白酒中醛类物质的光度法测定

白酒中醛类物质的光度法测定摘要:在碱性条件下,醛和2,4二硝基苯肼反应生成2,4二硝基苯腙基于此原理,通过分光光度法测定白酒中醛类物质的含量,确定了方法的最佳条件,在445nm波长处具有最大吸收，化合物的摩尔吸光系数8 =4.75X104L/mol.445cm;方法的线性范围为0.02〜0.lmg/25mL;检出限为0.019mg/L;RSD(n=7)小于2.12%.测得加标回收率为97.6%〜100.3%.关键词:分光光度法;甲醛;白酒1.引言白酒在酿造过程中都会产生一定量的醛类物质，而且白酒中的醛类物质一般都为低级醛，如甲醛、乙醛等.如果醛类物质的含量较高，对饮用者的身体会造成一定的伤害，尤其是甲醛对人体内免疫水平会产生影响.国际癌症研究所(IARC)建议将甲醛列为一种可疑致癌物.因此，建立白酒中醛类物质的检测方法对生命科学的发展具有重要意义.目前已报道的测定醛类物质的方法有气相色谱法[1]、液相色谱法[2]、电化学法[3]、极谱法[4]和分光光度法[5].气相色谱法、液相色谱法、电化学法、极谱法准确度较高，但设备昂贵.分光光度法因其操作简单，灵敏度较高而应用较为广泛，但是2，4二硝基苯肼测定白酒中的醛类物质的方法未见报道.本文研究了用2，4二硝基苯肼为显色剂测定白酒中醛类物质的方法，并对该方法的测定原理、分析条件以及精密度、回收率进行了研究，获得了较为满意的结果，从而建立了测定白酒中醛类物质的新方法.本方法的最大特点是显色快速、测定准确、操作简单.2实验1原理在碱性条件下，醛与2，4二硝基苯肼反应生成2，4二硝基苯腙—橙红色化合物，在445nm波长处进行吸光度测定,根据外标法求出醛的含量.甲醛与2,4-二硝基苯肼的反应式如下：NOj NOj

2.2仪器与试剂仪器:721型紫外—可见分光光度计（上海第三分析仪器厂）.恒温水浴器.试剂：①无醛乙醇（制备）[3]:取1500mL乙醇置于2000mL蒸馏烧瓶中，加入15g2,4二硝基苯肼、0.75mL浓盐酸及几粒沸石，回流4h并放置4h,再将冷凝器改换为精馏柱，缓缓精馏.弃去初始流出液lOOmL左右及剩余液约200mL黄色溶液,收集中间馏分,充氮气密封于棕色瓶中.蒸馏液应清澈透明、无色,否则应重新蒸馏.2,4二硝基苯肼无醛乙醇饱和溶液,现用现配.氢氧化钾一乙醇溶液：（100g/L）10.0g氢氧化钾溶于20.0mL水中，转移至lOOmL容量瓶中，用无醛乙醇稀释至刻度,混匀.甲醛标准溶液:配制lg/L甲醛储备液，用碘量法标定.用时稀释成10mg/L的工作溶液.试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水.2.3实验方法准确吸取10mg/L甲醛标准溶液2.OmL，移入25mL容量瓶中，依次加入5.0mL无醛乙醇、l.0mL2，4二硝基苯肼溶液和0.05mL盐酸，盖上瓶塞.在（50±2）°C水浴中加热30min后取出，冷却至室温，加入5.OmL氢氧化钾一乙醇溶液，放置5min，用水稀释至刻度,混匀.然后用2cm比色皿在445nm波长处测定显色液的吸光度，以试剂空白为参比.3结果与讨论l吸收光谱用2cm比色皿，按实验方法使用72l型紫外—可见分光光度计，从波长400〜600nm之间测定其吸光度，绘制吸收光谱曲线，从而选择最佳吸收波长为445nm（图1）.3.2 2，4二硝基苯肼用量的选择取一定量甲醛标准溶液，分别加入一系列不同体积的2，4二硝基苯肼溶液0.2mL，0.5mL，l.0mL，l.2mL，l.5mL,在445nm波长处测定吸光度，试验证明，当2，4二硝基苯肼溶液用量在1.OmL以上时，曲线比较平直，吸光度基本不变，反应生成的有色物质较稳定，故选择2，4二硝基苯肼溶液用量为1.OmL.3.3盐酸用量的选择酸用量对显色有较大影响，试验表明，选择12mol/L盐酸0.05mL反应较稳醛与2，4酸用量对显色有较大影响，试验表明，选择12mol/L盐酸0.05mL反应较稳3.4 氢氧化钾用量的选择醛与2,4二硝基苯肼反应在碱性条件下生成橙红色物质,分别测定了加入氢氧化钾l.OmL,2.0mL,3.0mL,4.0mL,5.0mL,6.0mL在445nm波长处的吸光度，试验表明，氢氧化钾用量在5.0mL时，放置5min后A=0.691,3h后A=0.684吸光度基本不变,说明反应生成的有色物质较稳定.故选择氢氧化钾用量为5.0mL.5工作曲线的绘制0用0 0.02 0.04 0.06 0.08(J.I0.12总軽董(戲甲軽计、加鸟图0用0 0.02 0.04 0.06 0.08(J.I0.12总軽董(戲甲軽计、加鸟图3工作曲线mL,2.0mL,4.0mL,6.0mL,8.0mL,10.0mL(相当于甲醛含量0.0mg,0.02mg,0.04mg,0.06mg,0.08mg,0.10mg),按实验方法测定各溶液的吸光度,以总醛(以甲醛计)含量(mg)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制工作曲线如图3所示,该方法的线性范围0•02〜0.1mg/25mL，检出限为0•019mg/L，相关系数为r=0.9997.表观摩尔吸收系数为£4眉44575X104L/mol.cm。4样品测定选择市售白酒4种编号为1号、2号、3号、4号，准确移取试样各2.0mL按试验方法测定试样显色液的吸光度,从标准曲线查出醛的含量(相当于甲醛含量),总醛量分别为0.032,0.042,0.054,0.076mg。由测定结果可知,本法灵敏度较高,操作简单,是一种测定白酒中醛类物质含量的可行性方法.参考文献:[1]张存玲.居室空气中甲醛的气相色谱分析[J].色谱,1998,16(4):363.[2]彭科怀.高效液相色谱法测定啤酒中微量甲醛方法研究J]•西南民族学院学报(自然科学版),2000,26(2):79281.[3]丁敬敏.有机分析[M].北京:化学工业出版社,2004.[4]张文德.食品包装材料于容器涂料中甲醛的示波极谱测定法的研