《DNA的粗提取与鉴定》复习

DNA的粗提取与鉴定1.基本原理0.14mol/LNaCl酒精二苯胺溶液染成蓝色2.操作过程相对较高蒸馏水纱布NaCl溶液的浓度95%的酒精沸水中加热【警示】

（1）本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。（2）实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。1.DNA与蛋白质在NaCl溶液中溶解度比较2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液溶解规律DNA溶解析出

蛋白质部分发生盐析沉淀溶解NaCl溶液从2mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大2.DNA粗提取实验材料和方法的选择（1）不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。（2）材料不同所采用的提取方法不同①植物组织：取材→研磨→过滤→沉淀。②鸡血：制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较纯净的DNA。★DNA粗提取与分离的原理、过程与鉴定是本专题在高考中的主要命题点，但总体来看考查频率不大。［真题回顾］

（2012·江苏单科）下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（）A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取D.用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少【解析】

本题考查DNA粗提取与鉴定实验的基本知识。洗涤剂能瓦解细胞膜，但对DNA在NaCl溶液中的溶解度无影响，故A错误；DNA丝状物需先溶解在适宜浓度的NaCl溶液中，然后加入二苯胺试剂，混合均匀后沸水浴，待冷却后溶液变蓝，故B错误；常温下菜花匀浆中有些水解酶可能会使DNA水解而影响DNA的提取，故C正确；用玻棒朝一个方向缓慢搅拌可减轻对DNA分子的破坏，有利于DNA分子的提取，故D错误。【答案】

C［考点分向］考向一DNA粗提取的原理及操作步骤1.下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题：（1）步骤一中，向鸡血细胞液中加入

并搅拌，可使鸡血细胞破裂。（2）步骤二中，过滤后收集含有DNA的

。（3）步骤三、四的操作原理是________________________；步骤四中，通过向溶液中加入

调节NaCl溶液的物质的量浓度至

mol/L时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。（4）步骤七：向步骤六过滤后的

中加入等体积的冷却的

，静置2～3min，溶液中会出现

色丝状物，这就是粗提取的DNA。（5）步骤七：DNA遇

试剂，沸水浴5min，冷却后，溶液呈

色。【解析】

破碎红细胞应用蒸馏水，使之吸水涨破。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在2mol/L的NaCl溶液中DNA溶解，在0.14mol/L的NaCl溶液中DNA析出。可通过加入蒸馏水将2mol/L的NaCl溶液稀释为0.14mol/L的NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精，遇二苯胺加热呈蓝色。【答案】

（1）蒸馏水（2）滤液（3）DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质蒸馏水0.14（4）滤液酒精白（5）二苯胺蓝考向二实验中试剂的应用2.下列关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的试剂、操作及作用的表述，不正确的是

（）选项试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入到溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液中降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出D二苯胺试剂DNA与二苯胺在沸水浴的条件下发生蓝色反应鉴定DNA【解析】

蒸馏水在本实验中的作用有两个：一是用于调节NaCl溶液的浓度，以使DNA沉淀析出或溶解；二是用于鸡血细胞的溶血，释放细胞内的核物质。【答案】

B【归纳总结】

DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较酒精95%（体积