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文档简介
是一组存在于人和动物血清与组织液中的具有酶活性的不耐热的糖蛋白。补体性质不稳定0~10℃条件下活性只能保持3~4d一20℃第一节补体活性和组分的检测血清补体总活性测定(CH50试验)在溶血反应中,当红细胞和溶血素定量时,溶血程度与补体的活性(但非直线关系)溶血率溶血率以引起50%溶血所需正常值:50-100U/ml增高:急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤等降低:严重肝病、某些自身免疫性疾病50%溶血标准管1235691:20稀释血清缓冲液选择溶血程度与50%溶血标准管最为接近的两管,测定OD值,以OD值1u X200.3ml1、测定的是补体9种成分的综合水平2、方法简便、快速,但敏感性较低一)免疫溶血法去C4血清+致敏红细胞——不溶血十溶血程度与待测血清中的C4活性成正相关(二)免疫化学法第二节补体结合实验(CFT)原理:用已知的指示系统检测试验系统是否结合补体。已知抗原(或抗体)补体参与的抗原抗体反应补体结合试验抗原抗原①灵敏度高。比沉淀反应和凝集反应的灵敏度高得多,能测定0.05μg/ml的抗体。②特异性强。各种成分都事先滴定,选择最佳比例,出现交叉反应的机率小。③易于普及,试验结果显而易见;④试验条件要求低,不需要特殊仪器或只用分光光度计。操作步骤繁锁,所以常常被其他方法所但对于免疫学技术的基本训练仍是一个第三节循环免疫复合物的检测免疫复合物是机体内抗原抗体形成的抗原抗体复合物,沉积在血管壁、皮肤脏器的免疫复合物称为局部免疫复合物,随血液循环的称为循环免疫复合物。局部免疫复合物用免疫组化法检测,而循环免疫复合物检测技术分为抗原特异性检测技术和非抗原特异性检测技术两类。PEG(聚乙二醇)沉降法原理:低浓度的PEG能选择性地沉淀IC,一般PEG的最终浓度选择3.5%,等量待检血清→4℃16-18小时后离心沉淀→NaOH溶解3、评价:简单方便,既可检测又可以用于分离;但特异性差,血清中的大分子蛋白质易造成假阳性。ELISA测定循环免疫复合物 免疫复合物检测的临床意义可作为评价疾病的活动情况及其
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