2023届北京市顺义区第九中学高三下学期第五次调研考试生物试题试卷含解析

2023届北京市顺义区第九中学高三下学期第五次调研考试生物试题试卷注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．用含32P的培养基培养醋酸杆菌一段时间，能在醋酸杆菌中检测出放射性的化合物是（）A．油脂 B．腺苷 C．核苷酸 D．丙酮酸2．免耕法是指农业生产中不松土或少松土，收获时只收割麦穗或稻穗等部位，而将经过处理后的农作物秸秆和残茬保留在农田地表，任其腐烂。提倡免耕法取代传统松土措施的原因不包括（）A．增加土壤的透气性，促进根系的有氧呼吸B．有利于水土保持，能减少沙尘暴的发生C．减少土壤微生物对CO2的排放量，有效缓解温室效应D．减少了农田生态系统的物质输出，使土壤肥力得以提高3．某家系的遗传系谱图及部分个体基因型如图所示，A1、A2、A3是位于X染色体上的等位基因。下列推断不正确的是（）A．Ⅱ-2基因型为XA1XA2的概率是1/2B．Ⅲ-1基因型为XA1Y的概率是1/2C．Ⅲ-2基因型为XA1XA2的概率是1/8D．Ⅳ-1基因型为XA1XA1概率是1/84．一种感染螨虫的新型病毒，研究人员利用放射性同位素标记的方法，以体外培养的螨虫细胞等为材料，设计可相互印证的甲、乙两组实验，以确定该病毒的核酸类型。下列有关实验设计思路的叙述错误的是A．应选用35S、32P分别标记该病毒如蛋白质和核酸B．先将甲、乙两组螨虫细胞分别培养在含同位素标记的尿嘧啶或胸腺嘧啶的培养基中C．再将病毒分别接种到含有甲、乙两组螨虫细胞的培养液中D．一定时间后离心并收集、检测病毒的放射性，以确定病毒的类型5．已知牵牛花的花色受三对独立遗传的等位基因（A和a、B和b、C和c）控制，其途径如图所示，其中蓝色和红色混合后显紫色，蓝色和黄色混合形成绿色。现有某紫花植株自交子代出现白花、黄花。据此判断下列叙述错误的是（）A．自然种群中红花植株的基因型有4种B．用于自交的紫花植株的基因型为AaBbCcC．自交子代中绿花植株和红花植株的比例可能不同D．自交子代出现的黄花植株的比例为3/646．近年来村民已逐渐认识到滥用农药的危害，停止使用有害农药，同时在农科所科研人员帮助下，向农田内放养一小批青蛙；几年来，虫害减少，粮食产量提高，农田内青蛙数目逐渐增多。有关科研人员对放养后青蛙种群的增长速率变化情况进行取样调查，获得结果如下图。则下列叙述正确的是（）A．上述情况表明农田生态系统中人的作用非常关键B．在图中C点时，青蛙种群数量达到K值，农田生态系统的物质循环和能量流动处于相对稳定状态C．在测量时期内，青蛙种群呈“J”型曲线增长D．在图中a—c段内，农田生态系统的恢复力稳定性逐渐提高二、综合题：本大题共4小题7．（9分）自2019年底被发现始，仅仅三个月的时间，新型冠状病毒（2019-nCoV）迅速蔓延并已肆虐全球，严重威胁到人类的身体健康与生命安全。研制疫苗是预防感染新型冠状病毒肺炎（COVID-19）最为有效的解决方案，是终结疫情最有力的科技武器。经过几十年的努力疫苗研制已经发展了三代。第一代疫苗指的是灭活疫苗和减毒活疫苗，通过体外培养病毒，然后用灭活的病毒刺激人体产生抗体，它是使用最为广泛的传统疫苗；第二代疫苗又称为亚单位疫苗，是通过基因工程原理获得的具有免疫活性的病原特异性结构蛋白，刺激人体产生抗体；第三代疫苗就是核酸疫苗，又称基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是将编码某一抗原蛋白的基因作为疫苗，注射到人体中，通过正常的人体生理活动产生抗原蛋白，诱导机体持续作出免疫应答产生抗体。分析回答下列问题。（1）从细胞的生命历程来说，被感染的宿主细胞的清除过程属于________，该清除过程有利于_____________________________。（2）2019-nCoV初次侵入人体后，参与该过程的免疫细胞有____________________（至少答出4种），它们直接生活的人体内环境主要是________。当2019-nCoV再次侵入时，____________会增殖分化形成浆细胞，产生大量抗体予以消灭。（3）今年2月份，国家卫健委介绍了研制新冠病毒疫苗的五条技术路线。其中腺病毒载体疫苗是将S蛋白（2019-nCoV的刺突蛋白）的基因装入改造后无害的腺病毒，送入人体，在体内产生S蛋白，刺激人体产生抗体。腺病毒载体疫苗应属于第______代疫苗。与第一代疫苗相比，基因疫苗的特点是_____________________。（4）DNA和mRNA能够成为疫苗的理论基础是_________________________。DNA疫苗需要经过________才能引起免疫反应。在基因疫苗中，________的安全性更有优势，它可以被正常细胞降解，不会整合到人体细胞的基因组中造成难以预料的果而备受人们青睐；另外，它的研发仅需6~8周即可进入临床试验，较传统疫苗的5~6月的研发周期明显缩短，对快速应对大规模爆发性传染疾病具有重要的意义。8．（10分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。9．（10分）人体血清白蛋白在肝脏中合成，是血浆中含量最丰富的蛋白质，在临床上有着广泛的用途。如图为利用乳腺生物反应器和工程菌生产人血清白蛋白的操作流程。请回答下列问题：（1）①过程中，将人血清白蛋白基因导人绵羊受精卵和大肠杆菌所用的载体____________________（填“完全相同”“不完全相同”或“完全不相同”）。除血清白蛋白基因外，图中的基因表达载体还必须含有__________________________________（至少答出3个结构名称）。（2）进行④操作之前，需要对早期胚胎进行性别鉴定，常选取取囊胚期的__________细胞做DNA分析。对挑选出的雌性胚胎还可以采用__________技术提高胚胎利用率。上图中涉及的胚胎工程技术有_______（3）利用①⑥过程生产人血清白蛋白时，常用反转录法获取目的基因，请写出用此法获取人血清白蛋白基因的操作流程：_________________________________。由此获得的蛋白B与蛋白A活性是否相同？请作出判断并说明理由：__________，_____________________。10．（10分）患者男，48岁，发热伴寒战，入院进行血液B超及CT检查，疑似肝脓肿。其中细菌性肝脓肿的主要病原菌是：大肠埃希菌、克雷伯菌、链球菌、金黄色葡菊球菌、厌氧菌等。近年来，克雷伯杆菌感染导致的细菌性肝脓肿患者比例有增高的趋势，为确定致病原因需要进行细菌的培养及药敏实验检查病原体种类。请回答下列问题：（1）细菌培养一般在30~37℃，pH调至____________，进行无菌操作。对接种环等金属用具，直接在洒精灯火焰的____________灼烧，可以迅速彻底地灭菌。（2）微生物接种的方法很多，最常用的方法有____________法。虽然这些技术的操作方法各不相同，但是，其核心都是防止杂菌的污染，保证____________________________________。（3）区分细菌种类可以通过多种途径，如生化试验IMVC试验可用于肠道杆菌鉴定，其中大肠埃希菌、克雷伯菌鉴定结果分别是++--.--++；还可以通过菌落特征，如菌落的____________等的不同来区别。常用来统计样品中活菌数目的方法是_____________，测定细菌数量的方法还有____________法，无论哪种方法得到的细菌数量都是____________值。11．（15分）三黄鸡因羽、胫（小腿）、喙均为黄色而得名，因在烹饪中具有良好的颜色效果而具有一定的经济价值。育种工作者为了研究鸡的羽色和胫色的遗传规律，选择多个品种进行了三组杂交实验，结果如下。已知控制羽色的基因（A/a）位于常染色体上，胫色浅色（黄色）对深色为显性（相关基因为B/b）。请回答下列问题：杂交组合亲代F1♂♀♂♀一黑羽深胫黑羽深胫黑羽深胫：黄羽深胫=3：1黑羽深胫：黄羽深胫=3：1二黑羽浅胫黄羽深胫黑羽浅胫：黑羽深胫：黄羽浅胫：黄羽深胫=1：1：1：1黑羽浅胫：黑羽深胫：黄羽浅胫：黄羽深胫=1：1：1：1三黑羽深胫黄羽浅胫黑羽浅胫：黄羽浅胫=1：1黑羽深胫：黄羽深胫1：1（1）羽色黑色对黄色为__________性。若B、b基因位于常染色体上，则杂交组合__________的结果不会出现。（2）若B、b基因位于Z染色体上，则杂交组合二的亲本基因型为___________。（3）进一步研究发现，B、b基因位于Z染色体上，且某种饲料会影响黑色素的产生，使黄羽、浅胫变为黑羽、深胫。现有一只黑羽深胫母鸡和若干已知基因型的公鸡。请完善关于确定这只母鸡基因型的部分实验设计。①让该母鸡与基因型为__________的公鸡多次杂交，用普通饲料喂养子代，观察并统计子代表现型及比例（不考虑性别）。②预期结果：若子代__________，则该母鸡基因型为aaZBW；若子代__________，则该母鸡基因型为AaZbW。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解题分析】

32P具有放射性，细胞吸收的磷酸盐可用于合成含有P的物质或结构，若用含32P的磷酸盐的营养液培养醋酸杆菌，一段时间后，含有P的物质或结构都可能出现放射性。【题目详解】A、油脂的元素组成是C、H、O，不含P，A错误；B、腺苷由腺嘌呤和核糖构成，不含P，B错误；C、核苷酸是构成核酸的基本单位、含有P，C正确；D、丙酮酸的结构式是CH3COCOOH、不含P，D错误。故选C。【题目点拨】本题考查细胞中的元素和化合物的知识，考生识记细胞中常见几种化合物的元素组成是解题的关键。2、A【解题分析】

由题意可知，收获时只收割麦穗或稻穗等部位，而将经过处理后的农作物秸秆和残茬保留在农田地表，任其腐烂，因此可以提高土壤肥力，也可减少土壤CO2的排放量，地表破坏少，减少沙尘。【题目详解】A、免耕法不松土或少松土，不能增加土壤的透气性，A错误；B、地表破坏少，有利于水土保持，能减少沙尘暴的发生，B正确；C、由题意可知，将经过处理后的农作物秸秆和残茬保留在农田地表，因此减少土壤微生物对CO2的排放量，有效缓解温室效应，C正确；D、减少了农田生态系统的物质输出，使土壤肥力得以提高，D正确。故选A。3、C【解题分析】

分析题文描述可知：等位基因A1、A2、A3位于X染色体上，它们所控制的性状遗传表现为伴性遗传。父亲将X染色体遗传给女儿，将Y染色体遗传给儿子，母亲的两条X染色体传递给后代的几率相等。据此，依据图示中呈现的Ⅰ-1、Ⅰ-2和Ⅱ-2的基因型和伴性遗传规律来推知相应子代个体的基因型，进而判断各选项的正误。【题目详解】A、Ⅰ-1的基因型为XA1Y，Ⅰ-2的基因型为XA2XA3，二者所生女孩的基因型及其比例为XA1XA2∶XA1XA3＝1∶1，因此Ⅱ-2基因型为XA1XA2的概率是1/2，A正确；B、II-2的基因型为1/2XA1XA2、1/2XA1XA3，产生配子为1/2XA1、1/4XA2、1/4XA3，因此Ⅲ-1的基因型为XA1Y的概率是1/2，B正确；C、II-3基因型为1/2XA1XA2、1/2XA1XA3，产生配子为1/2XA1、1/4XA2、1/4XA3，II-4的基因型为XA2Y，Ⅲ-2的基因型及其比例为1/2XA1XA2、1/4XA2XA2、1/4XA3XA2，可见，Ⅲ-2基因型为XA1XA2的概率是1/2，C错误；D、综上分析可推知：III-1基因型为1/2XA1Y、1/4XA2Y、1/4XA3Y，产生含X的配子为1/2XA1、1/4XA2、1/4XA3，III-2基因型为1/2XA1XA2、1/4XA2XA2、1/4XA2XA3，产生配子为1/4XA1、5/8XA2、1/8XA3，因此IV-1为XA1XA1的概率是1/8，D正确。【题目点拨】本题结合系谱图，考查伴性遗传的相关知识，要求考生识记伴性遗传的类型及特点，能根据图中信息推断出相应个体的基因型及概率，再结合所学的知识准确判断各选项。4、A【解题分析】根据题干信息分析，本实验的目的是确定病毒核酸的类型是DNA还是RNA，因此应该分别标记DNA和RNA特有的碱基，即分别用放射性同位素标记尿嘧啶和胸腺嘧啶，A错误；由于病毒是没有细胞结构的，必须寄生于活细胞中，因此先将甲、乙两组螨虫细胞分别培养在含同位素标记的尿嘧啶或胸腺嘧啶的培养基中，B正确；再将病毒分别接种到含有甲、乙两组螨虫细胞的培养液中，C正确；一定时间后离心并收集、检测病毒的放射性，以确定病毒的类型，D正确。5、C【解题分析】

据图分析，白色牵牛花基因中不含有A、C，基因型可能为aabbcc或aaB_cc，蓝色牵牛花基因型为aa__C_、黄色牵牛花基因型为A_bbcc、红色牵牛花基因型为A_B_cc，则紫花牵牛花的基因型为A_B_C_，绿色牵牛花基因型为A_bbC_。【题目详解】A、根据题图分析，红色必须同时含有A、B，且没有C，基因型为AABBcc、AaBBcc、AABbcc、AaBbcc，A正确；B、某紫花植株A_B_C_自交子代出现了白花（aabbcc或aaB_cc）和黄花（A_bbcc），说明该紫花植株基因型为AaBbCc，B正确；C、AaBbCc自交，子代绿花（A_bbC_）的比例为3/4×1/4×3/4=9/64，红花（A_B_cc）的比例为3/4×3/4×1/4=9/64，C错误；D、AaBbCc自交，子代黄花植株（A_bbcc）的比例为3/4×1/4×1/4=3/64，D正确。故选C。6、A【解题分析】

种群的数量变化曲线：①“J”型增长曲线条件：食物和空间条件充裕、气候适宜、没有敌害。（理想条件下，实验室）无限增长曲线，呈指数增长的曲线，与密度无关;②“S”型增长曲线条件：资源和空间都是有限的，与密度有关用N表示种群数量，当Ｎ＝Ｋ／２时，种群增长速率最大，理论上最适合捕捞(图中C点)Ｎ＞Ｋ／２时，种群增长速率降低，Ｎ＜Ｋ／２时，种群增长速率增大.。联系实际：保护珍贵动物及消灭害虫时，注意Ｋ值，即在保护（消灭）种群数量的同时还要扩大（减小）他们的环境容纳量。【题目详解】A、在人工生态系统中，如农田生态系统中，人的作用非常关键，A正确；B、在图中e点增长速率为0，表明青蛙种群数量达到K值，农田生态系统的物质循环和能量流动处于相对稳定状态，B错误；C、在测量时期内，青蛙种群呈“S”型曲线增长，C错误；D、在图中a～c段内，青蛙种群的增长速率不断增大，说明青蛙的数量在快速增多，此时虫害减少，粮食产量提高，生物多样性增大，因此，农田生态系统的抵抗力稳定性逐渐提高，而不是恢复力稳定性逐渐提高，D错误。故选A。二、综合题：本大题共4小题7、细胞凋亡维持生物内部环境稳定，抵御外界各种因素干扰吞噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、浆细胞、效应T细胞血浆、淋巴和组织液B淋巴细胞和记忆细胞三毒副作用更小特异性更强，免疫应答更持久，有效性更高中心法则、所有生物共用一套遗传密码转录和翻译产生相应的抗原蛋白mRNA疫苗【解题分析】

人体中的特异性免疫调节可以分为体液免疫和细胞免疫两种，对病毒的免疫主要依靠特异性免疫来完成。当病毒侵入宿主细胞的时候，机体通过细胞免疫将靶细胞裂解，这种细胞裂解属于细胞凋亡。人体中的免疫细胞包括吞噬细胞和淋巴细胞两类，主要存在于人体的内环境中。【题目详解】（1）感染的宿主细胞的清除属于自身基因诱导下完成的细胞凋亡；该过程将入侵的病原体及时清除有利于维持生物内部环境稳定，抵御外界各种因素干扰；（2）当病毒初次侵入人体，主要由吞噬细胞、T细胞、B细胞、浆细胞和效应T细胞来进行免疫；这些细胞主要分布与血浆、淋巴和组织液中，以便对各处的病原体进行及时的识别与清除；当同一种抗原再次入侵的时候，则主要依靠B细胞和第一次免疫产生的记忆细胞增值分化形成浆细胞；（3）腺病毒载体疫苗是将S蛋白的基因装入改造后无害的腺病毒，按照题干疫苗的分类，其应该归为基因疫苗即第三代疫苗；第三代疫苗同第一代疫苗相比，毒副作用更小，使用针对性的基因或RNA做成的模板当疫苗，特异性更强，免疫应答更持久，有效性更高；（4）DNA和mRNA能够成为疫苗是由于其可以进行转录和翻译产生抗原蛋白，除此之外还因为各种生物共用一套遗传密码，所以翻译的蛋白质具有特异性；DNA疫苗本身并不能当作抗原，而是经过转录和翻译之后产生的蛋白质才能当作抗原；在基因疫苗中，由基因转录的相应的抗原蛋白mRNA疫苗本质属于RNA，本身不会整合到人体的基因组中去，安全性较高。【题目点拨】该题的难点是借由题干，分析第三代疫苗发挥作用的机制及相比较于前两代疫苗的优点。基因疫苗本身并不具有抗原的特性，也没有毒性，因此将基因疫苗注射到人体中安全性较高，后续由DNA或RNA进行转录或翻译后产生的特定的蛋白质才是具有抗原特性的物质。8、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解题分析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【题目详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新蛋白质A的重组质粒，仅含蛋白A的重组质粒和空白对照（仅含空质粒，以排除空质粒可能产生的影响）。因此，将含有新蛋白A基因的重组质粒和含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用抗原——抗体杂交方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较抑菌圈的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，是因为蛋白A基因的发酵产物对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高。【题目点拨】本题主要考查基因工程、PCR技术等相关知识，考生需要理解和记忆相关知识，并学会应用所学知识正确答题。9、不完全相同启动子、终止子、标记基因、复制原点滋养层胚胎分割早期胚胎培养、胚胎移植先从肝脏细胞中提取血清白蛋白mRNA，再在逆转录酶的催化作用下得到血清白蛋白cDNA否血清白蛋白是分泌蛋白，需要内质网和高尔基体加工后才具有生物活性；大肠杆菌是细菌，细胞内没有内质网和高尔基体，无法对其进行加工，故蛋白B与蛋白A活性不同【解题分析】

分析图示：①是基因表达载体的构建，②⑥是将目的基因导入受体细胞，③早期胚胎培养，④胚胎移植，⑤是胚胎培养到个体发育过程。【题目详解】（1）①过程中，将人血清白蛋白基因导人绵羊受精卵和大肠杆菌所用的载体不完全相同；除血清白蛋白基因外，图中的基因表达载体还必须含有启动子、终止子、标记基因、复制原点。（2）进行④操作之前，需要对早期胚胎进行性别鉴定，常选取取囊胚期的滋养层细胞做DNA分析；对挑选出的雌性胚胎还可以采用胚胎分割技术提高胚胎利用率；上图中涉及的胚胎工程技术有早期胚胎培养、胚胎移植。（3）利用①⑥过程生产人血清白蛋白时，常用反转录法获取目的基因，用此法获取人血清白蛋白基因的操作流程：先从肝脏细胞中提取血清白蛋白mRNA，再在逆转录酶的催化作用下得到血清白蛋白cDNA；由此获得的蛋白B与蛋白A活性不同，因为血清白蛋白是分泌蛋白，需要内质网和高尔基体加工后才具有生物活性；大肠杆菌是细菌，细胞内没有内质网和高尔基体，无法对其进行加工，故蛋白B与蛋白A活性不同。【题目点拨】本题结合转基因克隆羊的培育过程图，考查基因工程的原理及技术的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作过程；识记动物细胞培养的过程及培养条件。10、中性或微碱性充分燃烧层平板划线法和稀释涂布平板培养物的纯度大小、形状、颜色稀释涂布平板法显微镜直接计数估计【解题分析】

统计细菌数量的方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数，在统计菌落数目时，采用稀释涂布平板法来培养细菌。当样品的稀释度足够高时培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个细菌，但菌落数往往比活菌的试剂数目低，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。另一种方法是直接计数法，这种方法要借助显微镜，且统计的数目也包括死亡的细菌。【题目详解】（1）微生物生命活动需要一定的条件，不同的微生物需要不同的培养温度和pH，细菌生活的温度一般在