新生儿细菌性脑膜炎病原菌分布特点及耐药性分析

新生儿细菌性脑膜炎病原菌分布特点及耐药性分析

新生儿细菌脑膜（i脑）是一种严重的疾病，死亡率很高。然而，在临床上，尤其是第三代头孢菌素，抗生素被滥用，从而导致抗生素菌株的产生，从而给临床治疗带来困难。为探寻新生儿化脑病原菌分布特点和耐药性规律,对某医院新生科诊治的新生儿化脑患儿的病原学及抗生素应用和耐药状况进行回顾性分析,现报告如下。1材料和方法1.1新生儿化脑用病湖南省儿童医院2000年1月-2005年12月所收治的疑为新生儿化脑患儿中,有156例检出了病原菌,且临床表现及辅助检查均符合化脑的诊断标准,男110例,女46例,日龄为1～28d。均无菌抽取CSF培养。1.2实验室微生物试剂药敏纸片由英国OXOID公司提供,M-H琼脂由杭州微生物试剂公司提供,哥伦比亚血平板由博赛生物研究所提供,CSF增菌管、巧克力平板、高渗平板为实验室自制。1.3菌株鉴定及药敏试验CSF经3000r/min离心10～15min后取沉渣分别接种哥伦比亚血平板、CSF增菌管、巧克力平板和高渗平板,置CO2培养箱和普通恒温培养箱36℃培养。所有菌株均以常规方法进行鉴定的同时联合采用法国生物梅里埃(API)系统鉴定。以K—B法进行药敏试验,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的标准进行判读。并用ATCC25922、ATCC25923、ATCC27853对所有鉴定用试剂及药敏分析用抗生素纸片进行质量控制,结果均符合预期结果和NCCLS颁布的药敏质控标准。2结果2.1表1显示了细菌的构成2.2革兰阴性杆菌检出情况156例新生儿脑膜炎患者中,46例出生在1周内,属于早期新生儿,110例出生2～4周,属于晚期新生儿。其中早期新生儿组CSF标本中,检出革兰阴性杆菌19株,占41.3%,主要是肺炎克雷伯菌(3株)、大肠埃希菌(5株)、产气肠杆菌(2株);革兰阳性球菌25株,占54.3%,主要是凝固酶阴性葡萄球菌;革兰阳性杆菌和白色念珠菌合计2株,占4.3%;晚期新生儿组CSF标本中,检出革兰阴性杆菌23株,占20.9%,革兰阳性球菌78株,占70.9%,其他菌种9株,占8.2%。α=0.05水平下,将两组革兰阴性杆菌所占比率进行比较,差异有显著性。2.3广告过敏的结果对121株常见细菌进行药敏试验后其耐药情况见表2。2.4革兰阳性菌种42株革兰阴性杆菌中有12株产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)(28.6%),其中大肠埃希菌3株(7.1%),肺炎克雷伯菌2株(4.8%)。103株革兰阳性球菌中有61株耐苯唑西林(59.2%)。根据表3,使用过抗生素患儿检出产耐药酶菌的比率明显高于未使用过抗生素患儿(χ2=7.68,P<0.05),尤其使用过第三代头孢菌素的患儿检出产耐药酶菌的比率显著高于后者(χ2=10.04,P<0.005)。3新生儿化脑病原菌感染情况本组资料显示:新生儿化脑病原菌主要是表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、溶血葡萄球菌、不动杆菌、肺炎克雷伯菌和其它凝固酶阴性的葡萄球菌,仅检出一例流感嗜血杆菌,没有检出脑膜炎奈瑟菌。在国外,5岁以下小儿化脓性脑膜炎病原菌以流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌为主,1988年以后,病原菌主要为肺炎链球菌和脑膜炎奈瑟菌。在我国,周仲松等报道化脓性脑膜炎病原菌主要是脑膜炎奈瑟菌、金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌;王艺等报道上海地区小儿化脓性脑膜炎病原菌主要是肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌,但29例新生儿细菌性脑膜炎的病原菌中,凝固酶阴性葡萄球菌有23例,大肠埃希菌5例,肠球菌1例,没有其它细菌。表皮葡萄球菌在外界环境中大量存在,被认为是临床污染菌之一,本组资料显示检出较多,可能由于新生儿免疫力低下,血脑屏障功能不健全,从而导致以表皮葡萄球菌为主的环境菌感染而致病。没有检出脑膜炎奈瑟菌可能是由于普遍接种了脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖菌苗;嗜血杆菌少可能是送检前大量应用抗生素,抑制了细菌在培养基上生长,也可能跟年龄段有关。金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌检出率不高可能是近年菌种构成情况有变异或地域性差异所致。检出的156株病原菌当中,阳性球菌有104株,占66.7%,说明本地区新生儿化脑病原菌以革兰阳性球菌为主,但早期新生儿组比晚期新生儿组革兰阴性杆菌检出率高,其病原菌分布与新生儿肺炎一致,提示新生儿化脑可能跟新生儿肺炎有关,临床应密切关注新生儿肺炎的发展,防止继发化脑。革兰阴性杆菌前五位菌是大肠埃希菌、不动杆菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌、产气肠杆菌。葡萄球菌感染是临床新生儿感染最常见的菌种,耐药率高。根据表2,葡萄球菌对青霉素、苯唑西林、哌拉西林等常用抗生素有较高的耐药性;临床上青霉素类药物对葡萄球菌治疗效果也常不满意。耐苯唑西林葡萄球菌达59.2%,其耐药性具有多重耐药性,临床上应注意到葡萄球菌的高感染率及其耐药性的增加。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为条件致病菌,对氨苄西林、哌拉西林有较高的耐药性。同时,在15株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中有5株产生超广谱β-内酰胺酶(ESBL),占33%。对感染革兰阴性杆菌但未产生ESBL的患者,可使用头孢噻肟、头孢曲松,对已产生ESBL的患者可使用抗生素与酶抑制的复方制剂,或选用对ESBLs稳定的抗菌药物,重症患儿可选用美罗培南。抗生素的的选择压力是患儿感染耐药菌株的危险因素。第三代头孢菌素因其对包括肺炎克雷伯菌等在内的细菌有较强抗菌活性而受到广泛应用,随着这类抗生素的大量使用甚至滥用,产酶菌的检出有增加的趋势。本文显示:使用过抗生素患儿检出β-内酰胺酶或耐苯唑西林菌比率较未使用过抗生素患儿明显增高(χ2=7.68,P<0.05),尤其在检测前使用第三代头孢菌素的患儿检出产酶菌比率,显著高于未使用第三代头孢菌素的患儿比率。综上所述,新生儿化脑病原菌主要菌株是表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、溶血葡萄球菌、不动杆、肺炎克雷伯菌和其它凝固酶阴性的葡萄