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药理学实验报告学校:学院:班级:学号:姓名:指导老师:元胡止痛片对小鼠镇痛抗炎镇痛活性研究组员:指导老师:摘要:目的:研究元胡止痛片是否具有镇痛抗炎的效果。方法:使用小鼠热板法、醋酸扭体法、耳肿胀法,并分别建立小鼠的镇痛抗炎模型,观察元胡止痛片对小鼠的镇痛抗炎作用的影响。结果:1.热板法:元胡止痛片对小鼠热板法实验中给药60分钟后有显著性差异,阳性药阿司匹林与生理盐水组相比有明显的痛阈降低,低浓度与生理盐水组相比有痛阈降低。2.醋酸扭体法:实验结果有显著差异,阿司匹林阳性药与高浓度元胡溶液相比有显著性差异,阳性药有明显的镇痛作用。而阿司匹林组与生理盐水,低浓度与生理盐水组没有出现显著性差异。3.热肿胀法:结果显示无显著性差异,阳性药阿司匹林没有明显的抗炎活性。结论:阿司匹林阳性药有抗炎镇痛作用,元胡止痛片无抗炎镇痛作用。关键词:元胡止痛片;镇痛;抗炎;热板法;醋酸扭体法;耳肿胀法元胡止痛片为中药复方制剂,由延胡索(醋制)、白芷等中药组成,延胡索(醋制)具辛、苦、温,归肝脾经,由活血、理气、止痛等功效;白芷辛温,归胃、大肠、肺经,其功能与主治为散风除湿、通窍止痛、消肿排脓。该制剂为中国药典方,临床上用于气滞血淤的胃痛、胁痛、头痛及月经痛等。由于直肠给药50%以上的药物可以不通过肝脏而直接进入血液作用于全身,可避免口服引起的胃肠道刺激,同时减少。胃液和肝脏对药物的破坏和降解,从而提高药效减轻药物的不良反应。另外,直肠给药药物吸收缓慢,可使药效维持较长的时间。本实验旨在对元胡止痛栓的镇痛抗炎作用的研究。1材料与方法1.1动物健康昆明种小白鼠,体重25±8g,雌性32只,雄性32只。健康昆明种小白鼠,体重40±10g,雄性,32只。1.2药品与试剂元胡止痛片,广西半宙天龙制药有限公司,批号130807;0.9%氯化钠注射液,新疆华世丹药业股份有限公司,批号214070702;阿司匹林肠溶片,临汾宝珠制药有限公司,批号140401;二甲苯,天津市富宇精细化工有限公司,批号120411;冰乙酸,天津市光复科技发展有限公司,批号090527。1.3仪器YLS-6B智能热板仪,淮北正华生物仪器设备有限公司,出厂日期071018;天孚牌JYT-5架盘药物天平,生产日期2011年8月;YLS-25A电动耳肿打耳器,济南益延科技发展有限公司,出厂日期20140521;电子天平。2实验内容2.1热板法2.1.1动物筛选致痛潜伏期(痛阈值)为5~45s之间的合格雌性小鼠。32只,热板法镇痛试验,筛选痛阈值合格的小鼠,取♀小鼠于给药前先用热板仪于55±0.5℃分别测定每只小鼠的正常痛阈值[将小鼠放于智能热板仪上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值(s),连续2次,间隔30s,测定平均值即为正常痛阈值]。将舔后足时间<5s或>45s,或跳跃者不用于此实验。2.1.2分组按体重随机分组,分4组,编号,每组8只。2.1.3给药1组生理盐水空白对照组(按0.1mg/10g灌胃生理盐水),2组阿司匹林阳性对照组(按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林),3组元胡止痛片低剂量组(按0.6mg/10g灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液),4组元胡止痛片高剂量组(按1.3mg/10g灌胃10mg/ml的元胡止痛片溶液)。2.1.4测定痛阈值各鼠给药前测定正常痛阈值。取智能热板仪,调节温度,使温度恒定在55±0.5℃,取每组合格雌性小鼠,按2.1.2灌胃不同药液,测定给药后每组15、30、60、90分钟后各鼠痛阈值。2.1.5痛阈提高百分率痛阈提高百分率痛阈提高百分率=用药后平均热痛阈值—用药前平均痛阈值用药前平均痛阈值*100%2.2耳肿胀法2.2.1分组取雄性小鼠25±8g,32只,随机分为4组,编号,每组8只。2.2.2给药1组生理盐水空白对照组(按0.1mg/10g灌胃生理盐水),2组阿司匹林阳性对照组(按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林),3组元胡止痛片低剂量组(按0.6mg/10g灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液),4组元胡止痛片高剂量组(按1.3mg/10g灌胃10mg/ml的元胡止痛片溶液)。2.2.3测量每组给药30分钟后,给小鼠的右耳前后涂上二甲苯0.1ml/只,30分钟后处死小鼠,沿耳廓对称剪下两只耳壳,用YLS-25A电动耳肿打耳器取耳片,称重,以两耳重量差计算肿胀度。2.2.4计算肿胀率肿胀率(%)=[右耳片重(mg)-左耳片重(mg)]/左耳片重(mg)×100%2.3醋酸扭体法2.3.1分组取雄性小鼠40±10g,32只,随机分为4组,编号,每组8只。2.2.2给药1组生理盐水空白对照组(按0.1mg/10g灌胃生理盐水),2组阿司匹林阳性对照组(按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林),3组元胡止痛片低剂量组(按0.6mg/10g灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液),4组元胡止痛片高剂量组(按1.3mg/10g灌胃10mg/ml的元胡止痛片溶液)。给药1h后给每组小鼠按0.1ml/10g腹腔注射0.6%的醋酸(临用前新鲜配制)。2.2.3观察5min后记录15分钟内各小鼠出现“扭体反应”的次数。3结果3.1热板法表1元胡止痛片对小鼠的痛阈影响(S,n=8)组别给药剂量mg/10g给药15min后(s)给药30min后(s)给药60min后(s)**给药90min后(s)生理盐水空白对照组0.124.68±12.9029.52±19.4223.61±1.2837.82±22.01阿司匹林阳性药对照组418.75±17.1021.75±15.2615.76±2.76*23.81±19.66低浓度元胡止痛片对照组0.616.64±6.3816.54±9.8514.90±2.77*30.72±16.10高浓度元胡止痛片对照组1.319.17±6.4320.96±8.6918.73±3.8123.85±18.25**,60分钟时各组出现显著差异,p<0.01*,1生理盐水空白对照组vs2阿司匹林阳性对照组,p<0.05 *,1生理盐水空白对照组vs3低浓度元胡溶液组 ,p<0.05图1元胡止痛片给药60分钟后对小鼠热板法实验的镇痛作用的影响3.2耳肿胀法表3元胡止痛片对小鼠的抗炎作用(S,n=8)组别给药剂量mg/10g肿胀率(%)生理盐水空白对照组0.162±33阿司匹林阳性药对照组467±46低浓度元胡止痛片对照组0.672±32高浓度元胡止痛片对照组1.364±50图2元胡止痛片对小鼠耳肿胀实验抗炎作用的影响3.2醋酸扭体法表2元胡止痛片对小鼠的镇痛作用(S,n=8)组别给药剂量mg/10g扭体次数*生理盐水空白对照组0.115±18阿司匹林阳性药对照组42±3^低浓度元胡止痛片对照组0.620±19高浓度元胡止痛片对照组1.333±24*,小鼠镇痛作用出现显著差异,p<0.05^,2阿司匹林阳性对照组vs4高浓度元胡溶液组 ,p<0.05图3元胡止痛片对小鼠扭体实验的镇痛作用影响结果分析讨论参考文献:[1]李见春,黄继汉,桂常青,郑青山.元胡止痛栓镇痛作用的实验研究[J].中国临床药理学与治疗学,2004(04)[2]唐岚.元胡止痛分散片药学研究[J].成都中医药大学,2002[3]徐叔云(AuFY),卞如濂(BanRL),陈修(ChenX).药理实验方法学.第3版[M].北京:人民卫生出版社,2002.886,911,934,1408.[4]杨巧芳,孟庆刚.炎症动物模型
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