常见肿瘤免疫标记

常见肿瘤免疫标记常见肿瘤免疫标记第1页免疫组化基础原理抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合原理，经过化学反应使标识抗体显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)。常见肿瘤免疫标记第2页常见方法EPOS（一步法）SP法-链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶连接法二步EnVision（优点：敏感性大幅增强，不受内源性生物素干扰）SABC法（三步法）常见肿瘤免疫标记第3页结果判定每项指标都有其抗体结合对应位点，假如定位不准确，则不能判为阳性。结果中“±”有相当一个别为背景与肿瘤表示均呈阳性，无法区分，其原因大致有：孵育过长；抗原抗体交叉反应；冲洗不足；血清封闭不足或错误；二抗与组织非特异性结合。标本没有按规范程序固定。（固定液、固定时间）常见肿瘤免疫标记第4页肠癌中P53表示常见肿瘤免疫标记第5页肠癌中MDR表示常见肿瘤免疫标记第6页肺癌中Ki-67表示常见肿瘤免疫标记第7页胃癌中EGFR表示常见肿瘤免疫标记第8页胃癌中AFP表示常见肿瘤免疫标记第9页消化道癌标识我科常见胃癌标识：VEGF,EGFR,P-gp,GST-π,Topo-Ⅱ,Ki-67,AFP,P53,C-erbB-2,C-erbB-3,C-erbB-4,TS,TP.我科常见大肠癌标识：VEGF,EGFR,P-gp,GST-π,Ki-67,P53,MSH2,P21,TS,TP.常见肿瘤免疫标记第10页耐药相关基因标识P-糖蛋白（P-gp）

谷胱甘肽转移酶（GST-π）

DNA拓扑异构酶Ⅱ（Topo-Ⅱ）肿瘤产生耐药生物学基础取决于肿瘤多药耐药基因扩增，瘤组织生成GST-π

、TOPO-Ⅱ和P-gp含量升高，则耐药性增强。影响化疗疗效主要原因是细胞内耐药、抗肿瘤药药代动力学/药效学、肿瘤血供、药品扩散Pgp-MDR及肿瘤细胞增殖能力等。其中MDR关注点是mdri/Pgp、MDR、LRP、拓扑异构酶-Ⅱ、谷胱甘肽代谢和凋亡，或肿瘤细胞增殖活性介导细胞内多向耐药基因扩增。常见肿瘤免疫标记第11页尤其提醒对应耐药关系：TOPO-Ⅱ阳性对应多柔比星、米托蒽醌、鬼臼类；P-gp阳性对应长春新碱、VP-6、蒽环类；GST-π

阳性对应各种烷化剂耐药。据一些学者统计，近二分之一大肠癌对GST-π

、TOPO-Ⅱ所介导抗癌药品顺铂和拓扑异构酶抑制剂产生耐药倾向，并大多呈强耐药性，提醒大肠癌联合化疗用药时，对顺铂和拓扑异构酶抑制剂选择应慎重考虑。P-gp阳性表示者对P-gp相关主要抗癌药长春新碱、阿霉素等有耐药倾向。

常见肿瘤免疫标记第12页表皮生长因子受体相关标识表皮生长因子受体（EGFR）、人类表皮生长因子受体-2（C-erbB-2）、血管内皮生长因子（VEGF）。

C-erbB-2为HER-2癌基因表示产物，HER-2为原癌基因，广泛存在于各种组织中。通常处于非激活状态，被刺激激活后含有肿瘤转化活性，其表示越高，瘤株对化疗越不敏感，越易复发转移。VEGF与消化道癌形成亲密相关，并参加其侵袭和转移，可作为预后判断指标。三者在消化道癌中表示含有一致性，它们联合检测可作为判断胃癌预后、筛选高危转移患者有效指标

。常见肿瘤免疫标记第13页酪氨酸激酶I型受体家族I型表皮生长因子受体是广泛分布于人体各组织细胞膜上多功效糖蛋白，分享由细胞外结构域、跨膜结构域及胞浆结构域组成分子信号传导通道。其家族包含：HER1(EGFR)、HER2(C-erbB-2)、HER3、HER4四种同源受体。其受体及配体在各种实体瘤如NSCLC、BC、CC、NPC、GC等中过表示，正常组织中低表示。据报道，C-erbB-3蛋白在慢性胰腺炎、外分泌胰腺癌与胃肠道肿瘤中有显著表示。常见肿瘤免疫标记第14页p53正常p53生物功效好似“基因组卫士（guardianofthegenome）”，在G1期检验DNA损伤点，监视基因组完整性。假如修复失败，P53蛋白则引发细胞凋亡。假如p53基因突变，对细胞增殖将失去控制(显性负调控)。p53基因突变与人类50%肿瘤相关。常见肿瘤免疫标记第15页p21p21能够和p53共同组成细胞周期G1>检验站，降低受损DNA复制，发挥抑癌作用.

P21作为一个负性调整因子,在依赖野生型p53表示通路上与肿瘤表示、表示含量、表示位置,以及预后都亲密相关.当P21、Cyclin、CDK、PCNA四聚体功效受到抑制,则使增殖信号大量活化,造成细胞异化和恶变.

常见肿瘤免疫标记第16页PCNA:Proliferatingcellnuclearantigen常见肿瘤免疫标记第17页p53是G1期能否进入S期分子警察复制DNA损伤p53p21P21-cyclin-CDK复合物Rb-E2FRb-P+E2F 阻滞G1期修复无法修复凋亡诱导（P21CIP1）（Cyclin-CDK活性抑制）开启增殖常见肿瘤免疫标记第18页联合表示意义P53、c-erbB-2、P21表示与消化道癌分化程度,浸润程度,转移程度及临床分期呈正相关.多基因联合表示检测对消化道癌预后判断显著优于单基因表示检测.

据国外文件报道，分化差大肠癌中，P53、P21蛋白过表示常伴伴随K–ras、p53基因高突变，所以该对应关系很可能参加了大肠癌形成及演进。常见肿瘤免疫标记第19页Ki-67增殖细胞核抗原(Ki-67)对于研究肿瘤细胞生物化学特征、恶性程度及预后判断等含有一定价值。Ki-67是真核细胞G1和S期合成一个36kD核蛋白，是DNA聚合酶辅助蛋白，直接参加细胞增殖过程中DNA复制。在静止期细胞内含量极少，从G1晚期开始增加，S期到达高峰，G2期和M期呈显著下降，其表示程度能客观反应瘤细胞增殖活性。

常见肿瘤免疫标记第20页AFPAFP（甲胎蛋白）是在体液中发觉70kD癌胚抗原，正常表示于胎肝，常态下成人组织中呈阴性。在个别生殖细胞肿瘤（尤其卵黄囊瘤）和多数肝细胞肝癌中高表示。依据其病理组织形态学特点和癌细胞内AFP染色阳性表示，并对比3个月胚胎胃肠组织学改变，将组织学类型分为4个亚型：肝样型（34.9％），胎儿胃肠型（23.8％）和肝样型伴肠胚分化混合型（38.1％）以及卵黄囊瘤样型（3.2％）。结论：AFP阳性胃癌与普通型胃癌不一样，是一组含有独特临床病理特征高度恶性肿瘤。

常见肿瘤免疫标记第21页MSH2MSH2基因是错配修复基因主要组员之一,其表示蛋白参加DNA错配修复反应。MSH2等错配修复基因缺点造成错配修复蛋白失表示及微卫星不稳定性(MSI+)进而引发基因组不稳定,诱发肿瘤,尤其是在遗传性非息肉性大肠癌(HNPCC)常见有MSH2基因缺点。

Muir-Torre综合征、卵巢癌也与该基因亲密相关。有文件称，若错配修复蛋白2在回肠与结肠中隐窝细胞有失表示，隐窝细胞会快速更新，产生分化细胞迁移至隐窝腺腔内，参加了肿瘤形成。常见肿瘤免疫标记第22页HNPCC遗传原因：

(1)家庭组员中有三人以上患有结直肠癌，其中两人以上为同一代；

(2)最少相近两代人都有发病；

(3)其中最少有一人是在50岁以前诊疗为结直肠癌。

若满足上述原因中一条，一级亲属亦应进行HNPCC突变检测。携带MLH1和MSH2突变者罹患结直肠癌一生累计风险高达80%。

若免疫组化检测出肿瘤细胞核为阴性，提醒该基因失活，发生了hMLH1和hMSH2基因胚系突变。

常见肿瘤免疫标记第23页TS&TP5-FU代谢(DPD，TP，dUTPase)、DNA修复(ERCC2，XRCC1)，血管生成(COX-2，EGFR，IL-8，PLA2)以及药品解毒(GST-π)基因mRNA水平影响着晚期消化道癌患者预后。TS（胸苷酸合成酶）是DNA合成中限速酶，在DNA合成与修复中起主要作用，并与细胞分裂和增生关系亲密。TS高表示预示着肿瘤高侵袭性。TS与ERCC1（切除修复交叉互补基因）分别为标志氟尿嘧啶(5-Fu)、奥沙利铂(L-OHP)耐药指标。TP（胸苷磷酸化酶）基质TP表示对肿瘤微血管密度产生显著影响

。TP表示对预测5-FU化疗疗效、判断结肠癌预后有一定指导意义。常见肿瘤免疫标记第24页肺癌标识我科常见肺癌标识：VEGF-C3,EGFR,P-gp,p53,Ki-67,PE,CD24,CA125,bcl-2,Tslc1.常见肿瘤免疫标记第25页VEGF-C3血管内皮生长因子-C(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF-C)是迄今发觉最主要淋巴管生成因子,VEGF-C诱导淋巴管生成与肿瘤淋巴结转移亲密相关。所以,以VEGF-C为靶点抑制淋巴管生成已成为抗肿瘤转移主要策略之一。常见肿瘤免疫标记第26页CA125CA125（糖链抗原125）又称卵巢癌抗原（OCA）是由一组糖基转移酶综合作用而产生，主要存在于癌组织中。肺癌中CA125敏感性56.43%、特异性84.72%。

CA125检测在对NSCLC诊疗、NSCLC与SCLC判别诊疗中含有一定价值,对肺癌疗效观察、转移、复发监测及预后有较大辅助诊疗意义.

常见肿瘤免疫标记第27页bcl-2Bcl-2蛋白是bcl-2原癌基因编码产物，是一个定位于线粒体、内质网和连续核周膜

25kD膜蛋白，广泛分布。Bcl-2蛋白家族是一个尤其家族，组员中有些促进凋亡，如Bad、Bid、Bax，有些组员阻止细胞凋亡,如Bcl-2、Bcl-x、Bcl-w。Bcl-2能够阻止细胞色素c从线粒体释放到细胞质，从而抑制了细胞凋亡。

有文件称，Bcl-2蛋白过分表示在肺癌发生中起主要作用,是肺癌早期表现,有可能成为肺癌早期诊疗主要参考指标。

常见肿瘤免疫标记第28页Tslc1TSLC1（肿瘤阻抑基因1）是一个新抑癌基因,其失活与消化系肿瘤发生,浸润转移及预后有着主要关系.TSLC1失活主要机制之一是基因甲基化.TSLC1抑癌机制当前还不完全明确,认为与细胞黏附,细胞间信号传导,参加肿瘤免疫,诱导细胞凋亡和抑制细胞生长周期相关.常见肿瘤免疫标记第29页CD24CD24是一个低分子量高度糖基化黏蛋白样黏附分子，经过糖基磷脂酰肌醇黏附在细胞膜上，最初被认为是一个B细胞标志物，在B细胞分化早期阶段表示。最近国外一些研究发觉，CD24在上皮细胞起源肿瘤如非小细胞肺癌、前列腺癌、乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌等肿瘤中呈高表示，同时还发觉CD24表示和肿瘤侵袭性有一定关