHNaOHR1CCOCHCOONa+2NH3+2Na2CO3R2CNHR2O第二节 鉴别和检查一、鉴别（一）、丙二酰脲类的鉴别反应1、与硝酸银作用生成白色沉淀OR1 CNHCOR2CNHOOR1 CNHCOAgR2CNO酒酒酒酒酒酒

ONa2CO3R1CNHAgNO3CCONaR2CNOOAgAgNO3 R1 C NCOAgR2CNO酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒加入硝酸银出现白色沉淀振摇溶解 加入硝酸银出现沉淀振摇不溶解2、与铜吡啶试液作用显紫色或产生紫色沉淀NCuSO4+2[NNOOR1CNHNR1CNHCCOCCOHR2CNHR2CNOOOR1CNHCCOR2CNOOR1CNHCCOR2CNO

2+Cu]SO42-NCuN紫色络合物举例：取巴比妥→加吡啶溶液5ml，溶解→加硫酸铜试液→紫色沉淀→加氯仿5ml→氯仿层显紫色位取代基亲脂性越强，生成的沉淀越易溶于氯仿3、与钴盐反应，生成紫堇色配位化合物OR1CNHCo2+2CCO++4(CH3)2CHNH2R2CNHOOCNHR1CCOR2CNNHCH(CH)232OCoONH2CH(CH3)2R1CNCCOR2CNHO反应条件：在无水条件下反应比较灵敏，因此所用试剂均不应含水分常用溶剂：无水乙醇、甲醇试剂：醋酸钴、硝酸钴或氧化钴碱：异丙胺4、与汞盐反应生成白色沉淀Hg（NO3）2、HgCl2生成的沉淀能溶与氨试液中OR1CNHOHg(NO)CNHCCO32R1COR2CNHCR2CNOOHgNO3OOR1CNNH3R1CNC-+CCOHR2CONH4R2CNCNOHgOHOHgNO3酒酒酒酒沉淀溶解5、与香草醛反应OCHOR1CNHO+H2SO4CCR2CNHOCH3OOHOOR1CNHNHCR2CCOOCCR2CNNCR1OCHO酒酒酒OCH3OH96%酒酒OORCNNCR21CCOHOHCCRCNNCR12OCHO酒酒酒OCH3OH举例：戊巴比妥10mg和香草醛10mg→瓷盘上→加浓硫酸→水浴上加热30秒→产生棕红色→放冷后加96%乙醇→颜色转为暗绿色（二）钠盐鉴别如为钠盐，加酸析出巴比妥类药物，依法进行鉴别OOR1CNH+R1CNHCCHR2ONaCCOCNR2CNHOO（三）、取代基鉴别反应1、不饱和烃取代基，如司可巴比妥（1）、使碘试液或溴试液褪色OCH2CHCH2CNH+Br2CCOCH3(CH2)2CHCNHCH3OBrBrOCH2CHCH2CNHCH3(CH2)2CHCCOCNHCH3O（2）使高锰酸钾溶液褪色OCH2CHCH2CNHKMnO4CCOCH3(CH2)2CHCNHCH3OOHOHOCH2CHCH2CNHCH3(CH2)2CHCCOCNHCH3O2、芳环取代基反应 苯巴比妥（1）硝化反应与硝酸钾、硫酸加热 → 生成黄色硝基化合物OCNHC C O +2KNO3 + H2SO4C2H5 CNHO NO2ONO2CNHCCOC2H5CNHO黄色化合物2）亚硝化反应与亚硝酸钠、硫酸反应生成桔黄色产物OCNHC C O +2NaNO2+ H2SO4C2H5 CNHONOONOCNHCCOC2H5CNHO桔黄色产物（3）与甲醛-硫酸反应→生成玫瑰红色产物举例：中国药典苯巴比妥50mg→放置试管中→加甲醛试液1ml→加热煮沸→冷却→沿管壁缓缓加硫酸→两层→水浴加热→界面显玫瑰红色二、检查中国药典规定检查苯巴比妥中检查苯基丙二酰脲及酸性杂质苯巴比妥钠中检查流离苯巴比妥检查方法：（1）吸收系数法 测定吸收度 →吸收系数（2）薄层层析法将供试品配成%、%两种浓度的溶液，薄层展开1.0%0.005%%溶液中的杂质斑点不得比 %溶液中的主斑点颜色深第三节 含量测定一、银量法OR1CNHAgNO3CONaR2CNOOOAgRCNHAgNO3R1CN1CCOAgCCOAgR2CNR2CNOO操作：取本品约，精密称定→加甲醇40ml溶解→加新鲜配制的3%无水碳酸钠溶液15ml（时间长，有二氧化碳吸收，碱度降低NaHCO）→用AgNO滴定液（l）滴定→出现白色浑浊→33终点实际上终点较难观察：滴加AgNO出现白色沉淀→振摇→溶解→生成一银盐→此时3滴加硝酸银，在一银盐生成速度减慢，同时二银盐也生成，终点观察不易。现采用电位法指示终点，一般采用电位滴定仪或酸度计银-玻璃电极（银电极指示电极、玻璃电极为参比电极）终点判断方法：滴定体积和电位做曲线，前面间隔可大点，接近终点时间隔小点。E（mv）V（ml） 终点做两条与滴定曲线成45度的切线，两切线间做一垂直线，通过垂直线中点，做一条与切线平行的直线，该直线与滴定曲线的交点即为滴定终点。或采用如下图方法ΔE：间隔两次的电位差ΔV：间隔两次的加入滴定液的体积差E/ΔVV（ml） 终点二、溴量法司可巴比妥OCH2 CH CH2 CNHCO+Br2CH3(CH2)2CHCNHCH3OBrBrOCH2CHCH2CNHCCOCH3(CH2)2CHCNHCH3O反应结束后，多余的 Br2Br2+2KII2+2KBrI2+2Na2S2O32NaI+NaSO246具体操作：取本品约，精密称定→放入250ml碘瓶中→加水10ml→精密加入溴液（L）25ml→加HCl5ml→振摇后，反应15min→微开瓶塞（防止溴挥发），加KI试液10ml，立即密塞→用NaSO（l）滴定液滴定，指示剂：淀粉，终点：蓝色消失223每1mlBr2（l）相当于司可巴比妥钠三、中和法巴比妥药物呈弱酸性，可用标准NaOH直接滴定或在非水溶液中，用标准甲醇钠滴定四、紫外分光光度法巴比妥类药物在酸性溶液中无紫外吸收在碱性溶液中有紫外吸收PH 10 240nmPH 13 255nm 最大吸收如：苯巴比妥在 PH的硼酸缓冲溶液中最大吸收波长为 240nm，吸收系数为 E1%=431A=ECL → C=A/E或与标准品对照A供/C供=A标/C标 →C供=A供/A标*C标五、色谱法一般用气相色谱第八章 磺胺类和喹诺酮类药物的分析第一节 概述磺胺类药物是对氨基苯磺酰胺取代物H2N

SO2

NH2N4

N1N1取代物，如：磺胺二甲嘧啶，磺胺嘧啶、磺胺异恶唑、磺胺甲恶唑这类取代物供药用者最多N4-芳伯胺基 →进行化学鉴别和含量测定N4取代物，这类取代物供药用者很少，临床上基本没有N1和N4取代物，2种酞磺胺噻唑柳氮磺吡啶→用于结肠炎，肠道中不吸收磺胺药的发展：从染料中发展，百浪多息第二节 磺胺类药物的化学鉴别法N1磺酰亚胺基N4芳伯胺基根据性质鉴别一、重氮化-偶合反应芳伯胺基H2N SO2 NHR + NaNO2 +2HCl[NN+SO2NHR].Cl-NaOHOHN=N SO2 NHROH偶合产物颜色：橙黄色 →猩红色此类药物有磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲恶唑二、铜盐反应N1，磺酰亚胺基呈酸性（磺酰基强吸电子性）

，能与

NaOH

试液作用生成易溶于水的钠盐。H2N SO2 NHR +NaOHCuSO4H2N

SO2

NRNa

酒酒酒酒H2N SO2 NRCuH2N SO2 NR铜盐沉淀颜色随

N1取代基不同，颜色也不一样P159

表

8-4如：磺胺甲恶唑 →草绿色沉淀磺胺间甲氧嘧啶 →黄绿色沉淀磺胺对甲氧嘧啶 →淡咖啡色沉淀 →放置后变紫红色沉淀鉴别操作：取磺胺药 →加水和 NaOH（l）各3ml →溶解 →过滤，取滤液 →加CuSO4试液 →根据颜色变化鉴别注：NaOH用量不可过量，因为过量 NaOH在滤液中和 CuSO4反应生成蓝绿色沉淀 →进一步氧化为CuO，红色沉淀，干扰试验鉴别反应2NaOH + CuSO4 Cu(OH)2 + Na2SO4CuO如果，只加 NaOH和CuSO4反应不明显时，可改用正丁胺或吡啶和硫酸铜磺胺药~→加正丁胺或吡啶1ml→CuSO4试液2滴→加水3ml，氯仿5ml→观察氯仿层颜色，鉴别三、个别磺胺药的鉴别反应1、磺胺醋酰钠磺胺醋酰钠 +醋酸 →乙酰磺胺 →测定熔点H2NSO2NCOCH3+HAcH2NSO2NCOCH3NaH2、磺胺噻唑COOHNH2SO4CONHSO2NH+H2OSCOOHOCH2SO4HSOO24OHOHCOOHCOOHOOHNaOOOCNaOHOCCOCOONa酒酒酒酒酒酒酒酒酒酒OH- H+酒酒酒酒另一部分，磺胺噻唑 →测定熔点3、磺胺脒加热分解NHH2N SO2NH C NH2+3NaOHH2NSNH+2NH3+NaCO32O ONa氨气使红色石蕊试纸变蓝第三节 磺胺类药物的红外光谱识别法磺胺类药物化学鉴别法专属性不强，还必须用红外光谱配合进行鉴别简单讲解红外光谱中的振动形式：伸缩振动摇摆振动对称伸缩振动不对称伸缩振动等一、磺胺类药物的特征吸收-11、磺酰基：-SO2- 1370~1300cm ，不对称伸缩振动-11180~1140cm ，对称伸缩振动峰强2、苯环骨架：

-C=C-

1610~1480cm-1

，HNH3500~3140cm-1，3、伯胺基：SO2NHR酰胺基：讲解：磺胺甲恶唑光谱P162，表8-6二、磺胺类药物的红外光谱识别法鉴别：要求供试品的红外光谱吸收图谱与标准对照图谱一致，具体操作1、拿到一张红外图谱，首先判断有无磺胺类药物的基本结构→也就是说供试品是否是磺胺类药物可参照表 8-62、从波数400cm-1开始，逐个查看供试品图谱与对照图谱吸收峰的峰位，峰形，强弱，相对大小是否一致。400cm-1~2000cm-1，波数读数误差允许在±10cm-1，2000cm-1~4000cm-1，波数读数误差允许在±20cm-1，在400cm-1~2000cm-1由于峰较多，所以误差不能太大。但由于晶型不同，仪器性能不同，试样制备时研磨的差异或吸水程度不同等原因，会影响光谱的性状→图形直接比较往往很难，如P163，P165的磺胺甲恶唑的两张图谱比较有所不同。所以采用谱线检索表三、红外光吸收图谱的谱线检索表又称最强峰峰位分组索引表中只列出吸收度大于（透光率小于

60%）的吸收峰。1、列出最强吸收峰的峰位（波数）2、400cm-1~2000cm-1，每隔100cm-1划一个区，共17区，每个区中列出最强峰位（不论多少，只列出一个，一位数表示），读数误差在±10cm-1，3、2000~4000cm-1，每隔200cm-1划一个区，共10区，每个区列出最强的吸收峰峰位（一位数表示大于本区栏数，二位数表示小于本区栏数），误差±20cm-1。4、将27区填满，P164，图8-25、供试品图谱