ATP检测技术培训课件

——评价医疗器械清洗效果北京创新世纪生化科技发展有限公司ATP生物荧光检测技术器械清洗的目的：降低器械上微生物负荷；去除器械上的有机物和无机物；控制包装区的污染，达到环境标准要求；确保灭菌达到无菌保障水平（SAV）10-6

ATP检测示意图残留污染物细菌细胞中含有ATP有机污染物中含有ATP＋O2萤光素酶荧光素反应发光细菌

含ATP有机物残留

清洗质量是保证灭菌成功的前提降低微生物负荷：去除大多数微生物后，再进行消毒和灭菌，才能有效的达到消毒灭菌效果；去除微生物滋生的条件，阻碍残留的微生物繁殖（有机物、温度）减少热源的产生（革兰氏阴性杆菌灭活后，细胞壁释放的内毒素）深度清洁监测中ATP生物荧光法更全面消毒不合格清洁不合格培养法：不合格ATP法：不合格↑↑培养法：合格ATP法：不合格↑培养法：合格ATP法：合格清洁不合格消毒合格、清洁合格有效去除残留的有机物可阻断微生物滋生环境

清洗质量是保证灭菌成功的前提去除有机物或杂质：覆盖在器械上的有机物或无机物，灭菌剂不易穿透，有效的保护了细菌芽孢的灭活。使用中脱落在病人的体内（转移其他病人），可引起脏器粘连和伤口内感染，甚至危及病人生命。ATP存在于细胞内ATP（三磷酸腺苷）存在于动物细胞、细菌细胞、植物细胞中，同类活细胞内的含量基本一致；体细胞ATP含量大约为1×10-15molATP；细菌细胞中ATP含量大约为2×10-18molATP；细胞在自然凋亡的情况下，ATP含量会有所变化；因此可通过ATP的残留量，直接反映清洁的效果。技术原理沾染在物体表面、医疗器械上的血液、组织液等体液中含有大量的体细胞和细菌等污染物，这些生物污染可以通过ATP生物荧光法测出。萤光素酶在Mg2＋、ATP、O2的参与下进行酶促反应放出光子仪器定量测定加入ATP标准品前后的相对发光值RLU，从而获知污染物中的ATP含量，来判断医疗器械的污染程度和清洗效果。通过使用体细胞ATP消除技术，也可对残留细菌进行检测。ATP的可重复性实验以细菌内ATP为指示物，取105大肠埃希菌（ATCC8099）菌悬液50μL，加入无菌离心管中进行ATP含量测定并用菌落计数法对照；上述试验重复三天，每天同一管菌液重复测十次；将每天测的次数与ATP含量之间的关系进行曲线标定。中国CDC消毒检测中心

ATP生物荧光法与细菌计数法的相关性研究金黄色葡萄球菌（ATCC6538）测定结果：表中cfu和RLU值均为5次试验结果平均值。中国消毒学杂志1001-7658（2008）03-0245-0448小时5秒y=1.3199x-0.8317R2

=0.97780.001.002.003.004.005.006.007.008.009.000.001.002.003.004.005.006.007.00relativelightunit(Log10)colonyformingunit(Log10)金黄色葡萄球菌菌落数对数值与RLU对数值的线性关系中国CDC消毒检测中心

ATP生物荧光法与血液残留的相关性研究对不同稀释度血液的RLU观察：中国消毒学杂志1001-7658（2008）03-0245-04血液稀释倍数对数值与RLU对数值的线性关系型号：BT-112D仪器灵敏度：10-18molatp用途：器械表面洁净度、微生物检测、水质检测等型号：PLUS仪器灵敏度：10-15molatp用途：物表洁净度及手卫生产品介绍微生物检测试剂盒表面、管腔采样器100ul水质采样器ATP技术检测的使用方法1、取出拭子，涂抹器械表面（采样面积：按照管理规范的要求）2、取样后放回试管、掰断阀芯3、挤下试剂并振荡4、放入仪器内检测仪器检测时间5秒钟涂抹2掰断阀芯3挤入试剂5秒钟得到检测结果4中国疾病预防控制中心消毒所推荐使用此仪器评价医疗器械清洗效果的参考标准值为RLU≤2000如何使用ATP技术（1）低灵敏度仪器可用于重点科室的物表和手卫生监测

临床医务人员手卫生：手频繁接触物表：各种设备操作表面、治疗车、床栏、床头柜、门把手、灯开关、水龙头等低风险器械表面：如血压计袖带、听诊器等使用科室：

ICU、NICU、烧伤病房、感染病房、手术室、新生儿病房、移植病房、透析室、血液科食堂等15秒如何使用ATP技术（3）高灵敏度荧光仪可用于：器械清洗效果检测：管腔、内镜、外来器械重点监测；清洗环节监测：酶洗、超声前后的对比建立标准化清洗流程；水质检测：口腔科用水、血液透析、呼吸机湿化罐、医院水塔等器械消毒效果检测：消化内镜、呼吸机管路等5秒其他应用灭菌器械风险评估医用清洗剂评价全自动清洗机的清洗评价水处理设备环节监控空气微生物检测（配合空气采样器）……..非管腔类器械

1、采样时间：清洗后干燥的器械；2、采样面积：100cm2以上只采100cm2,100cm2除手持部位全采；3、采样：佩戴无菌的无粉手套、帽子、口罩，持器械手柄，从试管中取出采样拭子，在器械表面往返涂抹并转动拭子5次，（齿部、关节部、沟槽部可重点涂抹），将拭子放回试管；4、检测：掰断速流阀，挤下试剂，振荡15次，放入仪器检测。

5、结果判定：

RLU＜2000合格、RLU＜2000＜4000警告、RLU＞4000不合格采样要求某三甲医院重点科室物表手卫生（物表)洁净后标准≤

30为合格

30-100为警告

100以上为不合格物表使用中检测标准≤100为合格100-300为警告300以上不合格第一次使用ATP荧光检测仪检测