备课素材：观察染色体的两种细胞固定试剂 高一下学期生物人教版必修2

观察染色体的两种细胞固定试剂2019版高中生物学必修一介绍，以15%的盐酸和95%的酒精等量混合解离并固定细胞：必修二介绍，以卡诺氏液固定细胞：那么，这两种固定细胞的试剂有什么区别？固定是借助理化方法迅速将组织细胞杀死，尽量保持其形态结构及内含物的真实生活状态。因此，固定液必须迅速穿过细胞使蛋白质变性，且不影响染色体的完整性，从而达到良好的染色效果。卡诺氏固定液是3份无水乙醇和一份冰醋酸混合制备而成，其中无水乙醇的功能是使细胞缩小、脆化；冰醋酸的功能是不改变细胞的原来结构。所以卡诺氏液的功能是在不破坏细胞结构的情况下使细胞瞬间死亡，起到固定的作用。卡诺氏固定液最好现用现配，长时间放置影响固定的效果。固定时间为15～1440min，冰箱室温均可。其适用于一般植物组织和细胞的固定，常用于根尖、花药压片等。在徐作英、王重力主编的《中学生物实验教学论》第322页“观察洋葱根尖细胞有丝分裂”实验中，对“实验材料的准备”根尖取材与固定是这样描述的：待根尖长到1～2cm时(注意不宜过长)，根据各种植物细胞有丝分裂的高峰时期，剪取根尖浸泡于固定液中2～4h，取出后保存于70%酒精中备用。由此可见，观察根尖有丝分裂实验也可以用卡诺氏液固定，但不是必需的。因为在对根尖进行解离操作时，加入盐酸酒精混合液，其中盐酸起解离作用，而酒精能起固定作用。该实验用酒精固定已经起到了很好的作用，实验结果也比较理想，从简化实验程序考虑就不必再单独使用卡诺氏液固定。例1、下列有关实验的叙述，正确的是（）A.

卡诺氏液固定细胞形态后需用体积分数为95%的酒精冲洗B.

生长素能与双缩脲试剂发生作用产生紫色反应C.

赫尔希等人用35S标记的除菌体侵染细菌实验，证明DNA是遗传物质D.

质壁分离复原实验中需用显微镜观察临时装片2次答案：A解析：A、在低温诱导植物染色体数目的变化实验中，利用卡诺氏液固定细胞形态后，需用体积分数为95%的酒精冲洗两次，A正确；B、生长素的本质不是蛋白质，是吲哚乙酸，其不能与双缩脲试剂发生作用产生紫色反应，B错误；C、赫尔希等人分别用35S或32P标记噬菌体进行侵染细菌实验，证明了DNA是遗传物质，C错误；D、质壁分离复原实验中需用显微镜观察临时装片3次：第一次观察为紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞在蒸馏水中的正常状态，第二次观察为紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞在蔗糖溶液中的质壁分离状态，第三次观察为紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞在蒸馏水中的质壁分离复原状态，D错误。故选：A。

例2、下列有关实验的说法正确的是（） A．在观察植物细胞有丝分裂实验中，用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液进行解离 B．在提取叶绿体色素的实验中，使用丙酮酸提取色素，使用层析液分离色素 C．探究醇母群数量变化时，应设空白对照排除无关变量干扰 D．将斐林试剂加入到麦芽糖溶液中时，就会出现砖红色沉淀解析：

1、绿叶中色素的提取和分离实验，提取色素时需要加入无水乙醇（溶解色素）、石英砂（使研磨更充分）和碳酸钙（防止色素被破坏）；分离色素时采用纸层析法，原理是色素在层析液中的溶解度不同，随着层析液扩散的速度不同，最后的结果是观察到四条色素带，从上到下依次是胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）．2、观察细胞有丝分裂实验的步骤：解离（解离液由盐酸和酒精组成，目的是使细胞分散开来）、漂洗（洗去解离液，便于染色）、染色（用龙胆紫、醋酸洋红等碱性染料）、制片（该过程中压片是为了将根尖细胞压成薄层，使之不相互重叠影响观察）和观察（先低倍镜观察，后高倍镜观察）．

3、探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化实验的原理：

（1）酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关，我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况．

（2）利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目．

4、斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）．斐林试剂只能检验生物组织中还原糖（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）存在与否，而不能鉴定非还原性糖（如淀粉、蔗糖）．在观察植物细胞有丝分裂实验中，用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液进行解离，A正确；

在提取叶绿体色素的实验中，使用丙酮提取色素，丙酮酸不能提取色素，