碘-淀粉比色法测定淀粉酶课件

实验119

碘-淀粉比色法测定淀粉酶董雷鸣1实验119

碘-淀粉比色法测定淀粉酶董雷鸣1一、概述（一）淀粉酶的分类α-淀粉酶（人体）β-淀粉酶（植物、微生物）2一、概述（一）淀粉酶的分类α-淀粉酶（人体）2（二）含淀粉酶的人体组织胰腺唾液腺（腮腺）胃、胆囊、输卵管、子宫、脾、空肠、回肠、骨骼肌等3（二）含淀粉酶的人体组织胰腺3（三）淀粉的分类直链淀粉（糖淀粉）支链淀粉（胶淀粉）4（三）淀粉的分类直链淀粉（糖淀粉）4直链淀粉(糖淀粉)的结构5直链淀粉(糖淀粉)的结构5碘－淀粉包合物结构6碘－淀粉包合物结构6支链淀粉(胶淀粉)的结构7支链淀粉(胶淀粉)的结构7葡萄糖单位连接键分子量自然界中的比例直链50-250个α-1，4糖苷键150000-60000010-20%支链250-500个α-1，4糖苷键β-1，6糖苷键1000000-600000080-90%8葡萄糖单位连接键分子量自然界中直链50-250个α-1，4糖(一)原理二、实验α-淀粉酶淀粉葡萄糖+麦芽糖+糊精+碘液兰色包合物9(一)原理二、实验α-淀粉酶淀粉葡萄糖+麦(二)试剂淀粉溶液（0.4g/L）碘应用液10(二)试剂淀粉溶液（0.4g/L）10(三)操作加入物空白管测定管缓冲淀粉溶液(37℃预温)0.50.5稀释血清—0.1混匀，置37℃水浴准确15min碘应用液0.50.5蒸馏水3.13.0混匀，蒸馏水调零，波长660nm，比色。11(三)操作加入物空白管测定管缓冲淀粉溶液(37℃预温)0.5(四)单位定义100ml血清中的淀粉酶，在37℃,15min水解淀粉5mg为1个单位。12(四)单位定义100ml血清中的淀粉酶，在37℃,1(五)计算空白管吸光度－测定管吸光度100

150.4×0.5×××空白管吸光度0.0115

5淀粉酶（U）=※100ml血清中的淀粉酶，在37℃,15min水解淀粉5mg为1个单位。（）400=（ml）（min）（mg）13(五)计算空白管吸光度－测定管吸光度100(六)参考值血清80-180U尿液100-1200U14(六)参考值血清80-180U14(七)临床意义升高

——急性胰腺炎、流行性腮腺炎；——急性胆囊炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后。降低

——肝炎、肝硬化、肝癌；——肾功能障碍。15(七)临床意义升高15急性胰腺炎时血、尿淀粉酶升高的不同表现开始升高时间高峰时间恢复时间血清8-12h12-24h2-5d尿液12-24h5-7d1-2w16急性胰腺炎时血、尿淀粉酶升高的不同表现开始升高时间高峰时间恢(八)注意事项草酸盐、枸橼酸盐、EDTA-Na2及氟化钠对淀粉酶有抑制作用，肝素无抑制作用。唾液含高浓度淀粉酶，须防止带入。缓冲淀粉溶液若出现浑浊或絮状物，应重新配制。17(八)注意事项草酸盐、枸橼酸盐、EDTA-Na2及氟化钠对淀实验115

比色法测定血清碱性磷酸酶董雷鸣18实验115

比色法测定血清碱性磷酸酶董雷鸣18一、概述含碱性磷酸酶酶的人体组织骨骼肝脏肠黏膜细胞胎盘等19一、概述含碱性磷酸酶酶的人体组织骨骼19(一)原理二、实验碱性磷酸酶磷酸苯二钠磷酸+酚+4-氨基氨替比林铁氰化钾醌类化合物20(一)原理二、实验碱性磷酸酶磷酸苯二钠磷酸(二)试剂碳酸盐缓冲液(pH10)磷酸苯二钠底物溶液铁氰化钾溶液酚标准应用液酚标准应用液21(二)试剂碳酸盐缓冲液(pH10)21(三)操作(BeckmanCX7全自动生化分析系统)22(三)操作(BeckmanCX7全自动生化分析系统)22BeckmanCX7的规格检测量

900个检验结果/小时检测项目及种类（共33项）

电解质、急诊项目、普通生化、特殊生化、免疫、蛋白、药物检测、毒品检测检测样品种类血清、血浆、尿液、脑脊液23BeckmanCX7的规格检测量23(四)单位定义100ml血清在37℃与底物作用15min,产生1mg酚为1个金氏单位。24(四)单位定义100ml血清在37℃与底物作用15mi(五)参考值成人3-13金氏单位儿童5-28金氏单位25(五)参考值成人3-13金氏单位25(六)临床意义血清ALP活力测定常为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。26(六)临床意义血清ALP活力测定常为肝胆疾病活性升高——骨paget病、恶性肿瘤骨转移或肝转移、佝偻病、骨软化、骨折愈合期、成骨细胞瘤；——胆道梗阻、甲旁亢等。活性降低（少见）——呆小病、磷酸酶过少症、维生素C缺乏症等。27活性升高27