用不同内生植物淀粉组合取代鼠尾藻粉饲养仿刺参幼参的生长效果

用不同内生植物淀粉组合取代鼠尾藻粉饲养仿刺参幼参的生长效果

模拟子参apollo营养元素和药物的价值非常高。这是中国北方海水养殖的一个重要类型。高效、廉价和安全的饲料是仿刺参养殖业发展的物质基础。目前常用的仿刺参饲料中多含有30%左右的鼠尾藻Sargassumthunbergii、马尾藻Sargassumsp.或其它大型藻类粉。鼠尾藻等大型藻类的人工育苗尚处于研究阶段,目前使用的鼠尾藻等均为野生的。近年来,由于仿刺参养殖业的迅速发展,仿刺参的养殖规模不断扩大,鼠尾藻等大型藻类的用量不断增加;同时,由于近海水质污染严重以及沿岸的非养殖应用,鼠尾藻的生长和生存空间逐年缩小,使鼠尾藻等大型藻类的产量锐减,现已供不应求,因而导致鼠尾藻粉等大型藻类的价格不断攀升,仿刺参的养殖成本也随之增加。大型海藻是近海生态修复和“海洋牧场”建设的重要内容和基础环节,即使将来鼠尾藻能进行人工育苗和养殖成功,也不宜大面积采收,以免破坏近海天然牧场。因此,用来源广、价格适宜的陆生植物淀粉替代鼠尾藻等大型藻类粉,降低仿刺参饲料成本,具有一定的经济效益、生态效益和环保价值。目前,许多学者对仿刺参饲料中蛋白源和蛋白质需要量,以及脂肪源和磷脂的需要量进行了研究,但仿刺参对饲料中糖的种类和数量的需求尚未见报道。本试验中,作者研究了用不同陆生植物淀粉替代鼠尾藻等大型藻粉饲养仿刺参的效果,旨在丰富仿刺参的营养学内容,为研制高效、环保、安全的仿刺参配合饲料提供参考。1材料和方法1.1材料表面试验用仿刺参均来自大连海参养殖公司。1.2试验2:不同淀粉搭配的饲料试验1试验于2008年5月至7月在大连海洋大学实验室进行。试验用仿刺参平均体质量为4.19g,用弗苯尼考液消毒,暂养两周后,挑选315头规格整齐、体色鲜亮、体质健壮的个体随机分成7组(F0为对照组,F1～F6为试验组),放入45cm×31cm×30cm的塑料水槽(盛水40～42L)中,每个水槽中放养15头,每组设3个重复,分别投喂不同淀粉搭配的7种饲料(表1)。试验2试验于2008年10月至12月在大连海洋大学实验室进行。水温9～18℃,试验用仿刺参平均体质量为4.22g,来源、暂养和饲养方法同试验1。挑选180头分为4组(F0为对照组、F1～F3为试验组),每组设3个重复,每个水槽中放养15头,分别投喂用改进的不同淀粉搭配的4种饲料(表2)。将淀粉在高压锅内(120℃)糊化15min,然后烘干、研磨、粉碎。饲料中所有原料均经100目筛绢过滤,除去上层,混合均匀,做成粉状混合物。投喂前用80℃左右的热水搅拌均匀,放至室温下,待酵母发挥作用后成为松软适宜的膏状时投喂。投喂时将饲料均匀涂在波纹板(15cm×20cm)上,放入水槽底部,将充气石压在板下,涂抹饲料面朝上,以防饲料被冲散。每天下午6点投喂一次,投喂量约为幼参体质量的2%～5%,稍过量投喂。饲料中添加质量分数为0.2%的黄原胶,使饲料在水槽中不易分散。1.2.3肠道样品的制备试验1采用经沉淀、曝气1d的自然海水,水温为12.5～23.0℃。傍晚根据仿刺参的摄食情况过量投喂,24h持续充气,隔天换水2/3。水中溶氧量>7.0mg/L,TNH3-N<0.1mg/L。试验开始时逐头称重,每个周期结束时于15:00称量各饲料组每箱中仿刺参的总重。称重前一天停止投喂。各周期采用统一方法、统一称量工具,根据各组仿刺参各周期的始末体质量计算其特殊增重率:SGR=ln末体重−ln初体重饲养天数×100%。试验2中,每20d中有4d投喂添加质量分数为0.5%的Cr2O3饲料,投喂添加Cr2O3的饲料后于第3天8:00和19:00各收集一次粪便和残饵,以消除前期摄食未添加Cr2O3饲料的影响,连续收集4d。收集的粪便和残饵冷冻干燥保存。Cr2O3的含量用湿式灰化定量法测定。干物质和营养物质消化率的计算公式为营养物质的消化率=(1−A′A×BB′)×100%,干物质的消化率=(1−BB′)×100%,其中:A′和A分别为饲料和粪便中营养物质的含量;B和B′分别为饲料和粪便中Cr2O3的含量。试验结束时,从各试验组分别随机取20头仿刺参解剖,去掉肠及呼吸树,在70℃下烘至恒重,分别用凯氏定氮法、索氏抽提法(以乙醚为抽提液)和马福炉灼烧法(500℃,4h)测定粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量。试验2结束后,从每组取14头仿刺参,抽取体腔液,采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定血清中溶菌酶、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性。溶菌酶含量(μg/mL)=(测定管透光度-空白管透光度)/(标准管透光度-空白管透光度)×标准管浓度×样本测试前稀释倍数。酸性磷酸酶含量(U/g蛋白)=测定管吸光度/标准管吸光度×标准管含酚的量(0.005mg)×100mL/0.05mL。SOD活力(U/mg蛋白)=(对照管吸光度-测定管吸光度)/对照管吸光度/50%×(反应液总体积/取样量)/组织中蛋白的含量。试验2结束后,从每个试验组取仿刺参15头,置于冰盘内,解剖取出全部肠,用去离子水清洗肠内含物后研磨离心,取上清液,将每个平行组中每5头仿刺参的肠混合样品设为一重复,每个平行组设3个重复。将肠道样品置于-70℃下保存备用。分别用福林—酚试剂法、淀粉—碘显色法和牛奶—氢氧化钠滴定法测定肠道中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性。1.3相关方差分析所有数据均采用SPSS16.0软件进行相关性检验、单因素方差分析和LSD多重比较。以P<0.05表示差异显著,以P<0.01为差异极显著。2结果2.1饲料添加不同植物淀粉量对小麦粉饲料的影响试验1中,60d的饲养结果表明,所有试验组的仿刺参均无死亡和排脏,表明用陆生植物淀粉代替大部分鼠尾藻粉对仿刺参的成活和排脏无显著影响。从表3可见:试验结束时,F4组仿刺参的特殊增重率最高(1.83%/d),比对照组(1.27%/d)高44.09%,极显著地高于其它各组(P<0.01);各试验组仿刺参的特殊增重率由高至低依次为F4>F0>F2>F3>F5>F1>F6。这说明用陆生植物淀粉可以代替大部分鼠尾藻粉,只添加马铃薯、红薯、玉米和小麦粉4种植物淀粉的效果不及添加多种植物淀粉的效果好。根据试验1的结果,在试验2饲料中添加了南瓜等淀粉以全部取代鼠尾藻粉。经60d的饲养,结果表明(表4):仿刺参摄食以陆生植物淀粉全部代替鼠尾藻粉的饲料时,特殊增重率均比对照饲料高。F2组、F1组和F3组仿刺参的特殊增重率分别比对照组(F0组)高123.81%、42.86%和14.29%,即在同样配方下添加10%芋头的促长效果最好,添加过多反而效果不好。统计分析表明:F1组与对照组差异显著(P<0.05);F3组与对照组差异不显著(P>0.05);F2组与其它各组差异均极显著(P<0.01),这表明F2组饲料不仅完全可以取代鼠尾藻,而且具有明显的促生长效果。不同试验阶段水温不同,仿刺参的生长速度即SGR也不同。从表4可见:前20d内,水温为16～18℃,虽然仿刺参个体较小,但刚开始摄食时,各组间的SGR值已经有了差异,但F1、F2组与对照组差异不显著(P>0.05),仅F3组极显著低于对照组和F1、F2组(P<0.01);第20～40d内,水温为12～15℃,F1组、F2组、F3组的SGR增长明显,均极显著高于对照组(P<0.01),F2组仿刺参的摄食尤其活跃,由第一个20d的平均0.20%/d升至1.04%/d,并极显著高于其它各组(P<0.01);在最后20d内,水温为9～13℃,各组仿刺参生长缓慢,个别仿刺参甚至呈零增长或负增长,其中对照组生长最慢,而F2组的生长仍是最快,并极显著高于其它各组(P<0.01),其余组间差异均不显著(P>0.05)。2.2验证试验结果从表5可见:仿刺参摄食添加陆生植物淀粉的饲料时,其肠道内蛋白酶活性均极显著低于对照组(P<0.01);而淀粉酶的活性却极显著高于对照组(P<0.01),其中F1组、F2组和F3组仿刺参肠淀粉酶的活性分别比对照组提高95.28%、133.93%和99.68%,这3组之间以F2组最高。值得注意的是,摄食添加陆生植物淀粉的饲料时,生长最快的F2组仿刺参肠脂肪酶的活性虽然比对照组有所提高,但与对照组差异并不显著(P>0.05),而F1、F3组均较对照组有所下降,其中F1组较对照组差异不显著(P>0.05),而F3组较对照组差异显著(P<0.05)。这表明,添加多种陆生植物淀粉诱导了肠淀粉酶和脂肪酶活性的增加,促进了仿刺参对饲料的消化和吸收,因而促进了其生长。2.3fps对血清中酸性磷酸酶活性的影响从表5可见:仿刺参摄食添加陆生植物淀粉的饲料时,血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性均较对照组有所提高,但F1组与对照组差异不显著(P>0.05),F2、F3组与对照组差异极显著(P<0.01);而溶菌酶的活性均极显著低于对照组(P<0.01);F1组仿刺参血清中酸性磷酸酶活性极显著高于对照组(P<0.01),而F2组、F3组均极显著地低于对照组(P<0.01)。这表明添加多种陆生植物淀粉诱导了SOD的活性。2.4不同饲料对复合核心的分解率的影响从表6可见:仿刺参摄食添加陆生植物淀粉的饲料时,对饲料蛋白质和脂肪的表观消化率均极显著高于对照组(P<0.01)。2.5不同饲料对复合体成分的影响从表7可见:饲料中搭配不同淀粉对仿刺参体成分的影响均不显著(P>0.05)。2.6两组每公斤成本比按2008年5月大连市场价格,在试验1中,试验饲料(F1、F2、F3、F4、F5和F6)每公斤成本比对照组(F0)降低52.71%、42.29%、55.63%、37.92%、36.88%和39.17%;在试验2中,试验饲料(F1、F2和F3)每公斤成本比对照组(F0)降低39.79%、43.96%和44.79%(表8)。3不同水生植物淀粉对仿刺参免疫功能的影响有多种因素可以提高仿刺参消化酶的活性,但饲料组成是较重要的影响因素。在养殖过程中,通过改变饲料组成,可以在一定程度上改变仿刺参肠道内消化酶的分泌,而不同食物成分的含量可以刺激消化道分泌相应量的酶来消化食物。消化酶活性是反映仿刺参消化生理机能的一项重要指标。消化酶活性的高低决定着仿刺参对营养物质的消化吸收能力,因而对其生长速度有决定性的影响。本试验结果表明,摄食添加陆生植物淀粉组的仿刺参其脂肪酶活性很低,可能与饲料中的脂类物质含量很低有关;而添加陆生植物淀粉组的仿刺参淀粉酶活性却极显著地高于对照组,以F2组最高。这可能是因为在陆生植物淀粉的长期诱导下,仿刺参体内淀粉酶的活性和含量相应提高,加快了肠道内对淀粉的分解,进而促进对淀粉的消化和吸收,因而仿刺参的生长速度加快。山药、芋头、红薯、南瓜、木瓜等淀粉是很好的营养食品,都具有极其重要的免疫功能。超氧化物歧化酶作为重要的抗氧化酶,在清除超氧阴离子自由基、防止生物分子损伤方面有十分重要的作用。溶菌酶作为机体非特异性免疫因子之一,不仅参与一些营养物质的消化、吸收、运输,而且还是生物体内重要的解毒体系。酸性磷酸酶除了参与磷酸酯的代谢外,还参与代谢调节、能量转换及信号传导等重要生命活动。从试验2对免疫相关酶活性的研究结果显示,仿刺参摄食添加陆生植物淀粉的饲料时,血清中超氧化物歧化酶的活性均极显著高于对照组,F2组超氧化物歧化酶的活性最高,表明添加多种陆生植物淀粉诱导了血清中超氧化物歧化酶的活性。各试验组仿刺参血清中酸性磷酸酶活性和溶菌酶活性呈现无规律的变化,F1组血清中酸性磷酸酶活性极显著高于对照组,F2、F3组酸性磷酸酶活性极显著低于对照组,F1、F2、F3组溶菌酶活性极显著低于对照组。发生上述现象,可能是因为各试验的饲料中含有多种不同的营养物质,这是多种营养物质影响的效果。目前尚不知对仿刺参幼参免疫功能起作用的有效成分,有关诱导血清中超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶、溶菌酶的活性物质及其适宜添加量还有待进一步研究。本试验结果表明,试验2中,各试验组仿刺参对粗蛋白和粗脂肪的表观消化率极显著高于对照组,以F2组最高,这表明添加不同陆生植物淀粉的饲料能显著提高仿刺参幼参对粗蛋白和粗脂肪的表观消化率,从而促进了仿刺参幼参的生长。而不同比例淀粉搭配的饲料对仿刺参幼参体成分没有显著性影响。鼠尾藻因其营养丰富一直被作为海参养殖的优质饵料,通过对鼠尾藻和陆生植物淀粉的营养成分进行比较分析发现,多种陆生植物淀粉组合中所含的营养成分比单一的鼠尾藻所含营养成分更加全面。本试验结果显示,添加陆生植物淀粉的F2组刺参的特殊生长率极显著高于添加鼠尾藻的对照组,这说明不同的陆生植物淀粉组合其营养成分更能满足仿刺参的生长需要,可以完全取