沉淀分离技术在蛋白质处理方面的应用

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沉淀分离技术在蛋白质处理方面的应用专业：分析化学学号：20144015016姓名：骆洪伟内容一、变性沉淀分离技术二、絮凝分离技术一、变形沉淀分离技术1.基本原理及方法原理：

利用生物大分子物质对物理、化学等外部环境因子敏感性的差异而选择性地使一种组分发生变性形成沉淀，而另一些组分保持不变，从而达到分离、除杂和提纯的目的。变性沉淀分离的方法有:①热变性沉淀分离

利用蛋白质热稳定性不同的特点，使蛋白质组分之间得以分离，同时使蛋白质与水及其他可溶物分离，此法常用于组织化植物蛋白的生产。②选择性酸碱变性沉淀分离

利用酸碱变性原理，通过调节溶液pH值，可有选择地去除杂蛋白，常用于生化制备中。③利用酶进行变性分离

利用酶的催化作用使一些蛋白质变性，从而沉淀分离，如凝乳酶催化牛乳酪蛋白的沉淀。④利用表面活性剂或有机溶剂引起变性沉淀分离

在制备核酸时，可加入含水酚、氯仿以及十二烷基磺酸钠等试剂，有选择地使蛋白质发生变性沉淀，达到去除杂质、提纯核酸的目的。2.影响蛋白质变性的因素①温度

在较高温度作用下，蛋白质的二级、三级和四级结构的弱键断裂，破坏了肽链原来特有的排列和空间结构，使原来在大分子内部的极性基团转到分子表面，促进蛋白质分子相互凝集而沉淀，但温度过高又会使蛋白质发生变性。②pH值

大部分蛋白质在pH4～10的范围内是比较稳定的，超过这个范围强酸或强碱会使蛋白质分子内的基团带电性质发生变化，从而破坏静电引力所形成的键，使原来的构象发生变化，导致蛋白质变性。③其他化学因子

能使蛋白质变性的化学试剂有甲酸、乙酸等酸类，甲醇、乙醇等醇类，还有二脲、氯仿、酚等，以及表面活性剂如十二烷基磺酸钠等，它们与蛋白质高度结合，可拆散蛋白质的亚基从而使其变性。此外，酶作用也可使蛋白质变性。1.基本原理二、絮凝分离技术

絮凝分离主要是通过溶液中的颗粒凝集、双电层的压缩和电荷的中和作用、桥连作用、沉淀物网捕作用等机理把溶液中的微小胶体、颗粒及悬浮物除去并分离的技术。

应用实例有葎草叶蛋白的提取,其基本工艺流程:葎草叶打浆→浸泡→压汁→离心分离→加热沉淀→烘干2.絮凝剂的种类①无机阳离子絮凝剂:三氯化铝、硫酸铝、

三氯化铁、明矾、硫酸亚铁、硫酸铁等。②无机阴离子絮凝

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