羟苯磺酸钙颗粒剂在健康人体的药代动力学及生物等效性研究

羟苯磺酸钙颗粒剂在健康人体的药代动力学及生物等效性研究

羟苯磺酸钙是一种改善微循环的药物。另一方面，它可以通过调整微血管壁的生理功能，降低血管渗透性，减少阻力，降低血小板聚集，防止血栓形成，提高红细胞的柔性，间接增加对淋巴管和水肿的引流。另一方面，它可以通过抑制血管活动物质（氨基乙酸胺、5-羟色胺、缓冲剂、透明质酸酶和前列腺素）来改善基底膜伤口的生物合成。目前,国内外关于血浆中羟苯磺酸钙浓度测定方法,均采用高效液相色谱-荧光检测法。本研究建立了一种高效液相色谱-紫外检测法,用于测定羟苯磺酸钙的血药浓度,该方法准确、灵敏,适用于羟苯磺酸钙生物等效性研究,这为为羟苯磺酸钙的临床应用提供科学依据。材料、对象和方法1药品规格设计受试制剂:羟苯磺酸钙颗粒剂,批号为070401,规格为每袋含0.5g,海南凯健制药有限公司生产;参比制剂:羟苯磺酸钙胶囊,批号为508769,规格为每粒含0.5g,依比威药品有限公司生产;对照品:羟苯磺酸钙,批号:20060508;内标:对氨基苯甲酸,批号126K0751,Sigma公司提供。乙腈、冰醋酸,色谱纯,美国Tedia公司;三乙胺,分析纯,国药集团提供;水,自制重蒸水;空白血浆,辽宁省血液中心提供。高效液相色谱仪、L-2400紫外检测器、L-2130输液泵及L-2200全自动进样器,日本日立公司产品;T-2000色谱数据工作站软件,天美科技有限公司产品;A2受试对象的一般资料20名健康志愿者,体质量56～78kg,平均体质量(67.00±6.54)kg;年龄20～25岁,平均年龄(23.0±1.31)岁。受试者均无药物过敏史,无肝、肾疾病史,精神状态良好,全面体格检查均正常(其中包括心电图、心率、血压、肾功能、肝功能等)。受试者在受试前2周内未服过任何药物;试验期间,禁服其他药物及烟、酒、茶和饮料。试验前签署知情同意书。3多次给药、交叉试验用2制剂双周期随机交叉试验设计。将20名受试者随机等分成2组,分别口服羟苯磺酸钙颗粒剂(受试制剂)和胶囊(参比制剂),2次给药间隔为1周,然后进行交叉试验。于服药前和服药后0.5、1.0、2.0、2.5、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0、12.0、16.0、24.0h从静脉采血5mL,置肝素化离心管,离心,取血浆于-20℃冰箱储存,用于血药浓度检测。受试者取血顺序同服药顺序,第2周期采血点及时间均与第1周期相同。4条件1色谱柱为DimaC5样品处理和测量精密量取血浆100μL,置于1.5mL离心管中,精密加入对氨基苯甲酸标溶液(25.88μg·mL-6方法学评价6.1内源性物质不干扰药物和内标的测定空白血和受试者血样色谱图见图1。羟苯磺酸钙保留时间为5.5min左右,内标保留时间为10.0min左右,2者基线分离,表明血浆中的内源性物质不干扰药物和内标的测定。6.2空白血浆中羟苯磺酸溶液的配制精密量取不同浓度的羟苯磺酸标准溶液10μL于7个空白离心管中,加入空白血浆100μL,配制成血浆中羟苯磺酸浓度分别为0.06、0.25、0.99、2.48、4.96、9.91、19.83mg·L-6.3峰峰面积的测定配制成血浆中药物浓度分别为0.12、0.99和9.91mg·L-精密量取羟苯磺酸钙对照品和内标液,加入空白血浆中,按“血浆样品处理方法”项下操作,制备低、中、高3个浓度的样品,氮气吹干,流动相复溶,进样分析,每一浓度进行5个样本分析,获得相应药物峰面积和内标峰面积;另取不同浓度的羟苯磺酸钙标准溶液和内标,配制成浓度分别为0.12、0.99和9.91mg·L-6.4稳定性研究配制成血浆中药物浓度分别为0.12、0.99和9.91mg·L-7处理数据用孙瑞元教授等编制的DASver2.0软件进行处理,t结果1血药浓度曲线20名健康受试者交叉给予羟苯磺酸钙颗粒剂和胶囊后,血药浓度-时间曲线见图2。2药房动态参数20名健康受试者口服参比制剂和受试制剂后,羟苯磺酸钙颗粒剂的血药浓度-时间曲线,经计算机拟合得药代动力学参数,见表2。3等生物评价以参比制剂为参比品,受试制剂为供试品,第1、2次给药分别为周期1和2,用DASver2.0软件程序对实测t4安全评估20名受试者在2次给药期间,耐受性良好,受试者服药前后的血压、心电图和血常规、血生化检验均在正常范围内,未发现有药物不良反应。种制剂间的比较用高效液相色谱法测定血浆中羟苯磺酸钙浓度已有报道2种制剂的主要药代动力学参数经对数转换后,方差分析显示,在2种制剂间无显著性差异(P>0.05)。进一步