范氏中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维测定的实验方案1(修改)

饲料中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）和木质素（ADL）的测定实验方案实验原理纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）。植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。中性洗涤纤维经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。所需试剂十二烷基硫酸钠溶液（中性洗涤剂）、乙二胺四乙酸二钠（EDTA，化学纯）、四硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）s磷酸氢二钠、乙二醇乙醚十六烷基三甲基溴化铵、硫酸、丙酮，无水亚硫酸钠，十氢化萘，95%乙醇所需仪器分析天平：感量0.0001g、容量瓶、锥形瓶、滴定管、移液管、洗瓶、洗耳球、滴管、量筒。粗纤维测定仪（SLQ-6）、古氏坩埚、干燥器（以氯化钙或变色硅胶为干燥剂）、酸度计试剂的配制30g/L十二烷基硫酸钠（中性洗涤剂）溶液。称取18.61g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，化学纯）和6.81g四硼酸钠（Nabo.10HO）24 7 2和10mL已二醇乙醚同放入1000mL烧杯中力口入少量水加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠。称取11.9644g磷酸氢二钠（含12水），置于另一烧杯中，加入少量水，微微加热溶解后倾入第一个烧杯，稀释至1000mL。此溶液PH在6.9-7.1.20g/L十六烷三甲基溴化铵（酸性洗涤剂）溶液。称取20g十六烷三甲基溴化铵，溶于1000mL已经标定过的0.5mol/L硫酸溶液中，搅动溶解，必要时过滤。0.5mol/L硫酸溶液。称取49g（27.87mL）浓硫酸，慢慢加入已有500mL水的烧杯中，冷却后注入1000mL容量瓶中，定容，标定。（4.3.1标定硫酸的方法称量1.6g在270-300°C灼烧至恒重的基准无水碳酸钠，称准至0.0001g。溶解50mL水中，加入10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液有绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时做空白试验。4.3.2标定硫酸过程中的主要影响因素

pm标淮中叙述的内容苯确定国素对#毘精度影响注意爭顼说明i称取下述规定蚤的于270-3WOX：灼烧至恒重的基准无水碳酸纳，灼烧多长時间才达到恒吏？称取H寸的更境温度.药品溫度-环境湿廈是多少？虽然这些都有一般性的规定-但称取时环境湿度及药品温度对称取的质•症有规龙口否则毎次称取的质輦精度受到影响、标芝的结果都各不相同口灼烧时M；U,标定出的厳据偽低；旳烧时达不到怛彰标定出的数揭懾圮’灼烧时间建巍最好大子3小時。环境沮虞大，釉取药弗醐实际质童偏小，标定出药数扌屈偏妃"蔬好在晴朗的天宪标定、有条件百勺可将化验舉的湿度控制在3舲踽旳烧设备；目前化验室高温炉，有老式指针控制曙的也亦新式可控磴数亨控制仪.老式的奇温胪大多数控制精屢不自趴不披人们逢意1在灼烧药品时越温V新式可控硅高温炉控制粉度离，克全满足要求，但控制参数：比例度要训餌10%?枳分吋间调到壷小°2''称准至U.―定是校准好天平3 '濬于SOiiiL水申■加10滴進甲酚竦-甲基红混合扌旨示攏，化验室用球馆水貳好周电导仪测试一下看是否达到姜求.4用配制好的硫雅溶液_滴定至溶漉由绿色变为暗红色r配制好的硫酸溶嶽坳旬程度不蛭过充分妁搅拌和斌置、硫釀溶濾很雅均匀*妾充分攪拌均匀，存放24小时后再进行标定*潰:沸2minf盍沸时逋发童的大4不确定，M#＜的丸小直接務响淳液:的颜色r从而影响标定救蕪岌莹为25mL为宜.6冷却后继嫌滴定至溶液再呈暗红乩冷却到什么溫度才可再次滴定-没有说明©分别紂冷却到5QC、4Q€.309做过试脸，结舉大不相同=本人建议统一冷却到409°最后强调终点是暗红色，M—会愛为洋红•7 '同时作空白试验)4.572%硫酸。取734.69mL浓硫酸，倒入200mL水中，冷却后稀释至1000mL。4.6其他试剂。丙酮，无水硫酸钠，十氢化萘，95%的硫酸操作步骤NDF的测定5.1.1准确称取40目筛饲料样品0.5-1.0g（m），置粗纤维测定仪（SLQ-6）坩埚中，加入中性洗涤剂溶液100ml和2ml十氢化萘即萘烷和0.5g无水亚硫酸钠。打开冷凝装置，立即置于电炉上煮沸（5-10min）,并微沸1h.5.1.3煮沸完毕，冷却10min，抽滤，并用沸水冲洗三次，再抽滤，再用95%的乙醇20mL冲洗一次，抽滤，再用20ml丙酮冲洗，抽滤。5.1.4取下坩埚，放置通风橱中挥发完残余有机溶剂后，105°C烘干，称至恒重（m）25.2ADF的测定准确称取样品，0.5-1.0g（m）,置坩埚中，加入酸性洗涤剂溶液100ml和数滴十氢化萘。5.2.2打开冷凝装置，立即置于电炉上煮沸（5-10min），并微沸1h.用已知质量的玻璃坩埚（m3）,在抽滤瓶上抽滤残渣，并用沸水洗涤残渣，抽滤反复3次，并用（蓝色）石蕊试纸检测滤液是否呈现中性，然后用少量丙酮洗涤残渣，反复冲洗至滤液无色为止，抽净全部丙酮。5.2.4取下坩埚，放置通风橱中挥发完残余有机溶剂后，105C烘干，称至恒重(m)25.3ADL的测定将酸性洗涤纤维加入72%硫酸，使得酸性洗涤纤维被淹没，每隔1h搅拌一次，在20°C消化3h后过滤，并冲洗至中性。将坩埚放置105°C的烘箱中烘2h后m4,将残渣烘干并灼烧灰分后(500C马沸炉中灼烧2h或坩埚中无炭粒为止，取出玻璃坩埚，放入干燥器中冷却至恒重)即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分m的含量。5计算W(NDF)：=(m2-m1)/mW(ADF)=(m3-m2)/mW(ADL)=(m4-m5)/m七、试剂总用量预算表用量试剂乙二胺四乙酸二钠(EDTA，化学纯)18.61*50=930.5g四硼酸钠(Nabo.10HO)24 7 2 76.81*50=304.5g

十—烷基硫酸钠溶液30*500=15000g无水磷酸氢二钠4.65*50=232.5g十六烷三甲基溴化铵20*50=1000g94.766%硫酸28*50=1400mL72%硫酸734.69*50=36734.5mL总硫酸38134.5mL十氢化萘(2+2)*500=2500mL无水亚硫酸钠0.5*500=250g内酮(20+20)*500=2000mL基准无水碳酸钠1.6*20=32g中性洗涤纤维50000mL酸性洗涤纤维50000mL已醇乙醚500mL参考文献王佩之，许冠南.一种有待开发的稀有蔬菜一四棱豆[J].中国蔬菜,1991,(3):30~32.陈东明，艾辛，全妙华，等.四棱豆在湖南怀化地区的引种试[J].作物研究,2005,19(1):35~37.⑶傅翠真，王佩之.四棱豆的营养价值及利用前景[J].作物杂志,1994,(5):37~38.[4]韦武青，宋春，马志虎.四棱豆[J].上海蔬菜,2004,(2):21.⑸张丽琴•绿色金子一四棱豆[J].当代蔬菜,2005,(11):39.[6]吴晓杰•不同处理方式对青贮饲料质量影响的试验硏究[D].北京:中国农业大学,2005.⑺黎英华.鄂尔多斯高原主要饲用豆科植物青贮特性的硏究[D].呼和浩特:内蒙古农业大学,2010.⑻刘向阳，阎巧娟，韩鲁隹等.氨化秸秆饲料的质量评定[J].中国农业大学学报,2002,7(6):49~53.薛艳林，玉柱，白春生，等.萎蔫处理对苜蓿草渣青贮品质的影响[A].中国草学会饲料生产委员会第15次饲草生产学术硏讨会论文集[C],2009:350〜354.杨富裕,周禾,韩建国,等.添加甲酸+甲醛对草木樨青贮品质的影响[J].草业学报,2004,13(1):74〜78.杨杰,顾洪如,翟频,等.凋萎程度与复合添加剂处理对多花黑麦草青贮品质的影响[J].江苏农业学报,2008,24(2):185〜189.郭庭双.秸杆畜牧业[M].上海:上海科学技术出版社,1994:43〜98.郭玉琴，何欣，孙晓利.不同含水率对苜蓿青贮营养成分的影响[J].当代畜牧,2005,(12):38〜39.余汝华•玉米秸秆青贮前后营养成分变化规律的硏究[D].北京:中国农业大学,2004.BoeverJL,BrbanaderDL,SmetAM,etal.Evaluationofphysiealstuetureofmaizesilage[J].DairySic,1993,(76):1624~1634.王秀奇，秦淑媛,高天慧，等.基础生物化学实验(第二版)[M].北京:高等教育出版社,1999:113~122.张丽英.饲料分析及饲料质量检测技术(第2版)[M].北京:中国农业大学出版社,1998:46~59.王开强，林宏凤,郭龙文.椰子果皮粗灰分、钙、总磷的测定[J].琼州大学学报,2004,11(5):31~33.梁祖铎.饲料生产学[M].北京:农业出版社,1979:67.余汝华•玉米秸秆青贮前后营养成分变化规律的硏究[D].北京:中国农业大学,2004.杨斌;殷引;张浩博;佘永桢;沈轶洗涤剂法测定烟草及烟草制品中中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸性洗涤木质素的硏究[M]中国烟草学报,2012苏玲玲;申煜;张志军;纤维袋法测定饼粕类饲料原料中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量的研究饲料博览2013苗志国,侯先志,敖长金,吴庶青.营养补偿初期苏