十一电导法测定难溶电解质的溶解度

#实验二十四血清或尿液中无机磷的测定【目的要求】掌握血清和尿液中无机磷含量测定原理及操作方法。【基本原理】人体内的无机盐以钙和磷含量最多。而血清或尿液中无机磷含量的高低与某些疾病有着密切关系。因此在临床上常用测定血清或尿液中无机磷含量，作为诊断某些疾病的重要指标。血清和尿液中无机磷的主要存在形式是H2PO；和HPOj-。测定时，以三氯醋酸沉淀蛋白，在滤液中加钼酸试剂与磷结合成磷钼酸，再用氯化亚锡使其还原为蓝色化合物。12H2MoO4+H3PO4—H3[P（Mo3O10）4]磷钼杂多酸（黄色）[P（Mo3010T3-+11H+SnCl2.（MoO2'4MoO3）2'HPO+2MoO.+4HO2 32 3 4 2 2磷钼蓝（蓝色）利用溶液的蓝色进行比色测定，根据标准溶液的浓度c和吸光度A，用直接比较法，即用Ac—测二-测Ac标标求出血清或尿液中无机磷的浓度。人体血磷的正常值：成人10〜15mmol•L-1,儿童15〜20mmol•L-1。【仪器和药品】离心机，吸量管，分光光度计，001mg・m1-1磷标准液，钼酸试剂，06mol・L-1三氯醋酸（TCA）,SnC12贮存液，SnC12应用液（溶液配制见附录）。【实验步骤】1．血样处理将血样离心沉降。取血清05ml置离心管中，加06mol・L-1[CC13COOH]（TCA）20m1,立即振荡均匀，离心沉淀蛋白，取上清液备用。2．尿液处理吸取24h混合尿液100m1,加蒸馏水900ml混匀，过滤，滤液备用。3．血清、尿液中无机磷测定按表3-24-1准确量取上述各溶液分别置于试管中，混匀，放置1min。用lcm比色皿，在波长520nm处进行比色，以空白管校正吸光度到零点，读取各管吸光度填入表中。表3-24-1

c血磷(mmol•c血磷(mmol•L-1)=Ac待测而X 标准磷（mg/ml）X1000X血清稀释倍数A标准磷c尿磷(mmol•L-1)=A待测尿A标准磷标准磷（mg/ml）X1000X尿液稀释倍数M磷【注意事项】1．血清不能溶血，采血后应尽快将血清分离出，以免血细胞内磷脂水解而使无机磷增加。2.SnC12有强腐蚀性，切莫接触皮肤。加入SnC12溶液时应随加随摇，马上混匀，否则变混。SnC12溶液很不稳定，如果生成的钼蓝为绿色，即不能再用。且标准管与待测管加SnC12溶液的相隔时间不应过长。【附注】.钼酸试剂的配制钼酸不稳定，常用其钠盐与硫酸反应。将75%钼酸钠与5mol•L-1H2s04等体积混合即可。.磷标准溶液0.01mg•ml-1的配制将KH2PO4（分析纯）置110c烘烤2h,放于干燥器内冷却。准确称取004390g，溶解，加氯仿2ml防腐，加水稀释至1000m1。贮于冰箱中。.SnCl2试剂的配制SnCl2贮存液（SnCl2溶液极不稳定，故需配成贮存液）：称取SnCl210g，加25ml浓盐酸置棕色瓶中，溶解后再加数片锡箔，密闭，在4℃冰箱中保存。8周内有效。SnCl2应用液：取SnCl2贮存液05m1,加蒸馏水稀释至100m1,混匀。室温20℃以上可供当日使用，30℃以上时，仅供半天使用。若应用液于磷试剂生成的磷钼蓝颜色呈蓝绿色或绿色时，则不能再使用。此