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文档简介
细菌初步鉴定岗位微生物细菌初步鉴定岗位0102工作流程一、细菌学检查的各类标本特点一、细菌学检查的各类标本特点01血液:正常人的血液,若从中培养出细菌一般视为病原菌感染,需行进一步鉴定,若分离出3种以上的细菌,应考虑污染细菌。穿刺液标本(脑脊液、胸水、腹水、心包液、关节液等):正常穿刺液是无菌的,若从患者穿刺液中培养出细菌一般视为病原菌感染,需行进一步鉴定,若分离出3种以上的细菌,应考虑污染细菌。一、细菌学检查的各类标本特点0203咽拭子,鼻拭子:上呼吸道道的标本培养生长的细菌是否与疾病有关,需各方面综合判断,排除常居菌,才可作出正确的判断,咽拭子标本其主要观察有无β溶血链球菌。穿刺液标本(脑脊液、胸水、腹水、心包液、关节液等):正常穿刺液是无菌的,若从患者穿刺液中培养出细菌一般视为病原菌感染,需行进一步鉴定,若分离出3种以上的细菌,应考虑污染细菌。一、细菌学检查的各类标本特点0203咽拭子,鼻拭子:上呼吸道道的标本培养生长的细菌是否与疾病有关,需各方面综合判断,排除常居菌,才可作出正确的判断,咽拭子标本其主要观察有无β溶血链球菌。痰标本:下呼吸道的痰是无菌的,但咳出需经口腔,常可带有上呼吸道的正常寄生菌(如:草绿色链球菌)。肺炎链球菌是肺炎最常见的致病菌。儿童性肺炎多为流感嗜血杆菌所致。医院获得性肺炎的常见致病菌是革兰阴性杆菌,主要有肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、沙雷菌属和肠杆菌属细菌等。一、细菌学检查的各类标本特点0405支气管肺泡灌洗液:肺深部本是无菌部位,若从中培养出细菌一般视为病原菌感染需行进一步鉴定,若分离出3种以上的细菌,应考虑污染细菌。脓及伤口标本:能检出的病原微生物种类很多。如局部化脓性感染常见的由葡萄球菌和链球菌引起;化脓性关节炎、化脓性骨髓炎的主要致病菌是金黄色葡萄球菌;慢性骨髓炎和慢性化脓性关节炎的病原菌中,除上述细菌外,还有结核分枝杆菌。脓液标本中可检出铜绿假单胞菌、变形杆菌、和类白喉棒状杆菌等常为继发感染或污染所致。一、细菌学检查的各类标本特点0607尿培养:正常情况下尿液是无菌的,当培养出细菌时,须结合菌落数辨别是否为病原菌(菌落数大于100个/>105CFU/ml提示感染则需行进一步鉴定);若分离出3种以上的细菌,或分离出凝固酶阴性葡萄球菌、革兰阳性棒状杆菌等非定义为致病菌的细菌,标本涂片未见到,应考虑污染细菌。常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、肠球菌等。生殖道标本(宫腔分泌物,EPS等):正常的内生殖道是无菌的,而外生殖道(包括男性尿道口和女性阴道)有多种细菌寄生。常见的致病菌主要有:葡萄球菌、肠球菌、链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃希菌、变形杆菌等。一、细菌学检查的各类标本特点0809粪便标本:致病菌与正常菌群共生,诊断较困难,主要关注沙门、志贺氏菌,1.观察平板,判定致病菌,填写补费单平板,判定致病菌,填写补费单4.危急值报告二、工作流程2、补记药敏费、将初步鉴定的细菌上相应的生化药敏试验卡3、放入孵箱培养18-24小时,消毒台面,填写《试剂使用记录》。1.观察平板,判定致病菌,填写补费单平板,判定致病菌,填写补费单二、工作流程
常见的致病菌金黄色葡萄球菌镜下形态革兰阳性球菌圆形,直径0.5~1.5um呈单个、成对、四联、不规则葡萄状或成簇排列。常见标本来源:痰液、脓液、血液、穿刺液、分泌物等。金黄色葡萄球菌培养条件及菌落形态兼性厌氧性细菌营养要求不高35℃,5%CO2孵箱培养24小时,形成直径1~3mm圆形、光滑、湿润、奶油样、白、淡黄至橙黄色菌落。常用辅助试验血浆凝固酶试验阳性触酶试验阳性大肠埃希菌镜下形态革兰阴性杆菌大小(1.1~1.5)×(2~6)um呈单个或成对存在。常见标本来源:痰液、尿液、脓液、血液、穿刺液、分泌物等。大肠埃希菌培养条件及菌落形态需氧或兼性厌氧性细菌营养要求不高35℃,普通孵箱培养24小时,BA上形成直径2~3mm圆形、光滑、湿润、灰白色菌落。EMB上形成粉红色或无色菌落。常用辅助试验氧化酶试验阴性触酶试验阳性肺炎克雷伯菌镜下形态革兰阴性杆菌大小(0.3~1.0)×(0.6~6)um,两端较平。呈单个、成对或短链状排列。常见标本来源:痰液、尿液、脓液、血液、穿刺液、分泌物等。肺炎克雷伯菌培养条件及菌落形态兼性厌氧性细菌营养要求不高35℃,普通孵箱培养24小时,BA上形成较大的圆形、湿润、黏着的白色菌落。EMB上形成大的黏着的粉红色菌落。常用辅助试验氧化酶试验阴性触酶试验阳性鲍曼不动杆菌镜下形态革兰阴性球杆菌大小(0.9~1.6)×(1.5~2.5)um球状或球杆状,成对排列,有荚膜。常见标本来源:痰液、尿液、脓液、血液、穿刺液、分泌物等,重要的院内感染菌。鲍曼不动杆菌培养条件及菌落形态专性需氧细菌营养要求不高35℃,普通孵箱培养24小时,BA上形成中等大小圆形、光滑、灰白色菌落,边缘整齐。EMB上形成淡粉红色或无色菌落。常用辅助试验氧化酶试验阴性触酶试验阳性铜绿假单胞菌镜下形态革兰阴性直或微弯曲杆菌大小(0.5~1)×(1.5~5)um呈单个存在,有些有厚荚膜。常见标本来源:痰液、尿液、脓液、血液、穿刺液、分泌物等。铜绿假单胞菌培养条件及菌落形态专性需氧细菌营养要求不高35℃,普通孵箱培养24小时,BA不同菌株可形成多种形态菌落,大小不一,光滑或粗糙、边缘规则或不规则。EMB上形成绿色菌落。常用辅助试验氧化酶试验阳性触酶试验阳性肺炎链球菌镜下形态革兰阳性球菌直径小于2um呈双矛头状排列,有厚荚膜。常见标本来源:痰液、血液、脑脊液等。肺炎链球菌培养条件及菌落形态兼性厌氧性细菌营养要求较高35℃,5%CO2孵箱培养24小时,形成直径0.5~1um圆形、光滑、湿润、灰色、中间凹陷型菌落,有些呈黏液型菌落。常用辅助试验触酶试验阴性
Optochin试验敏感流感嗜血杆菌镜下形态革兰阴性杆菌大小(0.2~0.5)×(0.5~3)um多形性杆菌,呈短杆菌或球杆菌。常见标本来源:痰液、脑脊液等。流感嗜血杆菌培养条件及菌落形态需氧或兼性厌氧性细菌营养要求较高35℃,5%CO2孵箱培养24小时,BA上不生长。CAH上形成成直径1~2um圆形、光滑、湿润、露滴样无色至灰色菌落。常用辅助试验卫星现象阳性卡他莫拉菌镜下形态革兰阴性双球菌多呈肾形,成对排列。常见标本来源:痰液、血液等。卡他莫拉菌培养条件及菌落形态专性需氧细菌营养要求不高35℃,普通孵箱培养24小时,BA上形成直径1mm左右,不透明、凸起、光滑、乳白色。菌落较坚硬、易碎,接种环可推动整个菌落。
常用辅助试验氧化酶试验阳性触酶试验阳性白色念珠菌镜下形态革兰阳性菌体呈球形或卵圆形。常见标本来源:痰液、尿液、脓液、血液、穿刺液、分泌物等。白色念珠菌培养条件及菌落形态营养要求不高25~37℃生长良好,普通孵箱培养24小时,BA上形成直径1mm直径1~3mm左右,不透明、凸起、光滑、乳白色。SDA形成奶白色,表面光滑菌落。
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