最全糖化血红蛋白测定的原理与仪器解析

..精品精品糖化血红蛋白〔HbA1c〕测定的原理方法与仪器解析及临床意义糖尿病目前在世界上发病率很高，占免疫病的比率，在兴旺国家高达2-5%，而我国糖尿病的发病率亦达2-3%，并且每年还以1证明：血液中的糖化血红蛋白〔HbA1c〕浓度相对稳定，其浓度值能准确反映最近1-3个〔HbA1c〕占总血红蛋白〔Hb〕的百分含量的测定工程。有些兴旺国家已将HbA1c的测定列入中老年人的常规体检工程。测定HbA1c比较常用的方法，目前有乳胶凝集反响法和离子交换高压液相色谱法两种，分别用生化和糖化血红蛋白自动进展测定。HbA1c的临床意义血糖上升或降低的影响。能反响糖尿病患者2-3个月以内的糖代谢状况，同时与糖尿病并发症尤其是微血管病变关系亲热，在糖尿病学上有重要的临床参考价值。增高：测定HbA1c可以了解糖尿病人在2～3个月的血糖掌握状况。此外，用含葡萄糖的透析液作血透的慢性肾衰病人，地中海贫血和白血病病人亦增高。降低：溶血性及失血性贫血，慢性肾衰，慢性持续性低血糖症等。作为糖尿病的病情监测指标不是诊断糖尿病的敏感指标，不能取代现行的糖耐量试验。可以列为糖尿病的普查和安康检查的工程。当HbA1c＞9及估价糖尿病慢性并发症的发生与进展状况。对预防糖尿病孕妇的巨大胎儿、畸形胎、死胎，以及急、慢性并发症发生进展的监视具有重要意义。对于病因尚未明确的昏迷或正在输注葡萄糖〔测血糖固然增高〕抢救者，急查糖化血红蛋白具有鉴别诊断的价值。对于糖化血红蛋白特别增高的糖尿病患者临床常用的测定糖化血红蛋白HbA1c的方法乳胶凝集反响法乳胶凝集反响法是利用抗原抗体直接测定总血红蛋白Hb中的糖化血红蛋白HbA1c的百分含量。目前有国内外几家厂商可以供给HbA1c测定的试剂盒。这种免疫反响是由被测血样品中的总Hb和HbA1c与试剂中的抗体结合而形成凝集，凝集量随HbA1c浓度的大小而变化。使用生化器来进展比浊测定HbA1c的浓度，承受终点法，生化仪通过测定反响液的吸光度值，可直接反映出凝集量的多少；推算出HbA1c占Hb的百分含量，测定时，仪器多承受660nm单色光做主波长，800nm单色光做副波长，通过标准曲线得出实测值。由于这种试验其标准曲线是非线性的，所以在测定前，首先用随试剂盒一起带有的55ACPU求出实测样品中的HbA1c百分含量。乳胶凝集反响法测定HbA1c简便、不用增加仪器，可直接用自动生化分析对样品进展快速测定。该方法也可以用手工的方法，在酶标仪进展测定，是目前使用较多的方法。但是乳胶凝集反响法其准确性和重复性均有欠缺。离子交换高压液相色谱法HPLC使用离子交换高压液相色谱HPLC〔highpressureliquidchromatography〕来测定HbA1c的百分含量目前被认为是分析HbA1c的金标准。承受HPLC方法工作的全自动糖化血红蛋白器，以其快速、简便、精巧、准确等特点，受到越来越多用户的欢送。色谱分析是一类利用混合物的各组分在不同相上的安排差异有把混在一起的被测蛋白分别出来，才能准确测定；在HbA1c的测定时，可以通过高精度HPLC，将HbA1c从Hb中分别出来，才能得到准确的数值。在生命科学争论中，活性物质的分别主要应用的是液相柱色谱。这种技术诞生于20世纪初叶，俄国化学家茨维特把植物这样一种用流体洗脱色素混合液，使之通过碳酸钙做固定相从而实现分别的技术，起名叫了，但“色谱”分析的名称仍沿用至今。固然更贴切的名称应当叫“层析法分别时间长，效率低。随着科学技术的进步，20世纪60年月，人们研制出型液相柱，同度的检测器，的器—高压液相色谱仪在70年月诞生，很快就占据了分析化学的舞台。特别是在生命科学的争论中，HPLC技术由于对被测物活性影响小，几乎可以测定生物医学中全部的非发挥性物质，如近年来利用离子交换HPLC法测定血液中的HbA1c的百分含量，被认为是糖尿病诊断的金标准。糖化血红蛋白自动糖化血红蛋白自动承受离子交换HPLC法测定HbA1c。离子交换HPLC法，是利用能交换离子的材料为固定相来分别离子型化合物的方法。仪器使用阳离子交换柱进展HbA1c的百分比测定；当肯定量的全血样品被取样针吸入到进样装置内，在稀释局部被溶血，释放出红细胞中的血红蛋白Hb，并由稀释液稀释，稀释好的已经溶血的样品，由高压泵〔流淌相〔Hb〕的各种组份即与固定相上能移动的离子进展交换3No1叫起始缓冲液，含低离子浓度的盐，洗脱液No2、No3缓冲液，其离子浓度依次增高很多1Hb中的多种成份被分别成6HbA1c、HbF、HbA1被有效、准确的分别；由交换柱流出的Hb成分到达仪器的检测器，检测器内装有放射单色光的发光二极管，通过双波长可见光比色法测定HbA1c、HbF、HbA1三个参数。仪器的检测器检测出分别后HbA1c、HbF、HbA1组分的吸光度值，与HbA1c标准品吸光度值比较，分析计算出结果，最终以百分率表示的Hb组分结果与色谱图一起打印出来。离子交换柱HPLC法对全血直接测定HbA1c，其批内和批间变异系数CV均可以小于1〔CV<1HbA1c特别适合于糖尿病人的监控。关于糖化血红蛋白的不同的测定方法与正常值之间的关联！中也不便利。现在糖化血红蛋白的测定方法有5〔红蛋白HbA1c〔〕〕〔〕〕免疫法。比方我们医院以前用的是免疫法，正常值是5%-7%，现在用的是微离子柱层析法〔机器型号是DREWDS6%-8是否有肯定的比例关系？国际上有没有糖化血红蛋白测定的统一标〔测量方法及测量值。〔Glycatedhemoglobin,GHB〕试验通常是检测由血红蛋白和葡萄糖经缓慢过程且非酶促反响所形成的稳定局部，其合成速率与红细胞所处环境中糖的浓度成正比,积累并持续于红细胞120白水平反响过去120天内的平均血糖水平。GHB检测用于常规试验室始于二十世纪七十年月GHB检测方法主要分为两大类，一类方法基于GHB与非GHB的电荷不同，如离子交换色谱、电，每种方法各有优缺点，对临床试验室而言，尚无“最正确”方法可以选择。虽然方法不同，结果的表示不同，但在正确操作和解释的状况下，方法间可以有较好的相关性，并能为临床供给有用的信息。目前在美国进展的糖尿病掌握和并发症临床争论〔diabetescontrolandcomplicationstrial,DCCT，说明白糖尿病患者病程的进展和合并症与血糖掌握的亲热关系，及血浆葡萄糖水平与HbA1c水平间的关系。在此根底上，美国糖尿病协会〔AmericanDiabetesAssociation〕提出了糖尿病治疗的建议，指明测定HbA1c重要性，并在世界范围内被广泛应用。为了更好地应用DCCT的结果治疗糖尿病人，为临床医生供给准确的试验室数据，美国临床化学协会〔AACC〕在1993年成立分委会进展GHB测定的标准化工作，使不同试验室〔方法〕的结果可溯源至DCCT的参考结果。标准化工作由美国国家糖化血红蛋白标准化打算〔NationalGlycohemoglobinStandardizationProgram,NGSP〕指导委员会于1996工作使得美国临床试验室间GHB测定的结果有了大的变化：2000年，90%试验室以HbA1c报告糖化血红蛋白的结果，全部参与NGSP活动试验室测定结果的室间C小于5%，HbA1c结果与靶值的偏差小于0.8%。目前，美国绝大多数试验室报告的结果，均可溯源至DCCT委员会〔NCCLS〕承受了NGSP的GHB测定的标准化模式。一、NGSP试验室网络NGSP由执行委员会和试验室网络组成〔图 1。试验室网络中包括治理核心〔NETCOR，一级中心参考试验室〔CPRL，一级参考试验室〔PRL〕室SRL。治理核心〔NETCORE〕负责直接与执行委员会联系，分析全部网络监测数据并转送执行委员会审批，向合格的试验室或厂家颁发证书。一级中心参考试验室依据在DCCT工程中使用的方案[5]，使用Bio-Rex70树脂HPLC方法测定HbA1c，建立基准。虽然，承受的方法有肯定缺限〔如受Hb、变异血红蛋白的干扰，且测定速度较慢，但长期稳定性Cs﹤3%〕是NFSP考虑其作为参考方法的主要依据。一级参考试验室作为中心参考试验室的后备支持，承受一样的试验方法，并确保结果可溯源至CPRL。其他网络试验室为SRLs，可使用不同的试验方法，但必需溯源至CPRL方法。每个SRL都应得到NGSP相应的证书，并可直接参与生产厂家的校准工作。NGSP试验室网络中的各试验室都必需依据NCCLSEP5-A文件进展方法周密度评估，并每月参与用颖血样本进展的试验室间比对〔n=100〕和依据NCCLSEP9-A文件进展的偏差评估〔表。NGSP发证书和力量验证工作。二、标准化打算的应用GHB及指导常规试验室开展室间质量评价活动。可按一样程序获得相应证书，参与网络试验室比对检验的试验室可获得“水平1”证书，否2”证书。GHB标准化打算的效益，临床试验室可以通过参与力量验证活动获得，这种活动通常方法的使用，让试验室检测结果与DCCT试验结果结合起来，从而更好地效劳于临床医生和糖尿病患者。三、GHB测定方法的选择为保证明验室结果可以溯源至DCCT的结果，且在试验室具有可比性，美国糖尿病协会〔ADA〕建议只使用NGSP验证的GHB试验方法[6]，除具可比较性外，这些方法还具有较好的周密度，通常总不周密度＜5%。GHB试验的方法原理不同，各有优缺点，影响高HbF;〔不稳定GHB或pre-A1样本的保存对某些试验方法有较大的影响。四、GHB测定国际标准化1995年国际临床化学组织〔IFCC〕建立了工作组，以研发HbA1c测定的原级参考物和参考方法为目的，在其建立的试验室网络中，使用纯化的HbA1c和HbA0进展校准，并致力于建立与NGSPIFCC的HbA1c结果略低于NGSP结果。在NGSP的中心参考试验室内将建立IFCC糖化血红蛋白测定方法简述糖化血红蛋白测定〔glycosylatedhemoglobinA，GHb〕成人红细胞中的血红蛋白有Hb〔占9％9％以上HbA〔占2.％HbF〔占0.％。当HbA中的局部血红蛋白被糖基化后，其中由于HbA的β链N末端的缬氨酸分子与葡萄糖等己糖分子相结合而使其在血红蛋白电泳中成为HbA之前的快泳、HbA1组分，在离子交换柱层析中亦在HbA之前首先被洗脱，糖化Hb可分为HbA1a〔其中与1，6-二磷酸果糖结合的为HbA1a6-磷酸葡萄糖结合的为HbA1aHbA1〔包括HbA1b，HbA1bHbA1b，HbA1〔与葡萄糖结合〕和HbA1〔α链和β.链内氨基以及α链的N末端基团上的烯化血红蛋白；包括HbA1d1，HbA1d2，HbA1d3〕共九种。最重要的是HbA1c.HbA1e的生成量取决于血糖的浓度，正常人约占4％～6％。由于红细胞的半寿期是60GHb的测定可以反映测定前8周左右病人的平均血糖水平。GHb测定方法很多，两种最根本的方法是：测定HbA1组分和仅测定HbA1c.高压〔HPLC〕法可准确分别HbA1HbA1aHbA1bHbA1cHbA1dCV％，是参考方法，其次还有低压液相色谱LPL，目前二者均有高精度的自动化仪器，作为常规方法用于临床；硼酸亲和柱层析法C〔％～4.％，阳离子交换柱层析法C〔％1％，测定的血红蛋白类型为HbA1pHHbF分别Hb类型和干扰因素与阳离子交换柱层析法一样；比色法可用于自动生化仪，无血红蛋白分别步骤，干扰因素小，具特异性和敏感性，但CV较大％1％，且样品用量大，用浓度单位报告的方式还未被宽阔临床医师承受。一些医院用的糖化设备糖化血红蛋白分析系统 型号:HLC-723G7HLC-723G7是由最出品的全自动糖化血红蛋白HPLC法是HbA1c检测的金标准，得到NGSP认证。检测结果准确周密CV<1%。G7的检测速度相当快，每个测试只需1.2分钟，它的操作也相当简便，原始试管即可上机测试，无需人员看护。更精品..精品精品有急诊插入功能。日常维护全部自动进展，全部的设计确保最大程度上的解放人力。快速检测从开机到报告第一个结果，仅需3.6分钟。检测时间为1.2分钟。设计精巧该仪器体积，其长、宽、高均在50cm左右，重量仅为50Kg。操作简便标本无需前处理，只需放好样本架，轻轻一按启动键。维护简洁机器自动进展日常维护。可选性强管架上应用。功能强大具备急诊插入优先检测功能，主机查询功能，试剂量监测直观。准确周密对稳定的HbA1c进展直接测定，其CV小于1%。全自动糖化血红蛋白分析装置HS-12HS-10.性能特点：¨承受“金标准”——离子交换高效液相层析法¨最开发的非多孔离子交换HPLC——常光特有的即插式层析柱，装卸时不需要工具，使部件更换简洁易行¨全自动高速检测90秒/样本¨常光通过光感原理，开发出独特的可变稀释倍率功能，可智能地随样品浓度转变稀释倍率，大大提高了检测范围¨承受离子交换高压液相层析法，对稳定的HbA1c进展直接测定，C.V.<0.5%、共存干扰物影响微小¨形码的样本管均可检测，100¨人性化的急诊优先装置¨通过NGSP认证、日本糖尿病学会Lot2标准做GHb定标¨彩色触摸式液晶显示屏，可视报警提示，自动报告工作状况¨自动化程度高，自动感应试剂量的状况、自我诊断、自动进展日常维护等美国Bio-RadD-10糖化血红蛋白仪、美国Bio-RadDiaSTAT糖化血红蛋白仪。精品.仪器介绍：糖化血红蛋白是反映血液中葡萄糖水平的一个中长期指标尿病血糖掌握的“金标准2型及“稳性”糖尿病的早期诊断指标，尤其对于糖尿病的筛选普查具有早期提示价值。伯乐〔Bio-Rad〕监测糖化血红蛋白的产品均已经通过了美国全国糖化血红蛋白标准化工程〔NGSP〕认证，并且是NGSP〔DCCT〕不同测试量的医院临床试验室。D-10TM糖化血红蛋白检测系统使用高压液相色谱原理HPL。全血样本经受一个自动两步骤稀释过程并引导入分析流通道强度的差异，分别出血红蛋白，然后通过过滤器光度计，在415nm波特长测定吸光度。系统软件对数据校正后，产生一个样本报告和每个样本的色谱图，从而计算出HbA1c的浓度比值。精品..精品精品江苏省人民医院临床检验科也在使用这种设备。拜耳BayerDCA2000+糖化血红蛋白仪HbA1C检测“金标准”-尿微量白蛋白分析检测工程：尿微量白蛋白糖化血红蛋白HbA1C长期监控糖尿病临床试验室HbA1C对过去三个月监控糖尿病供给格外重要的指标HbA1C对总死亡率的推测价值超过胆固醇浓度、体重指数和血压临床试验室HbA1C下降135%临床试验室严格掌握血糖水平可使眼睛病变、神经病变、心血管病变和肾脏病变降低尿微量白蛋白-觉察、检测糖尿病肾病约30%的胰岛素依靠性的糖尿病患者将进展为糖尿病肾病Microalbuminuria的早期觉察将指示可能进展为肾衰的糖尿病肾病的患者的晚期进展Microalbuminuria也是冠心病和其他脉管疾病的指标牢靠的HbA1C6DCA2000+供给的准时反响导致6-12月随访HbA1C显著下降…..”7A：C的比值被用来校正尿浓度造成的差异，提高了结果的临床意义允许任何尿样的测试无比的便利诊室内即得结果，无需等待，无需不必要的再诊检测HbA1C只需1uL血，节约时间，削减患者的不适测定仪自动计算A：C比值，您可以任何时间使用任意标本小巧、轻松、移动便利出色的准确性和准确性单克隆抗体方法检测HbA1C保证了出色的准确度和周密度，避开了血球蛋白因子的干扰相关性争论显示和HPLC〔高压液相〕检测法的全都性到达99%2.6%*的变异系数〔CV〕意味着化验结果的牢靠性国家糖化血红蛋白标准化工程〔NGSP〕注册方法，美国糖尿病学会〔ADA〕**推举方法〔*正常范围内的患者的CV值，**最近的文件上的数据证明〕操作简洁只需三步：插入试剂盒、拔掉尾部、关上门全部自带试剂盒，无需试管，试剂，混合和手工操作友好的操作界面三步快速检测HbA1C长期、准确的糖尿病检测器觉察糖尿病肾病的早期指标供给马上的治疗方案产品名称：韩国i-CHROMAReader免疫荧光(糖化血红蛋白〕产品价格：80000￥规 格：免疫荧光定量法产 地：韩国具体说明通过FDA、CE、SFDA、KFDA,SKUP认证完善的POCT检测系统、多工程的检测平台CR〔含超敏CRCRHbA1c、MAU、PSA、AFP、CEA、cTnI7个工程先进的检测技术、第三代POCT产品pg/ml整体检测系统的CV<5%。超宽线性范围、工程整合的完善表达全程C-反响蛋白检测工程，同时包含hsCRP和常规CRP检测，一卡双项，一次检测同时出具两个检测结果；有效降低检测本钱。快速、准确、大批量、低本钱的检测全部检测工程均在3～15分钟内完成，仪器内的检测速度13秒/检测的要求。无隐蔽性本钱；如定标液、冲洗液等，本钱核算直接、牢靠。内置质控的模式，强大的工程扩展功能具备储存、查询、打印功能；可与LIS系统连接。Ultra2全自动糖化血红蛋白.顺德第一人民医院检验科最近引进一台美国Ultra2全自动。Ultra2全自动是美国Primus公司生产的一款全自动的基于亲和层析检测技术的，该仪器主要用于糖化血红蛋白的分别和定量分析。它主要由以下四局部组成：1、Ultra2液相系统由两个高压泵系统和可变波长检测系统组成。2、自动加样器可配置多种型号的采血管，每批最多可放置475个样品。3、该系统由电脑掌握并自动存储数据。4、基于Windows操作系统的软件供给实时的层析图，并进展系统状态监测，可通过键盘输入或扫描条形码来实现样品的识别。Ultra2运用硼酸盐亲和高效液相色谱原理(HPLC)，承受枸橼酸纳抗凝，糖化血红蛋白检验精度高，结果牢靠，变异系数(CV)小于2%，检测快速，每个测试仅需2分钟，抗干扰性强，是全国临检操作规程推举的一代的检测仪器。糖化血红蛋白(GHbGHb值反响红细胞一半寿命时〔约60天〕的血糖水平。假照实行掌握饮食、适