总大肠菌群分析检测实施细则

总大肠菌群分析检测实施细则总大肠菌群分析检测实施细则37℃2h氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌。多管发酵法一、适用范围于生活饮用水及其水源水中总大肠菌群的测定。二、试验室所用设备、器皿12、恒温培育箱34、冰箱56、天平7、电炉8910、玻璃发酵管11、试管架12、移液管13、锥形瓶二、培育基乳糖蛋白膝培育液乳糖蛋白胨培育液103乳糖55(16g/L)1mL1000mL制法：将蛋白陈、牛肉膏、乳糖及氯化钠溶于蒸馏水中，调整pH7.2——7.4，再1ml16g/l68.95kPa(115℃，10lb〕20min，贮存于冷暗处备用。加倍〔3〕伊红美蓝培育基A10gB10gC2gD20g~30gEl000mlF伊红水溶液〔20g/l)20mlG〔5g/L)13m制法：将蛋白陈、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH7.2，加人乳糖，混匀后68.95kPa(115℃，10lb〕20min。临用时加热溶化琼脂，冷至50℃～55℃〔4〕革兰氏染色液4.1a结晶紫1gb〔95%，体积分数〕20mLc草酸钱水溶液〔10g/l〕80mL制法：将结晶紫溶于乙醇中，然后与草酸馁溶液混合。注：结晶紫不行用龙胆紫代替，前者是纯品，后者不是单一成分，易消灭假阳性结晶紫溶液放置过久会产生沉淀，不能再用。4.2a1gb2gc300ml制法：将碘和碘化钾先进展混合，加人蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水。4.3〔95%，体积分数〕4.4a沙黄0.25gb〔95〕10mlc90mL4.5A18h~24hB1min，水洗。C1min，水洗。D30s，水洗E1min，水洗，待干，镜检。三、仪器培育箱：36℃1℃。冰箱：0℃～4℃显微镜。9cm。试管分度吸管：1mL10mL四、试验步骤1、乳糖发酵试验10ml10mllml10mL1mL9mL1ml〔即0.1ml〕10ml5对已处理过的出厂自来水，需常常检验或每天检验一次的，可直接种510mL10ml检验水源水时，如污染较严峻，应加大稀释度，可接种1，0.1，0.0lmL0.1,0.01,0.001ml5151mL101mL11mL管。36℃士l℃24h2h，如全部乳糖蛋白膝培育管都不产气产酸，则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按以下步骤进展。2、分别培育将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，于36℃1℃培育箱内培育18h~24h，观看菌落形态，挑取符合以下特征的菌落作革兰氏染色、镜检和证明试验。深紫黑色、具有金属光泽的菌落；紫黑色、不带或略带金属光泽的菌落；淡紫红色、中心较深的菌落。3、证明试验经上述染色镜检为革兰氏阴性无芽抱杆菌，同时接种乳糖蛋白豚培育液，置36℃士1℃24h2h，有产酸产气者，即证明有总大肠菌群存在。五、结果报告依据证明为总大肠菌群阳性的管数，查MPN(mostProbablenumber，最可能数〕检索表，报告每l00ml〔MPN〕2.153总大肠菌群未检出。2510mL〔MPN)3总大肠菌群MPN〔55.5mL510mL51mL，50.1mL〕接种量/mL10ml1ml总大肠菌群/(MPN/mL)10ml0.1ml总大肠菌群/(MPN/mL)00000000000000000000000000000000000000000011111122222233333344444455555501234501234501234501234501234501234511111111111111111111111111111111111100000011111122222233333344444455555501234501234501234501234501234501234524681012468101214681012151781012151719111315171922131517192224/mL10ml1ml0.1ml总大肠菌群/(MPN/mL)10ml0.1ml总大肠菌群/(MPN/mL)22222222222222222222222222222222222200000011111122222233333344444455555501234501234501234501234501234501234557912141679121417199121417192212141720222515172023252817202326293233333333333333333333333333333333333300000011111122222233333344444455555501234501234501234501234501234501234581113162023111417202327141720242731172124283236212428323640252932374145/mL10ml1ml0.1ml总大肠菌群/(MPN/mL)10ml0.1ml总大肠菌群/(MPN/mL)44444444444444444444444444444444444400000011111122222233333344444455555501234501234501234501234501234501234513172125303617212631364222263238445027333945525934404754626941485664728155555555555555555555555555555555555500000011111122222233333344444455555501234501234501234501234501