长裙竹荪菌盖和菌根气味成分索氏提取气质联用

摘要 本文对长裙竹荪菌根和菌盖的气味成分进行了提取与分析。分别使用乙醚、正己烷和二氯甲烷，运用索氏提取法对气味成分进行提取；利用气质联用仪对气味成分进行了分析。结果表明：（1）从长裙竹荪菌盖中共提取出74种挥发性物质，其中主要的挥发性成分有十四烷、己二酸二异辛酯、苯乙醇、双酚烯等；（2）从长裙竹荪菌根中共提取出83种挥发性物质，其中主要的挥发性成分有己二酸二（2-乙基己基）酯、十二烷、丁基化羟基甲苯、二（2-乙基己基）酯等。关键词：长裙竹荪；菌盖和菌根；气味成分；索氏提取；气质联用AbstractDictyophoraInthispaper,theodorcomponentsofmycorrhizaandcapofDictyophoralongissimawereextractedandanalyzed.Ether,n-hexaneanddichloromethanewereusedtoextracttheodorcomponentsbySoxhletextraction,andGC-MSwasusedtoanalyzetheodorcomponents.Theresultsshowedthat:(1)74kindsofvolatilecompoundswereextractedfromthecapofDictyophoralongissima,includingtetradecane,Diisooctyladipate,phenylethanolandbisphenolene;(2)83kindsofvolatilecompoundswereextractedfromthemycorrhizaofDictyophoralongissima,includingdi(2-ethylhexyl)adipate,dodecaneandbutylatedhydroxytoluene,bis(2-ethylhexyl)ester,etc.Keywords:Dictyophoralongissima;mycorrhizaandcap;odorcomponents;Soxhletextraction;GC-MS目录TOC\o"1-3"\h\u1引言 引言竹荪Dictyophoraindusiata，俗称竹君、仙人笠、僧竹蕈、雪裙仙子、竹姑娘等，隶属真菌门、腹菌纲、鬼笔目、鬼笔科、竹荪属，多产于高温高湿地区，是一类名贵的大型食用菌。纵观历史，竹荪在餐桌上一直扮演着相当重要的角色，曾为“宫廷贡品”，也是近代的国宴名菜，如今成为医学上的新秀，亦是食疗佳品。现阶段已知共12个种，栽培地主要分布在中国、印度、非洲、北美、南美、斯里兰卡、澳大利亚及东西印度群岛。我国竹荪有7种：长裙竹荪、短裙竹荪、棘托竹荪、红托竹荪、黄裙竹荪、朱红竹荪和皱盖竹荪。福建南平境内雨量充沛，溪河纵横，拥有得天独厚的地理环境，长裙竹荪产量颇高，而长裙竹荪不仅味道异常鲜美，更是物稀为贵，且在国际市场上享有极高的声誉，因此本文选用福建南平的长裙竹荪进行研究。当前，国内外对长裙竹荪的研究主要囊括多肽抗氧化及免疫强化作用[1]、抗菌剂的研究[2,3,4]、固体发酵产物的化学成分与免疫活性研究[5]、多糖成分的提取与生物活性研究[6]及生产方式和药食两用价值[7，8]等方面，对长裙竹荪挥发性成分的研究相对匮乏，郑炯[9]等人采用顶空-固相微萃取-气质联用法对长裙竹荪蛋的挥发性成分进行了分析，共鉴定出包括α-恰米烯、α-柏木烯、α-布藜烯、α-红没药烯、β-雪松烯、β-广藿香烯、β-花柏烯、γ-伊兰油烯、5-异长叶烯酮等在内的65种挥发性物质；陈曦[10]等则以二氯甲烷为溶剂，采用同时蒸馏和气相色谱-质谱联用技术，对长裙竹荪子实体干品的挥发性成分进行了分析，共鉴定出了包括苯乙醛、呋喃甲醛、亚油酸、2-乙酰基呋喃、β-绿叶烯等在内的70种化合物。然而，对长裙竹荪菌盖和菌根的挥发性成分尚未分析。林陈强[11]等人采用国标法对棘托竹荪菌盖的营养成分和氨基酸组成进行分析，发现其菌盖的氨基酸总量、必需氨基酸含量分别是31.34％和12.95％，均为竹荪菌体的2倍，证明竹荪的菌盖部分有较高的营养价值，在蛋白相关产品中具有不容忽视的开发潜力和较为广阔的市场前景，且竹荪的特殊气味主要集中在菌盖和菌根部分。因此，本实验以正己烷、二氯甲烷和乙醚为萃取剂，采用索氏提取法结合气相色谱-质谱联用（gaschromatography-massspectrometry，GC-MS）技术对长裙竹荪的菌盖和菌根干品的挥发性成分进行分析，以加深对长裙竹荪菌盖和菌根气味成分的认识，并为香料界的研究开发和长裙竹荪的进一步研究开发建立一定的实验结构。2材料与方法2.1实验材料2.1.1材料与试剂材料：长裙竹荪的菌盖和菌根，采自福省建南平市，自制成干品备用；试剂：正己烷（色谱纯≥95%），乙醚（色谱纯99.9%），二氯甲烷（色谱纯99.9%）。2.1.2主要仪器N-1100型旋转蒸发仪，上海爱朗仪器有限公司；GC×GCHRT4Dplus型全二维气相-高分辨质谱，美国LECO公司；800A型多功能粉碎机，永康市红太阳机电有限公司；PK-8D型电热恒温水槽，上海精宏仪器实验设备有限公司；JK250ML型索氏提取器北京精凯达仪器有限公司。

2.2实验方法2.2.1长裙竹荪菌盖和菌根挥发油的提取（1）提取：采用索氏抽提法，具体如下：正己烷提取物——68℃沸点正己烷，抽提温度80-90℃，抽提时间约3h；乙醚提取物——35℃沸点乙醚，抽提温度45-60℃，抽提时间约3h；二氯甲烷提取物——39.75℃沸点二氯甲烷，抽提温度45-60℃，抽提时间约3h。（2）浓缩：采用常压蒸馏。2.2.2气相色谱—质谱（GC-MS）法分析挥发油的化学成分GC×GCHRT4Dplus型全二维气相-高分辨质谱仪对挥发油各化合物进行分离和结构分析，色谱柱为Rxi-5MS30m×0.25mm×0.25um弹性石英毛细柱；进样口温度250℃；传输线温度280℃；流量：1.4ml/min；载气：氦气；采用程序升温：50℃保持1min，以5℃/min升至150℃，保持6min，以5℃/升至250℃，保持15min；分流比20:1。质谱条件电子轰击（EI）离子源；电子能量70EV；溶剂延迟时间6min；分子量范围35～550amu；进样量1.0ul。3结果与讨论3.1长裙竹荪菌盖和菌根挥发油的提取竹荪的特殊气味主要集中在菌盖和菌根部位，在“相似相溶”原理下，极性溶剂能够溶解离子化合物和能离解的共价化合物，非极性溶剂则只能够溶解非极性的共价化合物，弱极性溶剂则能溶解弱极性的酯类等，因此本实验分别采用弱极性的乙醚、非极性的正己烷和极性的二氯甲烷对竹荪菌盖和菌根部分分别进行萃取。3.2长裙竹荪菌盖气味成分的分析3.2.1长裙竹荪菌盖正己烷提取物的成分分析图3-1为长裙竹荪菌盖正己烷提取物的GC-MS分析总离子流图，表3-1为长裙竹荪菌盖正己烷提取物的化学成分鉴定表。从表3-1可以看出，以正己烷为溶剂，通过Rxi-5MS弹性石英毛细柱中等极性柱进行GC-MS检测长裙竹荪菌盖中挥发性成分，共计鉴定出52种挥发性成分，其中酮类3个、醇类3个、酯类3个、酸类1个、杂环化合物10个、烃类28个、其他类5个(包括10-乙酰-1-癸、叔丁基（2-甲基丁基）异丙氧硼烷等)。在鉴定出的成分中含量较大的成分有十四烷（15.665%）、己二酸二异辛酯（13.677%）、苯乙醇（8.843%）、十一烷（7.377%）、十九烷（4.281%）等。图3-SEQ图3-\*ARABIC1长裙竹荪菌盖正己烷提取物挥发性成分GC-MS分析总离子流图表3-SEQ表3-\*ARABIC1长裙竹荪菌盖正己烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式双环[2.2.1]庚-2-烯-7-酮，5，6-双（亚甲基）-Bicyclo[2.2.1]hept-2-en-7-one,5,6-bis(methylene)-331.352.333C9H8O呋喃酮，二氢-4，5，5-三甲基-3(2H)-Furanone,dihydro-4,5,5-trimethyl-3(2H)-339.7920.695C7H12O2异丙苯-Benzene,(1-methylethyl)-430.5120.33C9H12偏三甲苯-Benzene,1,2,4-trimethyl-478.4760.397C9H1210-乙酰-1-癸9-Decen-1-ol,acetate9-576.990.135C12H22O2十一烷Undecane650.2567.377C11H24(1S)-4-(1,3-Dithian-2-yl)-3-methoxy-2-butanone(1S)-4-(1，3-二噻-2-基）-3-甲氧基-2-丁酮659.3180.043C9H16O2S2苯乙醇Benzeneethanol672.7688.843C8H10O（2，2-二氯乙基）四氢呋喃-Furan,2-(2,2-dichloroethyl)tetrahydro-2-695.9520.211C6H10Cl2O4-乙烯基-1,2-二甲基苯Benzene,4-ethenyl-1,2-dimethyl-717.3320.121C10H12十甲基环五硅氧烷Cyclopentasiloxane,decamethyl-744.420.215C10H30O5Si51-溴丙基苯1-Bromo-1-phenylpropane1-753.4080.094C9H11Br仲丁基-4-甲苯1-SEC-BUTYL-4-METHYLBENZENE1776.6640.054C11H16萘Naphthalene792.0480.511C10H8烯丙基-1，3-二甲苯2-Allyl-1,3-dimethylbenzene2798.2640.122C11H145-异丙基间二甲苯Benzene,1,3-dimethyl-5-(1-methylethyl)-815.9040.218C11H16十四烷Tetradecane816.91215.665C14H30乙基-1,2,4-三甲基苯Benzene,ethyl-1,2,4-trimethyl-819.0120.046C11H164,6-二甲基十一烷Undecane,4,6-dimethyl-840.0120.846C13H282-甲基四氢萘林Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-2-methyl-844.80.142C11H14续表3-SEQ表3-\*ARABIC1长裙竹荪菌盖正己烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式2,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇2,6-Octadien-1-ol,2,7-dimethyl-886.2121.354C10H18O2,3-二氢-4,7-二甲基-1H-茚1H-Indene,2,3-dihydro-4,7-dimethyl-1H-900.7440.167C11H146-甲基四氢化萘Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-926.1960.486C11H142，3，7-三甲基辛烷Octane,2,3,7-trimethyl-935.8970.493C11H242-甲基萘Naphthalene,2-methyl-972.2280.405C11H101,4-二甲基-1,2,3,4-四氢萘Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-1,4-dimethyl-1011.180.382C12H16十二甲基环六硅氧烷Cyclohexasiloxane,dodecamethyl-1025.90.236C12H36O6Si6叔丁基（2-甲基丁基）异丙氧硼烷tert-butyl(2-methylbutyl)isopropoxyborane1058.920.229C12H27BO二乙二醇单乙基醚醋酸酯Ethanol,2-(2-ethoxyethoxy)-,acetate1084.370.095C8H16O41，2，4-三甲氧基苯1,2,4-Trimethoxybenzene1093.271.532C9H12O32,6,10-三甲基十二烷Dodecane,2,6,10-trimethyl-1099.150.528C15H321，2，3，4-四氢-6，7-二甲基萘-Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimethyl-1126.790.369C12H164,7-二甲基十一烷Undecane,4,7-dimethyl-1227.760.885C13H282，3-二氢1H-环戊二烯1H-Cyclopent[e]azulene,2,3-dihydro-1264.140.046C13H12十九烷Nonadecane1283.284.281C19H403-异丙氧基-1，1，1，7，7，7-六甲基-3，5，5-三（三甲基硅氧基）四硅氧烷3-Isopropoxy-1,1,1,7,7,7-hexamethyl-3,5,5-tris(trimethylsiloxy)tetrasiloxane1286.390.258C18H52O7Si74-氯-2-甲氧基苄醇4-Chloro-2-methoxybenzylalcohol1294.370.318C8H9ClO2续表3-SEQ表3-\*ARABIC1长裙竹荪菌盖正己烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式N-（1，1-二甲基乙基）-N'，对-二（1-甲基乙基）-膦酸二酰胺-Phosphonicdiamide,N-(1,1-dimethylethyl)-N',P-bis(1-methylethyl)-1308.10.031C10H25N2OP1，2，3，4-四甲氧基苯1,2,3,4-Tetramethoxybenzene1336.370.754C10H14O41,2,3-三甲氧基-4-氯苯1,2,3-trimethoxy-4-chlorobenzene1363.840.424C9H11ClO31-氯-2-（二甲氧基甲基）苯1-CHLORO-2-(DIMETHOXYMETHYL)BENZENE1441.450.449C9H11ClO2十六烷Hexadecane1465.812.709C16H34环己基硅氧烷，十六烷Cyclooctasiloxane,hexadecamethyl-1651.790.321C16H48O8Si82-环己烯-1-酮，2-丙基-2-Cyclohexen-1-one,2-propyl-1935.320.018C9H14O1，3，3，3-四甲基二硅氧烷基三（三甲基硅基）原硅酸酯1,3,3,3-TETRAMETHYLDISILOXANYLTRIS(TRIMETHYLSILYL)ORTHOSILICATE1988.960.165C13H40O5Si61邻苯二甲酸丁基酯2-乙基己基酯,2-Benzenedicarboxylicacid,butyl2-ethylhexylester2043.310.067C20H30O43，7-二甲基癸烷-Decane,3,7-dimethyl-2093.632.042C12H26棕榈酸n-Hexadecanoicacid2180.990.796C16H32O22,6,10,14-四甲基十七烷Heptadecane,2,6,10,14-tetramethyl-2235.842.067C21H44十二烷Dodecane2478.011.346C12H261-十九碳烯1-Nonadecene2572.61.814C19H38己二酸二异辛酯Hexanedioicacid,bis(2-ethylhexyl)ester2687.3413.677C22H42O43.2.2长裙竹荪菌盖乙醚提取物的成分分析图3-2为长裙竹荪菌盖乙醚提取物的GC-MS分析总离子流图，表3-2为长裙竹荪菌盖正己烷提取物的化学成分鉴定表。从表3-2可以看出，以乙醚为溶剂，通过Rxi-5MS弹性石英毛细柱中等极性柱进行GC-MS检测长裙竹荪菌盖中挥发性成分，共计鉴定出40种挥发性成分，其中醛类2个、醇类7个、酯类5个、酸类1个、杂环化合物15个、烃类8个、其他类3个(包括3-甲基-1-(2-丙烯氧基）丁烷等)。在鉴定出的成分中含量较大的成分有苯乙醇（13.889%）、己二酸双（2-乙基己基）酯（9.982%）、1-壬烯（2.522%）等。图3-SEQ图3-\*ARABIC2长裙竹荪菌盖乙醚提取物挥发性成分GC-MS分析总离子流图表3-SEQ表3-\*ARABIC2长裙竹荪菌盖乙醚提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式2-甲基-2H-四唑-2H-Tetrazole,2-methyl-419.8440.156C2H4N4苯酚Phenol458.7360.276C6H6O3-甲基-1-(2-丙烯氧基）丁烷-Butane,3-methyl-1-(2-propenyloxy)-472.260.346C8H16O八甲基环四硅氧烷-Cyclotetrasiloxane,octamethyl-484.7760.312C8H24O4Si4苯甲醇Benzylalcohol542.2321.901C7H8O续表3-SEQ表3-\*ARABIC2长裙竹荪菌盖乙醚提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式1，3，5-三嗪，六氢-1，3-二硝基-5-亚硝基-1,3,5-Triazine,hexahydro-1,3-dinitro-5-nitroso-670.1640.067C3H6N6O5苯乙醇Benzeneethanol673.52413.889C8H10O十甲基环五硅氧烷-Cyclopentasiloxane,decamethyl-744.5041.381C10H30O5Si54-甲氧基苯酚Mequinol847.0680.564C7H8O22,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇2,6-Octadien-1-ol,2,7-dimethyl-886.381.409C10H18O4-甲氧基苄醇-Benzenemethanol,4-methoxy-953.660.12C8H10O2反,反-2,4-癸二烯醛2,4-Decadienal,(E,E)-970.2120.294C10H16O哌啶醇Pipradrol1001.630.428C18H21NO3-丙-2-烯基环己烯-Cyclohexene,3-(2-propenyl)-1006.080.367C9H14三十五烷Pentatriacontane1021.450.132C35H72十二甲基环六硅氧烷-Cyclohexasiloxane,dodecamethyl-1026.161.171C12H36O6Si62-氯-1，4-二甲氧基苯-Benzene,2-chloro-1,4-dimethoxy-1059.050.049C8H9ClO21，2，4-三甲氧基苯1,2,4-Trimethoxybenzene1093.361.829C9H12O35-氯-2-甲氧基-苯酚5-Chloro-guaiacol1185.360.067C7H7ClO24-氯-3-甲氧基苯甲醛4-Chloro-3-methoxybenzaldehyde1207.180.607C8H7ClO22,6-二叔丁基苯醌-2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione,2,6-bis(1,1-dimethylethyl)-1239.180.119C14H20O2丁基化羟基甲苯ButylatedHydroxytoluene1244.220.538C15H24O2-（3-丁烯基）-3-(3-苯基丙基）-环氧乙烷，顺式-Oxirane,2-(3-butenyl)-3-(3-phenylpropyl)-,cis-1260.70.104C15H20O续表3-SEQ表3-\*ARABIC2长裙竹荪菌盖乙醚提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式1-异丙氧基-3，3，3-三甲基-1-[（三甲基甲硅烷基）氧基]二硅氧烷基三（三甲基甲硅烷基）原硅酸酯1-ISOPROPOXY-3,3,3-TRIMETHYL-1-[(TRIMETHYLSILYL)OXY]DISILOXANYLTRIS(TRIMETHYLSILYL)ORTHOSILICATE1286.470.632C18H52O7Si74-氯-2-甲氧基苯甲醇4-Chloro-2-methoxybenzylalcohol1293.861.655C8H9ClO21-氯-2，3，4-三甲氧基苯-Benzene,1-chloro-2,3,4-trimethoxy-1314.280.075C9H11ClO31，2，3，4-四甲氧基苯1,2,3,4-Tetramethoxybenzene1336.460.297C10H14O41-氯-2-（二甲氧基甲基）苯1-CHLORO-2-(DIMETHOXYMETHYL)BENZENE1441.371.398C9H11ClO2十六甲基环辛硅氧烷-Cyclooctasiloxane,hexadecamethyl-1652.210.416C16H48O8Si81，1，1，5，7，7，7-七甲基-3，3-双（三甲基硅氧基）四硅氧烷1,1,1,5,7,7,7-Heptamethyl-3,3-bis(trimethylsiloxy)tetrasiloxane1988.80.162C13H40O5Si61，2-苯二甲酸丁酯2-乙基己酯1,2-Benzenedicarboxylicacid,butyl2-ethylhexylester2043.40.064C20H30O41-十六烷醇1-Hexadecanol2061.710.619C16H34O正十六酸n-Hexadecanoicacid2181.161.107C16H32O2邻苯二甲酸二丁酯Dibutylphthalate2184.520.142C16H22O41-十九碳烯1-Nonadecene2342.352.522C19H38二十六醇1-hexacosanol2462.390.908C26H54O己二酸双（2-乙基己基）酯Hexanedioicacid,bis(2-ethylhexyl)ester2687.429.982C22H42O4邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯Mono(2-ethylhexyl)phthalate2830.220.321C16H22O4续表3-SEQ表3-\*ARABIC2长裙竹荪菌盖乙醚提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式(2RS，4Sr)-2-乙氧基-3，4-二氢-4-{2-[(2-甲氧基乙氧基）甲氧基]乙基}-2H-吡喃-5-羧酸甲酯methyl(2RS,4SR)-2-ethoxy-3,4-dihydro-4-{2-[(2-methoxyethoxy)methoxy]ethyl}-2H-pyran-5-carboxylate3098.380.032C15H26O73,5-环麦角甾烷-6,8(14),22-三烯3α,5-Cyclo-5α-ergosta-6,8(14).22t-triene3231.320.846C28H423.2.3长裙竹荪菌盖二氯甲烷提取物的成分分析图3-3为长裙竹荪菌盖二氯甲烷提取物的GC-MS分析总离子流图，表3-3为长裙竹荪菌盖二氯甲烷提取物的化学成分鉴定表。从表3-1可以看出，以二氯甲烷为溶剂，通过Rxi-5MS弹性石英毛细柱中等极性柱进行GC-MS检测长裙竹荪菌盖中挥发性成分，共计鉴定出54种挥发性成分，其中醛类2个、酮类1个、醇类8个、酚类3个、酯类6个、酸类1个、烃类9个、杂环化合物19个、其他类6个(包括1-丁烯-3-炔，1-氯-等)。在鉴定出的成分中含量较大的成分有苯乙醇（21.413%）、双酚烯（16.087%）、己二酸双（2-乙基己基）酯（6.512%）、2-（2-氯苯基）-2-甲氧基乙胺（6.079%）、-亚甲基-2-苯乙胺（5.148%）、4-氯-2-甲氧基苄基（3.259%）等。图3-SEQ图3-\*ARABIC3长裙竹荪菌盖二氯甲烷提取物挥发性成分GC-MS分析总离子流图表3-SEQ表3-\*ARABIC3长裙竹荪菌盖二氯甲烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式二氯乙醛Dichloroacetaldehyde251.9280.029C2H2Cl2O1-丁烯-3-炔，1-氯-(Z)-1-Buten-3-yne,1-chloro-,(Z)-258.8160.044C4H3Cl(1′R，2S)-2-(2′，3′-二氢-1′-羟基-3′-氧代-1′H-异吲哚-2′-基）-3-甲基-3-丁烯酸甲酯Methyl(1'R,2S)-2-(2',3'-dihydro-1'-hydroxy-3'-oxo-1'H-isoindol-2'-yl)-3-methyl-3-butenoate275.4480.038C14H15NO4(+)-(1S，2S)-(2-苯基环丙基）甲醇(+)-(1s,2s)-(2-phenylcyclopropyl)methanol289.980.036C10H12O1，2，5-噻二唑烷-2，5-二羧酸，3-乙烯基-4-[[（苯基甲基）硫代]甲基]-二甲酯，反式-1,2,5-Thiadiazolidine-2,5-dicarboxylicacid,3-ethenyl-4-[[(phenylmethyl)thio]methyl]-,dimethylester,trans-(.+-.)-340.0440.085C16H20N2O4S2四氢-2，5-二甲基-呋喃-Furan,tetrahydro-2,5-dimethyl-,cis-419.5920.537C6H12O氯氟甲烷-Methane,chlorofluoro-457.1310.042CH2ClF苯乙醇Benzenemethanol543.072.734C7H8O十一烷Undecane650.9281.912C11H24N-（2-苯乙基）甲胺N-Methylene-2-phenylethanamine669.8285.148C9H11N苯乙醇PhenylethylAlcohol674.11221.413C8H10O十甲基环五硅氧烷-Cyclopentasiloxane,decamethyl-744.9240.435C10H30O5Si51，2，3，4-四氢萘-Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-756.4320.422C10H12甲喹啉Mequinol847.0681.271C7H8O22，6-辛二烯-1-醇，2，7-二甲基-2,6-Octadien-1-ol,2,7-dimethyl-886.6322.894C10H18O十六烷，2，6，10，15-四甲基-Heptadecane,2,6,10,15-tetramethyl-948.3720.149C21H444-甲氧基苯乙醇-Benzenemethanol,4-methoxy-953.8150.187C8H10O2

续表3-SEQ表3-\*ARABIC3长裙竹荪菌盖二氯甲烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式十二甲基环六硅氧烷-Cyclohexasiloxane,dodecamethyl-1026.241.431C12H36O6Si62-氯-1，4-二甲氧基苯-Benzene,2-chloro-1,4-dimethoxy-1059.130.035C8H9ClO21，2，4-三甲氧基苯1,2,4-Trimethoxybenzene1093.31.878C9H12O3苯乙酰胺Benzeneacetamide1124.940.317C8H9NO5-氯愈创木酚5-Chloro-guaiacol1184.830.165C7H7ClO24-氯-3-甲氧基苯甲醛4-Chloro-3-methoxybenzaldehyde1207.180.359C8H7ClO22-甲基-N-苯基-2-丙烯酰胺-2-Propenamide,2-methyl-N-phenyl-1240.510.115C10H11NON-(2-苯基乙基）甲酰胺-Formamide,N-(2-phenylethyl)-1259.760.383C9H11NO十四甲基环庚硅氧烷-Cycloheptasiloxane,tetradecamethyl-1286.391.2C14H42O7Si74-氯-2-甲氧基苯甲醇4-Chloro-2-methoxybenzylalcohol1293.873.259C8H9ClO2N-(2-苯基乙基）乙酰胺-Acetamide,N-(2-phenylethyl)-1300.750.253C10H13NO2，4，6-三（1，1-二甲基乙基）-4-甲基环己-2，5-二烯-1-酮2,4,6-Tris(1,1-dimethylethyl)-4-methylcyclohexa-2,5-dien-1-one1307.890.033C19H32O1-氯-2，3，4-三甲氧基苯-Benzene,1-chloro-2,3,4-trimethoxy-1313.690.055C9H11ClO31，2，3，4-四甲氧基苯1,2,3,4-Tetramethoxybenzene1336.540.907C10H14O42-（2-氯苯基）-2-甲氧基乙胺2-(2-Chlorophenyl)-2-methoxy-ethylamine1407.946.079C9H12ClNO1-氯-2-（二甲氧基甲基）苯1-CHLORO-2-(DIMETHOXYMETHYL)BENZENE1440.952.485C9H11ClO2续表3-SEQ表3-\*ARABIC3长裙竹荪菌盖二氯甲烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式1，3，5-三嗪-2，4，6(1H，3H，5H)-三酮，1，3，5-三-2-丙烯基-1,3,5-Triazine-2,4,6(1H,3H,5H)-trione,1,3,5-tri-2-propenyl-1643.730.077C12H15N3O3十六甲基环辛硅氧烷-Cyclooctasiloxane,hexadecamethyl-1651.870.801C16H48O8Si89H-芴，9-亚甲基-9H-Fluorene,9-methylene-1872.710.023C14H10庚硅氧烷，1，1，3，3，5，5，7，7，9，9，11，11，13，13-十四甲基-Heptasiloxane,1,1,3,3,5,5,7,7,9,9,11,11,13,13-tetradecamethyl-1988.710.451C14H44O6Si71，2-苯二甲酸丁酯2-乙基己酯1,2-Benzenedicarboxylicacid,butyl2-ethylhexylester2043.310.081C20H30O44-乙烯基苯酚p-hydroxystyrene2052.050.05C8H8O1-十六醇1-Hexadecanol2061.620.899C16H34O对叔辛基间苯二酚p-tert-Octylresorcinol2095.340.049C14H22O2正十六酸n-Hexadecanoicacid2181.412.125C16H32O2邻苯二甲酸二丁酯Dibutylphthalate2184.350.234C16H22O41,1,3,3,5,5,7,7,9,9,11,11,13,13,15,15-十六甲基八硅氧烷-Octasiloxane,1,1,3,3,5,5,7,7,9,9,11,11,13,13,15,15-hexadecamethyl2220.640.369C16H50O7Si81，4-环氧蒽，1，2，3，4-四氢-2，3-双（亚甲基）-1,4-Epoxyanthracene,1,2,3,4-tetrahydro-2,3-bis(methylene)-2280.590.037C16H12O芘PYRENE2303.980.016C16H101-壬烯1-Nonadecene2342.182.749C19H38十一酰胺Undecanamide2453.020.035C11H23NO1-甲基-2-壬基-1-丙烷-2-基环丙烷-Cyclopropane,1-methyl-1-(1-methylethyl)-2-nonyl-2676.760.343C16H32己二酸双（2-乙基己基）酯Hexanedioicacid,bis(2-ethylhexyl)ester2687.346.512C22H42O4续表3-SEQ表3-\*ARABIC3长裙竹荪菌盖二氯甲烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式双二甲胺基乙基醚Bis(2-(Dimethylamino)ethyl)ether2740.360.098C8H20N2O麦角-5，7，9（11），22-四烯-3-醇-Ergosta-5,7,9(11),22-tetraen-3-ol,(3β,22E)-2774.690.321C28H42O邻苯二甲酸二仲辛酯1,2-Benzenedicarboxylicacid,bis(1-methylheptyl)ester2830.060.123C24H38O4双酚烯β-Bisabolene2949.6716.087C15H243.3长裙竹荪菌根气味成分的分析3.3.1长裙竹荪菌根正己烷提取物的成分分析图3-4为长裙竹荪菌根正己烷提取物的GC-MS分析总离子流图，表3-4为长裙竹荪菌根正己烷提取物的化学成分鉴定表。从表3-4可以看出，以正己烷为溶剂，通过Rxi-5MS弹性石英毛细柱中等极性柱进行GC-MS检测长裙竹荪菌根中挥发性成分，共计鉴定出52种挥发性成分，其中酮类2个、醇类4个、酯类4个、酸类1个、杂环化合物9个、烃类31个、其他类2个(包括二己硫等)。在鉴定出的成分中含量较大的成分有己二酸二（2-乙基己基）酯（31.607%）、十二烷（15.919%）、十一烷（5.881%）、十三烷（3.379%）、十六烷（3.319%）、十四烷（3.23%）等。图3-SEQ图3-\*ARABIC4长裙竹荪菌根正己烷提取物挥发性成分GC-MS分析总离子流图表3-SEQ表3-\*ARABIC4长裙竹荪菌根正己烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式二己硫Disulfide340.4642.318C12H26S2三甲苯x-ethyl-x-methyl-benzene476.9640.326C9H124-甲基十一烷-Undecane,4-methyl-486.2041.537C12H26硫丹，2-甲基-2-(4-甲基-3-环己烯-1-基)Thiirane,2-methyl-2-(4-methyl-3-cyclohexen-1-yl)-534.3360.173C10H16S2-莰烯-BICYCLO[2.2.1]HEPT-2-ENE,1,7,7-TRIMETHYL-534.5040.109C10H161H-吡咯里嗪-1-酮1H-Pyrrolizin-1-one583.1420.082C7H5NO7，7-二甲基-四环[(2，4）.0（3，3）]庚烷7,7-dimethyl-tetracyclo[(2,4).0(3,3)]heptane595.9010.077C9H12正十一烷Undecane650.2565.881C11H24苯乙醇Benzeneethanol673.6080.781C8H10O1，4-二环戊基丁烷-Butane,1,4-dicyclopentyl-695.7840.335C14H264-乙烯基-1，2-二甲基苯-Benzene,4-ethenyl-1,2-dimethyl-717.370.102C10H12甲基茚满-1H-Indene,2,3-dihydromethyl-735.6840.127C10H12三螺[.2.1]癸烷Trispiro[.2.1]decane739.3750.069C10H14十甲基环五硅氧烷-Cyclopentasiloxane,decamethyl-744.5040.371C10H30O5Si53-甲基苯甲酸苯甲酸酯Benzoicacid,3-methyl-,2-oxo-2-phenylethylester753.5760.057C16H14O31，2，3，4-四氢萘-Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-755.7070.124C10H12萘Naphthalene792.2160.429C10H8α-松油醇α-Terpineol804.1710.776C10H18O十二烷Dodecane816.99615.919C12H26叔丁基甲苯-Benzene,(1,1-dimethylethyl)methyl-835.1530.05C11H162，6-二甲基十一烷-Undecane,2,6-dimethyl-840.0120.923C13H28续表3-SEQ表3-\*ARABIC4长裙竹荪菌根正己烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式2-甲基四氢萘林-Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-2-methyl-844.80.113C11H149-氧杂双环[6.1.0]壬烷，1-甲基-，顺式-9-Oxabicyclo[6.1.0]nonane,1-methyl-,cis-886.2120.491C9H16O2,3-二氢-4,7-二甲基-1H-茚-1H-Indene,2,3-dihydro-4,7-dimethyl-900.7650.095C11H14苯基-2-戊酮-2-Pentanone,1-phenyl-902.8440.175C11H14O6-甲基四氢化萘-Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-926.30.213C11H142，3，7-三甲基辛烷-Octane,2,3,7-trimethyl-935.8360.409C11H242-辛酮2-Octanone969.7080.227C8H16O1H-茚，1-亚乙基-1H-Indene,1-ethylidene-972.2280.427C11H10十三烷Tridecane979.4523.379C13H281-甲基萘-Naphthalene,1-methyl-999.360.141C11H101,4-二甲基-1,2,3,4-四氢萘-Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-1,4-dimethyl-1011.290.443C12H16十二甲基环六硅氧烷-Cyclohexasiloxane,dodecamethyl-1025.480.187C12H36O6Si61，2，4-三甲氧基苯1,2,4-Trimethoxybenzene1092.770.06C9H12O31，2，3，4-四氢-5，6-二甲基萘-Naphthalene,1,2,3,4-tetrahydro-5,6-dimethyl-1126.620.328C12H16十四烷Tetradecane1134.773.23C14H301-（甲氧基甲基）-4-甲基萘-Naphthalene,1-(methoxymethyl)-4-methyl-1143.760.052C13H14O3-亚甲基-2-戊醇-2-Pentanol,3-methylene-1227.920.63C6H12O2，3-二氢1H-环戊二烯-1H-Cyclopent[e]azulene,2,3-dihydro-1264.180.033C13H12十六烷Hexadecane1283.283.319C16H343-异丙氧基-1，1，1，7，7，7-六甲基-3，5，5-三（三甲基硅氧基）四硅氧烷3-Isopropoxy-1,1,1,7,7,7-hexamethyl-3,5,5-tris(trimethylsiloxy)tetrasiloxane1286.140.153C18H52O7Si7洋芹腦Apiol1680.630.037C12H14O4续表3-SEQ表3-\*ARABIC4长裙竹荪菌根正己烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式十五烷Pentadecane1927.311.91C15H32邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯1,2-Benzenedicarboxylicacid,bis(2-methoxyethyl)ester2043.231.036C14H18O62-乙酰基-2-甲基四氢呋喃2-Acetyl-2-methyltetrahydrofuran2048.350.035C7H12O2十九烷Nonadecane2093.711.546C19H40棕榈酸-n-Hexadecanoicacid2181.160.351C16H32O2十七烷Heptadecane2362.511.697C17H36庚烷Heptacosane2585.451.666C27H56己二酸二异辛酯Hexanedioicacid,bis(2-ethylhexyl)esterHexanedioicacid,bis(2-ethylhexyl)ester2687.4231.607C22H42O4邻苯二甲酸单-正-庚酯2-(Heptyloxycarbonyl)benzoicacid2-(Heptyloxycarbonyl)benzoicacid2830.220.222C15H20O4脱水甘油固醇Ergosta-5,7,9(11),22-tetraen-3-ol,(3β,22E)-Ergosta-5,7,9(11),22-tetraen-3-ol,(3β,22E)-3425.060.125C28H42O3.3.2长裙竹荪菌根乙醚提取物的成分分析图3-5为长裙竹荪菌根乙醚提取物的GC-MS分析总离子流图，表3-5为长裙竹荪菌根乙醚提取物的化学成分鉴定表。从表3-1可以看出，以乙醚为溶剂，通过Rxi-5MS弹性石英毛细柱中等极性柱进行GC-MS检测长裙竹荪菌根中挥发性成分，共计鉴定出19种挥发性成分，其中醛类1个、酮类1个、醇类3个、酯类5个、酸类1个、酚类1个、杂环化合物4个、烃类2个、其他类2个(包括3-甲基-1-(2-丙烯氧基）丁烷、丙醛-2-丙烯酰腙等)。在鉴定出的成分中含量较大的成分有丁基化羟基甲苯（48.604%）、己二酸二异辛酯（38.36%）、苯乙醇（4.155%）等。图3-SEQ图3-\*ARABIC5长裙竹荪菌根乙醚提取物挥发性成分GC-MS分析总离子流图表3-SEQ表3-\*ARABIC5长裙竹荪菌根乙醚提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式7-氧杂双环[2.2.1]庚-2，5-二烯7-oxabicyclo[2.2.1]hepta-2,5-diene457.3920.544C6H6O3-甲基-1-(2-丙烯氧基）丁烷-Butane,3-methyl-1-(2-propenyloxy)-473.0160.717C8H16O2-氮杂双环[4.2.0]辛-4-烯-8-羧酸2-甲基甲酯2-Azabicyclo[4.2.0]oct-4-ene-8-carboxylicacid,2-methyl-,methylester536.0810.042C10H15NO21-苯基丙烷-1，2-二醇1-Phenylpropane-1,2-diol544.080.335C9H12O25,6-二氢-2H-吡喃-2-酮-2H-Pyran-2-one,5,6-dihydro-547.1880.698C5H6O22-甲基苯酚-Phenol,2-methyl-576.3360.509C7H8O丙醛-2-丙烯酰腙Propanal,2-propenylhydrazone640.0370.187C6H12N2苯乙醇PhenylethylAlcohol673.6924.155C8H10O1-丁烯-3-炔，4-苯基-1-Buten-3-yne,4-phenyl-792.1080.092C10H82,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇-2,6-Octadien-1-ol,2,7-dimethyl-886.381.039C10H18O2-甲基十一醛Undecanal,2-methyl-969.8760.343C12H24O续表3-SEQ表3-\*ARABIC5长裙竹荪菌根乙醚提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式7-硫杂双环[2.2.1]庚烷，7-氧化物7-Thiabicyclo[2.2.1]heptane,7-oxide1006.080.144C6H10OS十二甲基环六硅氧烷-Cyclohexasiloxane,dodecamethyl-1025.40.34C12H36O6Si6丁基化羟基甲苯ButylatedHydroxytoluene1308.4848.604C15H24O邻苯二甲酸二异丁酯1,2-Benzenedicarboxylicacid,bis(2-methylpropyl)ester2043.311.171C16H22O4棕榈酸n-Hexadecanoicacid2181.161.253C16H32O2邻苯二甲酸-1-丁酯-2-异丁酯1,2-Benzenedicarboxylicacid,butyl2-methylpropylester2184.520.276C16H22O4己二酸二异辛酯Hexanedioicacid,bis(2-ethylhexyl)ester2687.4238.36C22H42O4邻苯二甲酸单乙基己基酯Mono(2-ethylhexyl)phthalate2830.060.383C16H22O43.3.3长裙竹荪菌根二氯甲烷提取物的成分分析图3-6为长裙竹荪菌根二氯甲烷提取物的GC-MS分析总离子流图，表3-6为长裙竹荪菌根二氯甲烷提取物的化学成分鉴定表。从表3-1可以看出，以二氯甲烷为溶剂，通过Rxi-5MS弹性石英毛细柱中等极性柱进行GC-MS检测长裙竹荪菌根中挥发性成分，共计鉴定出35种挥发性成分，其中酮类3个、醇类4个、酚类1个、酯类8个、酸类1个、杂环化合物5个、烃类5个、其他类9个(包括氘代氯仿、三氟化硼等)。在鉴定出的成分中含量较大的成分有二（2-乙基己基）酯（48.372%）、十一烷（7.244%）、苯乙醇（6.911%）、-十六酸（6.386%）、1,2-苯二甲酸，双（2-甲基丙基）酯（3.837%）等。图3-SEQ图3-\*ARABIC6长裙竹荪菌根二氯甲烷提取物挥发性成分GC-MS分析总离子流图表3-SEQ表3-\*ARABIC6长裙竹荪菌根二氯甲烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式(1′，2)-2-(2′，3′-二氢-1′-羟基-3′-氧代-1′-异吲哚-2′-基）-3-甲基-3-丁烯酸甲酯(1',2)-2-(2',3'--1'--3'--1'--2'-)-3--3-243.0240.089C14H15NO4氘代氯仿244.0320.168CDCl3二氯乙烷-2-2-,-259.8240.109CCl2D2三氟化硼261.8320.041BF33,4-二甲基亚环戊烷-1,1-二羧酸二乙酯1,1-,3,4-()-,264.8640.071C13H18O41，2，5-噻二唑烷-2，5-二羧酸，3-乙烯基-4-[[（苯基甲基）硫代]甲基]-二甲酯，反式-1,2,5--2,5-,3--4-[[()]]-,,-(.+-.)-272.5080.084C16H20N2O4S21，2-双（二氰亚甲基）-3-（2，3-二吗啉环丙烯硫代）环丙烷1,2-()-3-(2,3-)277.190.084C20H16N6O2S氯甲磺酰氯277.8840.171CH2Cl2O2S双环[1.1.1]戊烷-1，3-二硫醇[1.1.1]-1,3-300.9340.073C5H8S2（1，2）-2-苯基环丙基甲醇(+)-(1,2)-(2-)307.880.137C14H15NO4续表3-SEQ表3-\*ARABIC6长裙竹荪菌根二氯甲烷提取物的主要化学成分编号化合物名称保留时间/s相对含量%分子式顺1-氯1-丁3-()-1--3-,1--,()-309.0480.145C10H12O5-甲基-2-环己烯-1-酮-2--1-,5--,()-459.660.263C4H3Cl5,6-二氢-2-吡喃-2-酮-2--2-,5,6--548.5322.419C7H10O2-甲基苯酚-,2--576.9540.596C5H6O2甲基苯戊腈-,597.6720.248C7H8O正十一烷650.6767.244C12H13NO苯乙醇674.286.911C11H24十甲基环五硅氧烷-,-744.6720.427C8H10O1，2，3，4-四氢萘-,1,2,3,4--756.182.432C10H30O5Si5萘792.7280.206C10H122,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇-2,6--1-,2,7--886.7161.996C10H8三十五烷948.2880.595C10H18O5-甲基-2-己酮-2-,5--969.960.456C35H72十二甲基环六硅氧烷-,-1026.20.68C7H14O三乙酸甘油酯1059.670.5C12H36O6Si61，2，4-三甲氧基苯1,2,4-1093.820.183C9H14O61-氯十一烷1-1240.480.544C9H12O33-异丙氧基-1，1，1，7，7，7-六甲基-3，5，5-三（三甲基硅氧基）四硅氧烷3--1,1,1,7,7,7--3,5,5-()1286.220.537C11H23Cl三烯丙基异氰脲酸酯-1,3,5--2,4,6(1,3,5)-,1,3,5--2--1643.740.358C18H52O7Si7环己基硅氧烷，十六烷-,-1651.770.336C12H15N3O3十二烷，1,1-二氟-,1,1--1656.340.425C16H48O8Si8邻苯二甲酸二异丁酯1,2-,(2-)2043.43.837C12H24F2棕榈酸-2181.416.386C16H22O4邻苯二甲酸二丁酯2184.431.077C16H32O2己二酸二异辛酯,(2-)2687.3448.372C16H22O43.4长裙竹荪菌盖和菌根挥发性成分的气味分析及对比3.4.1长裙竹荪菌盖挥发性成分的气味分析经GC-MS分析,在长裙竹荪的菌盖中共鉴定出83种挥发性物质，详见表3-7，其中对长裙竹荪菌盖部位特殊性气味具有较大贡献的有以下几种：（1）苯乙醇，具有新鲜面包香和清甜的玫瑰样花香，天然存在于苹果、梨、香蕉、桃子、草莓、玫瑰油、橙花油、香叶油、风信子油、依兰油、茶叶、烟草等中；（2）苯甲醇，有芳香味，在自然界中多以酯的形式存在于风信子油、茉莉花油和秘鲁香脂等香精油中；（3）4-甲氧基苄