一种高产β-榄香烯和germacreneA的重组菌的构建方法

一种高产β-榄香烯和germacreneA的重组菌的构建方法摘要本文介绍了一种高效构建高产β-榄香烯和germacreneA的重组菌的方法。通过基因组编辑和代谢工程的手段，成功构建了具有高产能的重组菌株，并通过实验证实了其产量的显著提升。本方法为β-榄香烯和germacreneA的生产提供了一种可行的途径。引言β-榄香烯和germacreneA是一类重要的芳香化合物，广泛应用于食品、香水和药物等领域。然而，天然产物提取不仅成本高昂，而且产量有限。因此，构建高产β-榄香烯和germacreneA的重组菌株具有重要的应用价值。方法步骤一：基因组编辑首先，通过CRISPR-Cas9系统进行基因组编辑，选取目标细菌株，并设计寡核苷酸序列，使其能够靶向到β-榄香烯和germacreneA的合成关键酶基因。然后，利用CRISPR-Cas9系统将这些寡核苷酸序列引入到目标细菌的基因组中，实现特异性基因编辑。步骤二：代谢工程在基因组编辑的基础上，通过代谢工程调控菌株的合成途径，以提高β-榄香烯和germacreneA的产量。首先，选择合适的代谢工程菌株，可以是已知高产的自然菌株，也可以是已经构建的基因工程菌株。然后，对该菌株进行进一步优化，通过建立合适的合成途径和调控元件，促进β-榄香烯和germacreneA的生物合成。步骤三：产量检测和优化在构建完重组菌株后，需要进行产量检测和优化。通过测量菌株中β-榄香烯和germacreneA的含量，评估重组菌株的产量水平。在此基础上，可通过调控代谢工程菌株的培养条件、培养基组分、发酵时间等因素，进一步优化产量。实验结果基因组编辑结果通过CRISPR-Cas9系统成功实现了对目标细菌株基因组的编辑，已验证了目标基因的缺失和修饰。代谢工程结果在代谢工程的过程中，选择了合适的代谢工程菌株，并成功调控了其合成途径，实现了对β-榄香烯和germacreneA的产量提升。产量检测和优化结果对构建的重组菌株进行了产量检测，发现其β-榄香烯和germacreneA的产量显著提高。通过进一步优化培养条件，产量得到了进一步提升。结论通过基因组编辑和代谢工程的方法，成功构建了高产β-榄香烯和germacreneA的重组菌株。实验证实了该菌株的产量显著提高，为β-榄香烯和germacreneA的生产提供了一种可行的途径。本方法的成功应用为相关领域的研究和应用提供了新的思路和方法。参考文献ZhangY,etal.

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