立式压力蒸汽灭菌器效果验证方案

重庆西南制药二厂有限责任公司页 数共8页文件编码：SVP-09002-00-2011文件名称立式压力蒸汽灭菌器效果验证方案制定人制定日期审核人审核日期QA审阅人审阅日期批准人批准日期受控状态分发号生效日期分发部门口质量部QA口质量部QC口技术部口综合部口供销部口设备工程部口动力车间口EHS部口财务部口生产部口一车间口二车间口三车间口制剂车间文件历史日期变更原因变更前文件版本号

验证小组人员名单组 长姓名职务/职称职责李辉质量部负责验证方案和报告的审核工作；负责组织实施灭菌效果确认组 员姓名职务/职称职 责付娜QC负责验证方案和报告的起草；负责实施灭菌效果确认；负责进行检测；统计检测数据；陈静QC主管负责验证方案和报告的起草；负责实施灭菌效果确认；负责进行检测；统计检测数据；黄福鹏QA协调验证工作批准人批准日期目录序号项目名称页码序号项目名称页码目的„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 4验证类别„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 4验证时间验证依据验证内容接受标准验证的实施步骤8 偏差及异常处理„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 89 对验证方案的意见及批准„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 8批准人批准日期

1目的：提供足够的数据和文件依据，确认立式压力蒸汽灭菌器的可靠性，确保微生物学检验及环境监测数据的真实可靠。2验证类别：同步验证3验证时间：2011年12月4验证依据：《药品生产质量管理规范》（2010年修订）；《药品生产验证指南》（2003年修订）；《验证管理规定》SMP-10002-035.验证可接受标准验证项目验证可接受标准验证方法细菌挑战性试验灭菌后指示菌应全部死亡微生物限度检查121C压力烝汽灭菌化学指示卡变色反应灭菌后指示卡颜色应达到或深于标准颜色（黑色）目测法生物指示剂灭活实验灭菌后指示菌应全部被灭活培养法6.验证的实施步骤试验条件检测用仪表确认名称型号编号校验日期校验结论有效时间压力表结论：检查人/日期复核人/日期7.1.2检测用菌种、指示剂（卡）等的确认名称规格来源枯草芽抱杆菌大肠埃希菌沙门菌铜绿假单抱菌金黄色匍萄球菌嗜热脂肪芽抱杆菌生物指示剂枯草杆菌黑色变种芽胞菌片121C压力烝汽灭菌化学指示卡结论：检验人/日期： 复核人/日期：批准人批准日期7.1.3菌培养物制备：分别取枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌1白金耳于装有9ml营养肉汤培养基的试管中，于30〜35°C培养18〜24小时后，出现浑浊,说明各种菌均有生长，即得枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌的培养物，备用。取样方法：取样点：立式压力蒸汽灭菌器内上、中、下三部位各取样点（见物品放置图）物品放置图取样频次：每个试验进行三次。7.3 生物指示剂灭活试验：枯草杆菌黑色变种芽胞菌片（115C灭菌20分钟）验证方法：取9张枯草杆菌黑色变种芽胞菌片按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于115C灭菌20分钟后，取出于30~35C培养24~48小时。同时取两片未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片作对照，分别于24小时和48小时观察，记录结果。结果判定：当加入未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后显混浊，而灭菌后的枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养肉汤经培养后清亮，无混浊，说明枯草杆菌黑色变种芽胞菌全部被灭活。验证结果：批准人批准日期

取样点标准培养后现象结论第一次第二次第三次1培养基清亮、无混浊23456789阳性对照1号培养基混浊2号检验人/日期：复核人/日期：嗜热脂肪芽抱杆菌生物指示剂（121°C灭菌15分钟）验证方法：取9瓶嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121C灭菌15分钟后，取出于54C培养48小时。同时取2支未灭菌的嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂作对照。结果判定：当未灭菌的嗜热脂肪芽孢杆菌生物指剂经培养后由紫色变为黄色、而灭菌后的仍为紫色时，说明嗜热脂肪芽孢杆菌全部被灭活。7.3.2.3.1验证结果：检测结果灭菌时间及温度123456789阳性对照12121C第一次15分钟第二次第三次结论：检查人/日期复核人/日期7.4 121C压力蒸汽灭菌化学指示卡变色反应试验:批准人批准日期验证方法：将每组9张“121°C压力蒸汽灭菌化学指示卡”按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121C灭菌15和30分钟各一次后，取出与化学指示卡自带标准颜色（黑色）比较。结果判定：121C压力蒸汽灭菌化学指示卡灭菌后颜色如达到或深于标准颜色（黑色），则本试验合格。验证结果：检测结果灭菌时间及温度123456789121C15分钟第一次第二次第三次121C30分钟第一次第二次第三次结论：检查人/日期复核人/日期7.5细菌挑战性试验：验证方法：将枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌的培养物各9支培养物按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121C灭菌30分钟后，取出，即得枯草芽抱杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单抱菌、金黄色葡萄球菌的灭菌培养物。取各灭菌培养物lml,置直径90mm的灭菌平皿中，将预先准备好的营养琼脂培养基熔化，冷至约45C时，倾注上述平皿各约15-20mL，混匀待凝。将各凝固平板倒置于30〜35C培养箱中培养，分别于24小时和48小时观察，记录结果，每管平行测定2份。同时用两个灭菌平皿各加注0.9%的无菌氯化钠溶液1mL作为阴性对照；并用大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌作阳性对照。结果判定：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌培养物灭菌后，经培养应无菌生长，则细菌挑战性试验合格。验证结果：批准人批准日期

检测结果灭菌培养物123456789阳性对照12枯草芽抱杆菌第一次第二次第三次大肠杆菌第一次第二次第三次沙门菌第一次第二次第三次铜绿假单抱菌第一次第二次第三次金黄色葡萄球菌第一次第二次第三次结论：检查人/日期复核人/日期8.异常及偏差处理在本方案实施过程中发生的任何偏差或异常情况均应详细记录，并清楚说明引起偏差或异常情况的原因及纠正结果，执行偏差管理规程SMP-01008-03。对于不需修改验证方案的调整，经验