第五章-血型与输血学检验

KEYPOINTS

1.Theintroductionaboutbloodgroup,bloodgroupantibodiesandtheclinicalvaluationofdifferentbloodcellmarkers.2.ThemeasurementofABOantigen/antibody,Rhantigen/antibody,irregularantibodyandHLAantigen,thetestingofbloodcellandserummarkersunderdifferentclinicalconditions.3.Reasonabletransfusionandbloodcomponenttherapyisthesignofmoderntransfusion,thetraditionalandnon-traditionalclinicalapplicationofdifferentbloodcomponents.4.Thetestingofbloodcellandserummarkersbeforeandafterstemcelltransplantation.5.Thetechnologyandapplicationaboutautologoustransfusion,therapeutichematopheresisandtherapeuticbloodcomponentsexchange,thetestingneededtopreventadverseeffectsofbloodtransfusionbeforetransfusion.第二页，共七十页。血型、血型抗原(kàngyuán)与抗体第一节红细胞血型第二节红细胞血型检测技术第三节白细胞血型第四节血小板血型第五节新生儿溶血病第六节临床输血第七节发展趋势主要内容第三页，共七十页。血型(xuèxíng)、血型(xuèxíng)抗原与抗体

血型是人类血液的主要特征之一，表达了血液各种(ɡèzhǒnɡ)成分的遗传性状。血型抗原分类1.红细胞血型抗原:ABO、Rh、MNS等2.白细胞血型抗原:CD、HLA等3.血小板血型抗原:HPA等4.其他血型抗原第四页，共七十页。血型(xuèxíng)抗原第五页，共七十页。完全抗体(kàngtǐ)(completeantibody)

在血型抗原物质刺激下可形成，与红细胞生理盐水悬液混合后能引起红细胞凝集的特异性抗体。血型(xuèxíng)抗体不完全抗体(low-orderantibody)

只可使红细胞致敏而不能使红细胞凝集的抗体。血型抗体与红细胞的表面抗原结合后，产生(chǎnshēng)血管内或血管外溶血。血型抗体(Bloodgroupantibody)在血型抗原物质刺激下可形成的免疫球蛋白。红细胞血型抗体可分为完全抗体和不完全抗体。第六页，共七十页。第一节红细胞血型(xuèxíng)是红细胞上的遗传性标志(biāozhì)。包括ABO、Rh、MNS、P、Lutheran、Kell等。第七页，共七十页。一、ABO血型(xuèxíng)系统

1901年，Landsteiner发现了人类的第一个血型(xuèxíng)系统——ABO血型(xuèxíng)系统，含抗原成分不同将人的红细胞分成A、B、O和AB四种血型(xuèxíng)。第八页，共七十页。ABO血型(xuèxíng)合成

第九页，共七十页。血型物质存在的临床应用：a.测定唾液(tuòyè)中的血型物质辅助鉴定血型；b.中和ABO血型系统中的“天然抗体”；c.预测胎儿ABO血型等。发生及分布:胎儿在5～6周已可测出，表达(biǎodá)相对稳定。存在于多种细胞的细胞膜和其他体液中。ABO血型分布及存在(cúnzài)的意义第十页，共七十页。ABO血型(xuèxíng)系统独特的性质1.血清存在反应(fǎnyìng)强的抗体。2.组织细胞及各种体液中存在着ABH物质。第十一页，共七十页。ABO亚型红细胞上的A抗原(kàngyuán)第十二页，共七十页。1.孟买型：无ABH抗原,血清(xuèqīng)中有其抗体2.B（A）型和A（B）型：红细胞上同时存在B抗原和很弱的A抗原，容易误判为AxB型。

其他(qítā)特殊类型的ABO亚型

第十三页，共七十页。

ABO血型(xuèxíng)的遗传第十四页，共七十页。第十五页，共七十页。二、Rh血型(xuèxíng)系统概述

抗Rh抗体一般指抗-D。Rh血型(xuèxíng)抗原及抗体1.Rh抗原：含D、C、E、c和e五种，D抗原性最强。

2.Rh抗体：主要通过输血或妊娠免疫而产生。Rh抗体临床意义：引起输血反应或新生儿溶血病。

第十六页，共七十页。亮谷丝苏甘丝胺酸苏胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第十七页，共七十页。亮谷丝苏甘丝胺酸苏胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第十八页，共七十页。Rh血型(xuèxíng)引起的新生儿溶血第十九页，共七十页。三、其它(qítā)血型１.P血型系统:

P抗原除存在于红细胞，还存在于纤维母细胞和淋巴细胞上。通常不引起新生儿溶血(rónɡxuè)病和溶血(rónɡxuè)性输血反应。２.Kell血型系统：

主要抗原是K和k，引起严重溶血性输血反应和新生儿溶血病。３.Kidd血型系统：抗原为Jka，Jkb。第二十页，共七十页。第二节红细胞血型检测(jiǎncè)技术凝集反应（agglutination）沉淀(chéndiàn)反应（precipitation）溶血反应（hemolysis）第二十一页，共七十页。一、凝集反应

第二十二页，共七十页。二、沉淀(chéndiàn)反应第二十三页，共七十页。1.单扩与双扩原理(yuánlǐ)第二十四页，共七十页。2.对流(duìliú)免疫电泳第二十五页，共七十页。三、溶血(rónɡxuè)反应（hemolysis）第二十六页，共七十页。一、红细胞血型(xuèxíng)鉴定ABO血型(xuèxíng)鉴定

Rh血型鉴定MN血型鉴定第二十七页，共七十页。ABO血型(xuèxíng)鉴定1.正向定型(dìngxíng)2.反向定型第二十八页，共七十页。3．结果(jiēguǒ)判定正定型（细胞定型）抗-A抗-B抗-A，B反定型（血清定型）ACBCOC检测结果—

—

—++—

O+—+—+—

A—++

+—

—

B+++

—

—

—

AB第二十九页，共七十页。（二）Rh血型(xuèxíng)鉴定1．原理:（1）单克隆混合试剂检测法用Rh各抗血清（IgM+IgG型）试剂通过凝集反应对红细胞上Rh抗原进行鉴定。（2）酶介质检测法酶介质可破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面负电荷，减少细胞间的静电排斥力，使细胞间的距离缩小，有利于IgG型小分子特异性Rh血型抗体与红细胞上的Rh抗原反应，形成(xíngchéng)肉眼可见的凝集。返回(fǎnhuí)第三十页，共七十页。（三）MN血型(xuèxíng)鉴定1．原理:用IgM类特异性抗M、抗N单克隆血清(xuèqīng)来鉴定红细胞上有无相应的M抗原和/或N抗原。抗-M抗-N血型基因型＋－＋－＋＋MNMNMMNNMN第三十一页，共七十页。二、交叉(jiāochā)配血实验

概念分类

1.“主侧”配血2.“次侧”配血3.自身(zìshēn)对照第三十二页，共七十页。二、交叉(jiāochā)配血实验技术1.盐水介质(jièzhì)法

2.酶介质法

3.抗人球蛋白介质法

第三十三页，共七十页。二、交叉配血实验(shíyàn)技术4.凝聚(níngjù)胺法5.微柱凝胶免疫技术

第三十四页，共七十页。第三节白细胞血型(xuèxíng)1.包括红细胞血型抗原2.白细胞本身所特有(tèyǒu)的血型抗原3.人类白细胞抗原（HLA）第三十五页，共七十页。一、HLA系统基因、抗原(kàngyuán)结构HLA基因型:位于6号染色体短臂6p21.3区域。HLA抗原１.分为(fēnwéi)HLA-Ⅰ类分子２.HLA-Ⅱ类分子第三十六页，共七十页。HLA抗原临床(línchuánɡ)应用HLA多态性的研究;器官和骨髓移植前组织相容性配型;亲子鉴定;HLA与某些(mǒuxiē)疾病的关联;遗传学方面。第三十七页，共七十页。二、HLA系统抗原(kàngyuán)的检测方法１.HLA血清学技术(微量淋巴细胞毒试验)分型血清(xuèqīng)中含有的抗特定HLA抗原的细胞毒抗体与待检淋巴细胞膜表面的HLA抗原结合后，在补体的参与下损伤细胞膜，经伊红或台盼蓝染色后，观察细胞是否被染色，了解细胞损伤、死亡的情况。第三十八页，共七十页。二、HLA系统抗原的检测(jiǎncè)方法２.HLA的分子生物学检测：PCR-SSP（PCR序列特异性引物）PCR-RFLP（PCR限制性片段长度(chángdù)多态性）PCR-SBT（PCR-直接测序分型

）第三十九页，共七十页。三、粒细胞血型(xuèxíng)分布：中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞。分类：

１.HNA-1抗原：目前发现的唯一具有多态性的粒细胞抗原系统。

２.HNA-2抗原：其中HNA-2a具有临床意义。３.HNA-3抗原：其中HNA-３a表达于淋巴细胞、血小板、内皮细胞、脾脏(pízàng)、肾脏、胎盘细胞，是粒细胞聚集因子，与输血相关性肺损伤相关。第四十页，共七十页。(一)粒细胞抗原抗体(kàngtǐ)检测方法1.血清学方法(fāngfǎ)：a.粒细胞凝集试验b.单克隆抗体特异性粒细胞抗原捕获试验c.粒细胞免疫荧光试验d.流式细胞术2.DNA分型技术:PCR-RFLP、PCR-SSP等。第四十一页，共七十页。（二）粒细胞抗体的临床(línchuánɡ)应用１.新生儿同种免疫粒细胞减少症2.非溶血性发热性输血反应3.输血相关性肺损伤(sǔnshāng)4.粒细胞输注无效5.自身免疫性粒细胞减少症第四十二页，共七十页。第四节血小板血型(xuèxíng)第四十三页，共七十页。第四十四页，共七十页。一、血小板同种(tónɡzhǒnɡ)抗体同种血小板抗体一般由输血、妊娠或骨髓移植等免疫刺激而产生。最常见的抗体是HRA-lb和5b抗体。这和相应(xiāngyīng)HPA抗原在群体中的分布频率有关。第四十五页，共七十页。二、血小板血型抗原和抗体的临床(línchuánɡ)应用1.新生儿同种(tónɡzhǒnɡ)免疫性血小板减少性紫癜2.输血后紫癜3.血小板输注无效第四十六页，共七十页。三、血小板输注的适应(shìyìng)证及禁忌证

1．预防性血小板输注:(1)各种慢性血小板生成不良性疾病。(2)血小板低下并伴有导致血小板破坏或消耗增加的因素存在。2．治疗性血小板输注:（1）血小板生成减少引起的出血（2）大量输血所致的血小板稀释(xīshì)性减少（3）脾肿大（4）感染和弥散性血管内凝血（DIC）（5）特发性血小板减少性紫癜（ITP）（6）药物引起的免疫性血小板低下（7）血小板功能异常所致严重出血第四十七页，共七十页。（二）禁忌证1.血栓性血小板减少性紫癜（TTP）2.溶血(rónɡxuè)尿毒综合征（HUS）3.肝素诱导性血小板减少症(HIT)第四十八页，共七十页。四、特制血小板制剂(zhìjì)的临床应用1.移除大部分血浆的血小板2.洗涤血小板3.少白细胞血小板4.辐照(fúzhào)血小板5.冰冻血小板第四十九页，共七十页。第五节新生儿溶血(rónɡxuè)病第五十页，共七十页。(一)ABO新生儿溶血(rónɡxuè)病ABO-HDN是由于母婴血型不合(bùhé)，母体的IgG抗A(B)经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。第五十一页，共七十页。(二)Rh血型引起(yǐnqǐ)的新生儿溶血第五十二页，共七十页。二、实验室检查(jiǎnchá)直接抗人球蛋白试验游离试验:是检测新生儿血清中的血型抗体。释放(shìfàng)试验:与直接抗球蛋白相同，也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。第五十三页，共七十页。三、新生儿溶血病治疗(zhìliáo)与预防1.药物治疗(zhìliáo)与血浆置换2.提早分娩3.宫内换血4.光照治疗与换血疗法5.预防第五十四页，共七十页。第六节临床(línchuánɡ)输血一、全血输血（一）适应证1．心功能不全或心力衰竭及婴幼儿、老年人慢性病体质。2．需要长期或反复输血的患者，如再障等患者。（二）禁忌证1．心功能不全或心力衰竭的贫血(pínxuè)患者。2．需要长期或反复输血患者，如再生障碍性贫血等患者。3．对血浆蛋白已致敏或对血浆内某种反应原敏感的患者。4．因以往输血或妊娠已产生白细胞或血小板抗体的患者。5．血容量正常的慢性贫血患者。6．可能施行骨髓移植及其它器官移植的患者。第五十五页，共七十页。二、成分(chéngfèn)输血概念适应证1．补充血容量2．提高携氧能力3．补充凝血因子，纠正出血4．调节免疫机能，提高机体抵抗力5．维持胶体渗透压6．有害物质的排除(páichú)（换血或血浆置换）禁忌证:无明确的输血适应证就是禁忌证。第五十六页，共七十页。成分输血(shūxuè)的优点1．制剂(zhìjì)容量小，纯度高，治疗效果好2．针对性强，不良反应少3．减少输血传播性疾病的发生4．便于保存，使用方便5．一血多用，节约血液资源第五十七页，共七十页。三、自体输血(shūxuè)概念优点1.避免经输血传播的疾病。2.避免同种异体输血产生的同种免疫反应。3.反复放血可刺激红细胞再生，促进患者术后造血速度加快。4.避免异体血液(xuèyè)对受血者免疫功能的抑制。5.缓解血源紧张的矛盾。第五十八页，共七十页。自体输血(shūxuè)种类根据血液来源和保存方法主要(zhǔyào)分为：1.贮存式自体输血2.稀释式自体输血3.回收式自体输血第五十九页，共七十页。四、干细胞移植(yízhí)第六十页，共七十页。（二）移植(yízhí)流程１.供者选择与受者移植前的准备：组织配型。２.预处理预处理：超剂量化疗或放疗。３.移植物处理：(1)骨髓和异体外周血造血(zàoxuè)干细胞的处理：去除骨髓中的红细胞、ABO血型凝集原等。(2)自体移植物的处理：体外净化自体移植物。４.移植物的输注：静脉滴注，但不能超过3h。５.植活的检测：靠检测受者血细胞和免疫学的标记。第六十一页，共七十页。（三）移植(yízhí)并发症及其防治1.感染2.移植物抗宿主病（GVHD3.巨细胞病毒（CMV）感染及相关性间质性肺炎（CMV-IP）4.肝静脉阻塞(zǔsè)病（VOD）5.出血性膀胱炎6.移植复发7.其他并发症第六十二页，共七十页。五、血液(xuèyè)单采和置换治疗(zhìliáo)性血液成分单采术1.治疗性红细胞单采术2.治疗性白细胞单采术3.治疗性血小板单采术治疗性血液成分置换术

1.治疗性血浆置换术2.治疗性红细胞置换术第六十三页，共七十页。六、输血(shūxuè)不良反应１.概念：