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文档简介

姓名孙肖蛋白质的分离纯化1010203选择含目的蛋白质较丰富的材料避免蛋白质变性,避免过酸过碱的条件及剧烈搅拌和振荡除去变性的蛋白质和其他杂蛋白蛋白质分离纯化的一般原则2材料的预处理及细胞破碎01蛋白质的抽提02蛋白质粗制品的获得03样品的进一步分离纯化04分离纯化蛋白质的一般程序3机械破碎法渗透破碎法反复冻融法超声波法酶法常用破碎组织细胞的方法4通常选择适当的缓冲溶液把蛋白质提取出来。抽提所用的缓冲溶液的PH、离子强度、组成成分等条件应根据欲制备的蛋白质的性质而定。如膜蛋白的抽提抽提缓冲液中一般要加入表面活性剂(十二烷基磺酸钠),使膜结构破坏,利于蛋白质与膜分离。5根据蛋白质溶解度的差异等电点沉淀法:不同蛋白质的等电点不同,可用等电点使它们相互分离盐析法:不同蛋白质盐析所需的盐饱和度不同,可通过调节盐浓度使目的蛋白质沉淀析出。有机溶剂沉淀法:中性有机溶剂如乙醇,它的介电常数比水低,能使大多数球状蛋白质在水溶液的溶解度降低,进而沉淀出来。此外,有机溶剂会破坏蛋白质表面的水化膜,促使

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