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文档简介
第1页考
纲
视
窗知
识
内
容(1)基因工程诞生(Ⅰ)(2)基因工程原理及技术(Ⅱ)(3)基因工程应用(Ⅱ)(4)蛋白质工程(Ⅰ)(5)植物组织培养(Ⅱ)(6)动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)第2页(7)细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)(8)动物胚胎发育基本过程与简述胚胎工程理论基础(Ⅰ)(9)胚胎干细胞移植(Ⅰ)(10)胚胎工程应用(Ⅱ)(11)转基因生物安全性(Ⅰ)(12)生物武器对人类威胁(Ⅰ)(13)生物技术中伦理问题(Ⅰ)(14)简述生态工程原理(Ⅱ)(15)生态工程实例(Ⅰ)(16)DNA粗提取与判定(试验与操作能力)第3页热
点
考
向1.基因工程操作、工具以及在农业、医学、环境保护等领域应用;2.克隆技术、动植物细胞工程方法、步骤、特点及应用;3.胚胎工程及其与人体健康和伦理关系分析,关注科学技术两面性(双刃剑);不一样技术特点与相关性,尤其是在实践中综合利用。4.生态工程原理及其在实践中应用。第4页第5页第6页一、基因工程1.实现DNA重组技术需要三种工具:准确切割DNA“
分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)、将DNA
片断再连接起来“分子缝合针”——DNA连接酶、将
体外重组好DNA导入受体细胞“运输工具”——运载体。2.限制酶:主要从
中分离纯化出来,能够识别双链
DNA分子某种特定核苷酸序列,而且使每一条链中特定
部位两个核苷酸之间
断裂。形成黏性末端
和平末端两种。原核生物磷酸二酯键第7页3.DNA连接酶:依据酶起源不一样分为两类:E.coliDNA
连接酶、T4DNA连接酶。二者都是将双连DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开两个核苷酸之间
键。4.惯用运载体:质粒、噬菌体衍生物、动植物病毒。质粒是一个裸露、结构简单、独立于细菌拟核
DNA分子之外并含有自我复制能力
分子。5.基因工程基本操作步骤主要包含四步:目标基因获取、
、将目标基因导入受体细胞、目标基因检测与判定。磷酸二酯双链环状DNA基因表示载体构建第8页6.基因表示载体构建是实施基因工程第二步,也是基
因工程
。其目标是:使目标基因在受体细胞中
在而且能够遗传给下一代并表示和发挥作用。其组
成是:目标基因、开启子、终止子、标识基因。7.受体细胞有植物、动物、微生物之分。8.目标基因导入受体细胞后,是否能够维持和表示其遗传
特征,只有经过检测与判定才能知道。关键稳定存第9页9.将目标基因导入植物细胞方法:农杆菌转化法、
花粉管通道法、基因枪法。10.将目标基因导入动物细胞方法:显微注射技术。11.将目标基因导入微生物细胞:用CaCl2处理,增大细
胞壁通透性。12.检测目标基因是否插入到受体细胞基因组中,是
否转录出mRNA方法:
技术(用目标
基因做探针,假如显示出杂交带则成功)。13.检测目标基因是否翻译成蛋白质方法:
。DNA分子杂交抗原——抗体杂交第10页14.除了分子检测外,有时还需要进行个体水平判定,
方法是:
或
接种试验。15.目标基因获取:从已经有物种中直接分离,也能够人工
合成。16.目标基因:主要是指编码蛋白质
基因,也能够是
一些含有
作用因子。抗虫抗病结构调控第11页17.PCR过程是高温变性、
、中温延伸。18.植物基因工程硕果累累:抗虫转基因植物,抗病转基因
植物,抗逆转基因植物,利用转基因改良植物品质。19.动物基因工程前景辽阔:用于提升动物生长速度,用
于改进畜产品品质,用转基因动物生产药品,用转基
因动物做器官移植供体,基因工程药品异军突起。低温复性第12页20.基因治疗:是把
基因导入病人体内,使该基因
表示产物发挥功效,从而到达治疗疾病目标。21.蛋白质工程是指以蛋白质结构规律及其与生物功
能关系作为基础,经过
或基因合成,对
现有蛋白质进行改造,或制造一个新蛋白质,
以满足人类生产和生活需求。22.蛋白质工程基本路径:从预期
出发
设计预期蛋白质结构推测应有氨基酸
序列找出相对应脱氧核苷酸序列(基因)。基因修饰蛋白质功效正常第13页二、细胞工程1.细胞全能性:含有某种生物全部遗传信息任何
一个细胞,都含有发育成完整生物体潜能。2.植物细胞工程:植物组织培养技术(基础)、植物体
细胞杂交技术。3.细胞脱分化:就是让已经分化细胞,经过诱导
后,失去其特有
和
而转变成未分化细胞过程。结构功效第14页4.植物组织培养就是在
和
控制条件下,将离体
植物器官、组织、细胞,培养在人工配制培养基上,
给予适宜培养条件,诱导其产生
、
,最
终形成完整植株。5.植物体细胞杂交就是将不一样种植物体细胞,在一定条
件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培养成新植物体
技术。6.植物细胞工程实际应用:植物繁殖新路径、作物新
品种培育、细胞产物工厂化生产。无菌人工愈伤组织丛芽第15页7.动物细胞工程惯用技术伎俩有:动物细胞培养(基础)、
动物细胞融合、动物细胞核移植、生产单克隆抗体等。8.动物细胞培养就是从动物机体中取出相关组织,将它
分散成单个细胞(
或
),然后,放在适
宜培养基中,让这些细胞生长和增殖。9.动物细胞培养时制备细胞悬液中分散细胞很快就贴
附在瓶壁,要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、
易于贴附。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细
胞就会停顿分裂增殖称为细胞
。胰蛋白酶胶原蛋白酶接触抑制第16页10.动物细胞培养条件:无菌、无毒环境;营养;适宜
温度和pH;
环境。11.动物核移植是将动物一个细胞细胞核,移入一个已经
去掉细胞核
细胞中,使其重组并发育成一个新
胚胎,这个新胚胎最终发育为动物个体。12.哺乳动物核移植分为:胚胎细胞核移植、体细胞核移植。气体卵母第17页13.体细胞核移植应用前景:转基因克隆动物能够促进
优良畜群繁育;保护濒危物种;作为生物反应器生产
医用蛋白;作为异种移植供体;核移植胚胎干细胞
定向诱导分化成对应组织器官用于器官移植。14.动物细胞融合也称为细胞杂交,是指两个或多个动物
细胞结合形成一个细胞过程。融合后形成含有原
来两个或多个细胞遗传信息
细胞称为杂交细胞。单核第18页15.动物细胞融合方法:物理方法(离心、振动、电刺激)、
化学方法(聚乙二醇)、灭活病毒。16.单克隆抗体制备:骨髓瘤细胞和
小鼠脾脏中
B淋巴细胞融合,再用特定选择培养基进行筛选,只有融
合杂种细胞才能生长,这种杂交细胞特点是:既能迅
速大量
,又能产生
。已免疫专一抗体繁殖第19页17.单克隆抗体优点:
、灵敏度高,并能够
。18.单克隆抗体应用:作为诊疗试剂(在诊疗应用上具
有准确、高效、快速、简易优点),用于治疗疾病和
运载药品。特异性强大量制备第20页三、胚胎工程1.精子发生大致能够分为三个阶段:第一阶段,位于曲细
精管管壁精原细胞先分裂为两个细胞,然后继续数次有
丝分裂产生多个初级精母细胞;第二阶段,初级精母细胞
连续两次分裂;第三阶段,圆形精子细胞变形成精子,
其中细胞核变为精子头部,高尔基体发育为头部顶体,
中心体演变为精子尾,线粒体聚集在尾基部形成线粒
体鞘膜。第21页2.受精:是精子与卵子结合形成合子过程。包含受
精前准备阶段和受精阶段:准备阶段1——
,准备阶段2——卵子准备,受精阶段主要包含:
精子穿越放射冠和透明带,进入卵黄膜,原核形成
和配子结合(受精过程中,首先发生
反应;在精
子触及卵黄膜瞬间,发生
带反应,这是预防
多精入卵第一道屏障;精子入卵后,发生
作用,这是预防多精入卵第二道屏障)。顶体透明卵黄膜
精子获能封闭第22页3.一个卵泡成熟一个卵子;排卵:是指卵子从卵泡中排出;
刚排出卵子还未完全成熟,需要在输卵管内深入成
熟直到
期才能与精子在
内结合完成受精。
卵子是否受精标志:在卵黄膜和透明带间隙观察到
时。4.胚胎发育:卵裂期、桑椹胚、囊胚、原肠胚、组织器
官形成。5.胚胎工程技术:体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植(
是最终一道工序)、胚胎分割移植、胚胎干细胞。MII中
两个极体输卵管第23页6.体外受精:主要包含卵母细胞采集和培养,精子采
集和获能、受精。7.胚胎移植实际上是生产胚胎
和孕育胚胎
共
同繁殖后代过程,优势是能够充分发挥雌性优良个
体繁殖潜力,大大缩短了供体本身繁育周期,使
良种畜群快速扩大。8.胚胎移植生理学基础:供体与受体相同生理改变;
胚胎在早期母体中处于游离状态;子宫不对外来胚胎发
生
反应;胚胎遗传性状不受受体任何影响。供体受体免疫排斥第24页9.胚胎移植基本程序:对供体和受体选择和处理(同
期发情处理,超数排卵处理)、配种或进行人工授精、
对胚胎搜集检验培养或保留、进行胚胎移植。10.胚胎分割:是指采取机械方法将早期胚胎切割成2、4
或8等份等,经移植取得
或
技术。11.胚胎干细胞:简称ES或EK细胞,是由
或
性腺中分离出来一类细胞。形态上:体积小,细胞核大、核仁显著;功效上:含有发育
,体外
培养时能够增殖而不发生分化。同卵双胎多胎早期胚胎原始全能性第25页第26页1.基本工具限制酶DNA连接酶载体作用切割目标基因和载体连接DNA片段,形成重组DNA携带目标基因进入受体细胞作用部位两核苷酸脱氧核糖与磷酸间形成磷酸二酯键第27页作用特点(条件)①识别特定核苷酸序列②在特定位点上切割①E·coliDNA连接酶只连接黏性末端②T4DNA连接酶连接黏性末端和平末端①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制②有多个限制酶切割位点③含有特殊标识基因惯用类型EcoRI限制酶SmaI限制酶E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶质粒、噬菌体、动植物病毒限制酶DNA连接酶载体第28页①DNA连接酶连接两个DNA片段,而DNA聚合酶只能将
单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。②限制性核酸内切酶是切割某种特定脱氧核苷酸序列,
并使两条链中特定位置断开,而解旋酶是将DNA
两条链间氢键打开形成两个单链。第29页2.目标基因检测内容和方法类型步骤检测内容方法结果显示分子检测第一步目标基因是否整合到受体细胞染色体DNA上DNA分子杂交(DNA和DNA之间)是否成功显示出杂交带第二步目标基因是否转录出mRNA分子杂交技术(DNA和mRNA之间)同上第三步目标基因是否翻译出蛋白质抗原——抗体杂交同上第30页个体水平鉴定包含做抗虫、抗病接种试验,以确定是否有抗性以及抗性程度;对基因工程产品与天然产品功效进行活性比较,以确定功效是否相同第31页①目标基因是指基因工程操作中外源基因,它是能编码某种蛋白质结构基因,如生物抗虫基因等。②使用同一个限制酶切割目标基因和运载体(运载体,带有标识基因)。③受体细胞有植物、动物、微生物之分,植物细胞能够是卵细胞(受精卵)、体细胞,动物细胞普通用受精卵。④目标基因导入受体细胞不是基因工程成功标志,基因工程是否成功是目标基因是否表示成功。第32页3.蛋白质工程与基因工程比较项目蛋白质工程基因工程区别过程预期蛋白质功效→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→合成DNA→表示出蛋白质获取目标基因→构建表示载体→导入受体细胞→目标基因检测与判定实质定向改造或生产人类所需蛋白质定向改造生物遗传特征,以取得人类所需生物类型或生物产品(基因异体表示)生产自然界没有蛋白质生产自然界中已经有蛋白质结果第33页联络蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来第二代基因工程。因为对现有蛋白质改造或制造新蛋白质必须经过基因修饰或基因合成实现项目蛋白质工程基因工程第34页1.植物组织培养和动物细胞培养第35页技术项目植物组织培养动物细胞培养培养基成份矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加剂(如甘氨酸、琼脂等),属于固体培养基葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等,属于液体培养基取材较幼嫩细胞、组织、器官动物胚胎或出生很快幼龄器官或组织原理细胞全能性细胞增殖第36页第37页培养结果能够取得植株,也能够取得大量细胞只能取得大量细胞,不能得到生物个体应用①植物快速繁殖与脱毒植物培养②生产细胞产品③制造人工种子④用于转基因植物培育①生产蛋白质生物制品②培养皮肤移植材料③检测有毒物质④用于生理、病理药理学研究相同点①都需人工条件下无菌操作②都是合成培养基③都需适宜温度、pH等条件
技术
植物组织培养动物细胞培养项目第38页植物组织培养目标不一样,培养阶段不一样:若培育人工种子,则培养到胚状体阶段;若提取细胞产品,则普通培养到愈伤组织阶段;若培育新个体,则应培育到试管苗阶段。第39页2.植物体细胞杂交与动物细胞融合
植物体细胞杂交动物细胞融合(单克隆抗体制备)理论基础(原理)细胞膜流动性、细胞全能性细胞膜流动性、细胞增殖融合前处理酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)注射特定抗原免疫处理正常小鼠促融①物理法:离心、振动、电刺激等②化学法:聚乙二醇(PEG)①物、化法:与植物细胞融合相同②生物法:灭活仙台病毒第40页植物体细胞杂交动物细胞融合(单克隆抗体制备)过程第一步第二步第三步第四步原生质体制备(酶解法)原生质体融合(物、化法)杂种细胞筛选与培养杂种植株诱导与判定正常小鼠免疫处理动物细胞融合(物理、化学、生物法)杂交瘤细胞筛选与培养单克隆抗体提纯第41页植物体细胞杂交动物细胞融合(单克隆抗体制备)意义和用途克服远缘杂交不亲和障碍,大大扩展杂交亲本组合范围①制备单克隆抗体②诊疗、治疗、预防疾病比如:a.肿瘤定位诊疗,放射性抗体肿瘤b.生物导弹治疗,抗体—抗癌药品肿瘤第42页第43页b.原理:细胞核全能性。c.应用:快速繁育良种、濒危动物;改良动物新品种。②利用植物组织培养技术育种。③利用人工种子繁殖物种。④植物体细胞杂交育种。
第44页核移植和植物体细胞杂交产生后代中都含有两个亲本遗传物质;植物组织培养和人工种子产生后代中都只含一个亲本遗传物质。第45页第46页第47页第48页2.几个概念(1)胚胎移植:是指将雌性动物早期胚胎,或者经过体外受精及其它方式得到胚胎,移植到同种、生理状态相同其它雌性动物体内,使之继续发育为新个体技术。(2)供体:在胚胎移植中提供胚胎个体叫做供体。(3)受体:在胚胎移植中接收胚胎个体叫做受体。第49页3.胚胎移植是胚胎工程其它技术最终一道“工序”在胚胎工程中经过任何一项技术,如转基因、核移植、或体外受精等技术取得胚胎(先经动物细胞培养),都必须移植给受体才能取得后代,即均用到胚胎移植技术。
第50页第51页考向一胚胎工程及应用
(·江苏高考)以下关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程叙述,正确是(
)A.卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不停增加
B.胚胎分割时需将原肠胚内细胞团均等分割
C.胚胎干细胞含有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点
D.胚胎干细胞是一类未分化细胞,可从早期胚胎中分离获取第52页
[解析]卵裂期胚胎中细胞数目增加,而有机物总量不停降低,胚胎分割时需将囊胚内细胞团均等分割。胚胎干细胞是一类可从早期胚胎中分离取得未分化细胞,其含有细胞核大、核仁大、蛋白质合成旺盛等特点。[答案]
D第53页试管动物克隆动物技术基础体外受精、胚胎移植、细胞培养核移植技术、细胞培养胚胎(分割)移植实例试管牛多利羊试管动物与克隆动物
第54页试管动物克隆动物第55页试管动物克隆动物生殖方式有性生殖无性生殖遗传物质遗传物质来自两个个体遗传物质基本与供体相同意义充分发挥雌性优良个体繁殖潜力,缩短供体本身繁殖周期加速家畜遗传改良进程、挽救濒危物种等第56页考向二对基因工程了解
(·浙江高考)以下关于基因工程叙述,错误是(
)
A.目标基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类惯用工具酶
C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表示胰岛素原无生物活性
D.载体上抗性基因有利于筛选含重组DNA细胞和促进目标基因表示第57页[解析]
目标基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物;基因工程中惯用工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶;大肠杆菌为原核生物,不含有内质网和高尔基体等细胞器,不能对蛋白质进行加工,其合成胰岛素原无生物活性。运载体中抗性基因为标识基因,其作用是有利于筛选含重组DNA细胞,不能促进目标基因表示。[答案]
D第58页(1)工具酶①基因工程:限制性核酸内切酶,DNA连接酶;②植物体细胞杂交:纤维素酶、果胶酶;③动物细胞(融合)培养:胰蛋白酶。第59页(2)遗传性①转基因生物:两亲本遗传性;②异源多倍体植物:两亲本遗传性;③杂种动物细胞:两亲本遗传性;④核移植(克隆)动物:两亲本遗传性;⑤胚胎移植:两亲本遗传性;⑥胚胎分割:遗传性相同(相当于无性繁殖)。
第60页考向三对细胞工程了解与应用第61页
(·全国卷Ⅰ)以下关于植物体细胞杂交或植物细胞质遗传叙述,错误是(
)A.利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离限制,培育远缘杂种
B.不一样种植物原生质体融合过程属于植物体细胞杂交过程
C.两个不一样品种紫茉莉杂交,正交、反交所得F1表现型一致
D.两个不一样品种紫茉莉杂交,F1遗传物质来自母本多于来自父本第62页
[解析]
植物体细胞杂交包含植物原生质体融合、植物组织培养两过程。利用植物体细胞杂交技术可克服物种间生殖隔离限制,培育远缘杂种。紫茉莉枝条颜色遗传属于细胞质遗传,故两个不一样品种紫茉莉杂交,正交、反交所得F1表现型不一致。因受精卵细胞质几乎全来自卵细胞,故两个不一样品种紫茉莉杂交,F1细胞质中遗传物质来自母本多于来自父本。[答案]
C第63页生物工程技术应用组合(1)转基因植物培育:基因工程+植物组织培养。(2)转基因动物培育:基因工程+动物细胞培养+胚胎移植。(3)核移植(克隆)动物培育:核移植+动物细胞培养+胚胎移植。(4)胚胎移植:有性生殖+动物细胞培养+胚胎移植。(5)植物体细胞杂交:酶工程+体细胞融合+植物组织培养。(6)试管婴儿:体外受精+动物细胞培养+胚胎移植。
第64页第65页一、选择题1.(·浙江高考)用动、植物成体体细胞进行离体培养,以下叙述正确是(
)A.都需用CO2培养箱
B.都须用液体培养基
C.都要在无菌条件下进行
D.都可表达细胞全能性第66页解析:植物组织培养用固体培养基不需用CO2培养箱,动物细胞培养需用液体培养基;植物组织培养可得到完整植物个体,表达了细胞全能性,动物细胞培养取得是动物细胞或代谢产物,未表达细胞全能性;植物组织培养和动物细胞培养均需要在无菌条件下进行。答案:C第67页2.(·广东高考)钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面出色成就而获年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光,将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后,结果能够检测到绿色荧光。由此可知(
)A.该生物基因型是杂合
B.该生物与水母有很近亲缘关系
C.绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表示
D.改变绿色荧光蛋白基因1个核苷酸对,就不能检
测到绿色荧光第68页解析:在转基因生物体内能检测到绿色荧光,说明绿色荧光基因已在生物体内成功表示。答案:C第69页3.(·江苏高考)以下叙述中错误是(
)A.改变NaCl溶液浓度只能使DNA溶解而不能使其
析出
B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会展现蓝色
C.用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不一样
蛋白质
D.用透析法可去除蛋白质样品中小分子物质第70页解析:DNA在NaCl溶液中溶解度是伴随NaCl浓度改变而改变。在0.14mol/LNaCl溶液中DNA溶解度最小,低于或高于0.14mol/L,DNA溶解度都会增大。在DNA粗提取试验中就是先把核物质溶解在2mol/LNaCl溶液中,然后逐步加水,稀释至0.14mol/L时,使DNA析出。答案:A第71页4.(·全国卷Ⅰ)以下关于细胞工程叙述,错误是(
)A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
B.去除植物细胞细胞壁和将动物组织分散成单个
细胞均需酶处理
C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠B淋巴细胞
融合可制备单克隆抗体
D.某种植物甲乙两品种体细胞杂种与甲乙两品
种杂交后代染色体数目相同第72页解析:利用物理(电刺激、振荡、离心)和化学方法既可诱导植物原生质体融合,也可促进动物细胞融合;植物细胞杂交常先用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞,取得有活力原生质体,用胰蛋白酶处理动物组织分散成单个细胞;第73页将小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能产生特异性抗体又能无限增殖,经克隆后生成细胞群可产生单克隆抗体;甲乙两品种体细胞杂交后代染色体数是甲乙两品种体细胞染色体数之和,甲乙两品种杂交后代染色体数是甲乙两品种配子染色体数和。答案:D第74页5.下表为几个限制性核酸内切酶识别序列和切割位点。以下列图,已知某DNA在目标基因两端1、2、3、4四处有BamHI或EcoRI或PstI酶切位点。现用BamHI和EcoRI两种酶同时切割该DNA片段(假设所用酶均可将识别位点完全切开),以下各种酶切位点情况中,能够预防酶切后单个含目标基因DNA片段本身连接成环状是(
)第75页A.1为BamHI,2为EcoRI,3为BamHI,4为PstIB.1为EcoRI,2为BamHI,3为BamHI,4为PstIC.1为PstI,2为EcoRI,3为EcoRI,4为BamHID.1为BamHI,2为EcoRI,3为PstI,4为EcoRI第76页解析:用BamHI和EcoRI两种酶同时切割该DNA片段,要想预防酶切后单个含目标基因DNA片段本身连接成环状,只要目标基因两端2与3限制酶为BamHI或EcoRI即可。答案:A第77页6.科学家将人体皮肤细胞改造成了多能干细胞——“iPS细胞”,人类“iPS细胞”能够形成神经元等人体各种组织细胞。以下相关“iPS细胞”说法正确是(
)A.iPS细胞分化为神经细胞过程表达了细胞全能性
B.iPS细胞有细胞周期,它分化形成神经细胞一
般不具细胞周期
C.iPS细胞可分化形成各种组织细胞,说明“iPS细胞”在分裂时很轻易发生突变
D.iPS细胞分化成人体各种组织细胞,是因为它具
有不一样于其它细胞特定基因第78页解析:“iPS细胞”是一个多能干细胞,而多能干细胞既能分裂又能进行细胞分化。细胞全能性应该表示在由该细胞形成新个体过程中。高度分化细胞如神经细胞等是不能再进行细胞分裂,不能进行有丝分裂细胞是不含有细胞周期。细胞分化是基因选择性表示结果,而多细胞生物各个体细胞因为源自一个受精卵,含有相同遗传信息。答案:B第79页7.(·南通质检)以下相关植物细胞工程应用叙述,正确是(
)A.利用组织培养技术培育脱毒苗,取得抗病毒新品种
B.利用组织培养技术产生突变体,可直接培育出含有优良性状新品种
C.利用细胞培养技术取得紫草素,实现了细胞产物
工厂化生产
D.利用植物体细胞杂交技术取得“萝卜—甘蓝”,遵
循基因自由组合定律第80页解析:取根尖、茎尖进行组织培养取得无病毒植株,不一定取得含有抗病毒新品种。突变是不定向,利用组织培养技术产生突变体,不一定能直接培养出含有优良性状新品种。植物体细胞杂交是用两个来自不一样植物体细胞融合成一个杂种细胞,而且把杂种细胞培育成新植物体方法,没有减数分裂过程,所以不遵照基因自由组合定律。答案:C第81页.8.对基因组文库描述,不正确是(
)A.含有某种生物全部基因B.基因中含有开启子和内含子C.文库基因是经过受体菌承载D.文库中全部基因能够在物种间交流第82页解析:基因文库含义是指将含有某种生物不一样基因许多DNA片段,导入受体菌群体中经过克隆而储存,这么含有这种生物不一样基因受体菌群体便组成了基因文库。假如一个基因文库中包含了一个生物全部基因,这种基因文库叫做基因组文库。因为基因文库中基因都是将基因导入受体菌内,所以不能在物种间交流。答案:D第83页9.某研究小组为测定药品对体外培养细胞毒性,准备对某种动物肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。以下说法正确是(双选)(
)A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时,也可用胃蛋白酶处理B.细胞培养应在含5%CO2恒温培养箱中进行,CO2
作用是调整培养液pHC.甲、乙细胞在连续原代培养过程中,乙会出现停顿增殖现象D.仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒第84页解析:胃蛋白酶最适pH值靠近于2,呈酸性,而细胞培养液pH值靠近于中性,所以不能用胃蛋白酶处理。因为存在细胞接触抑制现象,在原代培养过程中,会出现停顿增殖现象,需要传代培养取得细胞株和细胞系;病毒在活细胞内才能增殖,不能用培养细胞培养液进行培养。答案:BC第85页10.(·惠州模拟)高等哺乳动物受精后很快,受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官分化,最终发育成一个完整幼体,完成胚胎发育全过程,以下相关叙述错误是(双选)(
)第86页A.题图是胚胎发育过程中囊胚期示意图,①②③依次称之为透明带、滋养层、内细胞团B.高等哺乳动物胚胎发育经历时期是受精卵卵裂期
桑椹胚囊胚期原肠胚期幼体,其中,最关键时期是原肠胚期C.高等哺乳动物胚胎发育中细胞分化开始于囊胚期,终止于生命结束D.进行胚胎分割时,应选择原肠胚期胚胎进行第87页解析:胚胎发育关键时期是原肠胚期;进行胚胎分割时,普通选择桑椹胚或囊胚期胚胎进行。答案:BD第88页二、非选择题11.胰岛素能够用于治疗糖尿病,不过胰岛素被注射入人体后,会堆积在皮下,要经过较长时间才能进入血液,而进入血液胰岛素又轻易分解,所以治疗效果受到影响。下列图是用蛋白质工程设计速效胰岛素生产过程,请据图回答相关问题。第89页第90页(1)构建新蛋白质模型是蛋白质工程关键,图中构建新胰岛素模型主要依据是
。(2)图解中从新胰岛素模型到新胰岛素基因基本思绪是什么?
。第91页(3)新胰岛素基因与运载体(质粒)结合过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶,已知限制性内切酶Ⅰ识别序列和切点是—GGATCC—。请画出质粒被限制性内切酶Ⅰ切割后所形成黏性末端
。DNA连接酶对所连接DNA两端碱基序列是否有专一性要求?
。(4)若将含有新胰岛素基因表示载体导入植物细胞中,最惯用有效做法是
。(5)若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素,需用到生物工程有
、
和发酵工程。第92页解析:(1)构建新胰岛素模型主要依据是蛋白质预期功效。(2)依据蛋白质预期功效,推测新胰岛素中氨基酸序列,进而推断基因中脱氧核苷酸序列来合成新胰岛素基因。(3)植物基因工程最惯用转化方法是农杆菌转化法。(4)限制酶识别特定核苷酸序列,产生特定黏性末端,而DNA连接酶对所连接DNA两端碱基序列却没有专一性要求。(5)生产自然界原来没有蛋白质需要用到蛋白质工程、基因工程等技术。第93页答案:(1)蛋白质预期功效(2)依据新胰岛素中氨基酸序列,推测出其基因中脱氧核苷酸序列,然后利用DNA合成仪来合成新胰岛素基因(4)农杆菌转化法(5)蛋白质工程基因工程第94页12.(·广州质检)控制哺乳动物性别对于畜牧生产有着十分主要意义。当前,分离精子技术是有效性别控制方法。比如:牛X精子DNA含量比Y精子高出4%左右,利用这一差异人们借助特殊仪器将它们分离开来,再经过胚胎工程技术就可培育出所需性别试管牛(如图所表示)。第95页依据以上信息回答以下相关问题。(1)试管动物技术通常是指经过人工操作使卵子和精子在体外条件下
和受精,受精卵经过培养发育为早期胚胎后,再经胚胎移植产生后代技术。(2)图中过程①通常采取
技术。在这个过程中
精子与卵子相遇时,首先发生
反应释放出相关酶直接溶解卵丘细胞之间物质。预防多精入卵生理反应有
。第96页(3)胚胎移植时,受体应处于适合生理情况,此时可利用激素对受体进行
处理。另外,受体对移入子宫外来胚胎基本上不发生
反应,这为胚胎在受体内存活提供了可能。(4)为了确保得到所需性别试管牛,往往需要对移植前胚胎进行性别判定,请举出两种对早期胚胎进行性别判定方法(只需写知名称或简明原理)。
。第97页解析:(1)人工采集卵子与精子不能够直接收精,精子需要经过获能处理,卵子需要再培养发育到减Ⅱ中期才可受精。(2)精卵结合时,首先发生顶体反应放出相关酶直接溶解卵丘细胞之间物质,便于精子进入,同时经过透明带反应和卵黄膜封闭作用预防其它精子再进入。第98页(3)受体对移入子宫外来胚胎基本上不发生免疫排斥,这是胚胎移植生理基础。胚胎移植时,为使受体、供体生理情况相同,便于胚胎移植,需要用激素同期发情处理。(4)判定胚胎性别最好方法是对胚胎细胞染色体分析,当然也可利用Y染色体上基因制成探针检测Y染色体存在。第99页答案:(1)成熟(2)体外受精获能顶体透明带反应和卵黄膜封闭作用(3)同期发情免疫排斥(4)DNA分子杂交技术(利用基因探针判定)、分析胚胎细胞染色体组型第100页13.(·南通、扬州、泰州联考)降钙素是一个多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人降钙素活性很低,半衰期较短。某科学机构为了研发一个活性高、半衰期长新型降钙素,从预期新型降钙素功效出发,推测对应脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基DNA单链,两条链经过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,取得双链DNA,过程如图所表示:第101页在此过程中发觉,合成较长核苷酸单链易产生缺失碱基现象。分析回答以下问题:第102页(1)Klenow酶是一个
酶,合成双链DNA有
个碱基对。(2)取得双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点—G
AATTC—)和BamHⅠ(识别序列和切割位点—G
GATCC—)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中,筛选含重组质粒大肠杆菌并进行DNA测序验证。第103页①大肠杆菌是理想受体细胞,这是因为它
。②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切目标是
。③要进行重组质粒判定和选择,需要大肠杆菌质粒中含有
。第104页(3)经DNA测序表明,最初取得多个重组质粒,均未发觉完全正确基因序列,最可能原因是
。(4)上述制备该新型降钙素,利用当代生物工程技术是
。第105页解析:每种限制酶特异识别专一DNA序列,并在切割位点将其准确切割。比如,EcoRⅠ切割GAATTC序列,切割位点在G与A之间。细菌将本身DNA甲基化修饰,预防了被本身核酸内切酶降解。这些甲基化基团被装到DNA腺嘌呤或胞嘧啶上(依细菌种类而定),使限制酶不能与DNA序列结合,但又不影响这些DNA序列上遗传信息正常识别与表示。每种细菌都有一个或几个用来切割特异DNA序列限制酶,还有与限制酶配正确甲基转移酶,用来预防限制酶降解细菌基因中对应序列。第106页答案:(1)DNA聚合126
(2)①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少②确保目标基因和载体定向连接(或预防目标基因和载体在酶切后产生末端发生任意连接)③标识基因(3)合成核苷酸单链仍较长,产生缺失碱基现象(4)蛋白质工程
第107页14.(·揭阳模拟
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