霍乱及其诊断与治疗课件整理-003

乱及其珍断与疗《霍乱防治手册(2019年第六版)》乱及其珍断与疗1病原学弧菌与霍乱弧菌生物分类:弧菌科→盐弧菌属发光杆菌属弧菌属→霍乱弧菌副溶血弧菌河弧菌拟态弧菌麦氏弧菌霍利斯弧菌溶藻弧菌弗尼斯弧菌创伤弧菌海鱼弧菌鲨鱼弧菌辛辛那提弧菌病原学2可在人群中引起霍乱暴发、大流行群霍乱弧菌→古典生物型埃尔托生物型s群霍乱弧菌(二)、形态与染色形态:短小稍弯曲的杆状或圆杆状菌无芽胞、无荚膜菌体两端稍平或钝圆长1.5~20m、宽0.3-0.4m菌体单端有一长达菌体4~5倍鞭毛,为其极为活泼运动提供动力○139电镜下见菌体外周包绕一层较薄的荚膜染色:革兰氏染色阴性(三)、基因组霍乱弧菌有两个环状染色体染色体Ⅰ:大部分霍乱弧菌生存所需基因位于此染色体Ⅱ可在人群中引起霍乱暴发、大流行3∞群和∞139群霍乱弧菌产毒株具有霍乱毒素基因和携带毒素基因的溶原性噬菌体CTXφ基因簇不同血清群霍乱弧菌的基因组差异较大(四)、培养特性普通培养基上生长良好兼性厌氧生长温度16°~42°C。37°C培养适宜钠离子刺激生长,但8%氯化钠环境中不能生长可繁殖pH为6-9.2,7.2-7.4适宜。pl8.2-8.6(有用9.2)选择性或增菌培养基可抑制其细菌生长,用于霍乱弧菌的初分离霍乱弧菌在碱性培养基中培养最初数小时生长速度可超过大肠杆菌,O1群2-3小时在培养液表面形成菌膜;一般6-8小时取液体上层生长物作霍乱弧菌分离用选择性培养基可提高霍乱弧菌检出率,包括强选择性的分离培养基:硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂庆大霉素琼脂4号琼脂∞群和∞139群霍乱弧菌产毒株具有霍乱毒素基因和携带毒素基4弱选择性分离培养基:碱性琼脂碱性胆盐琼脂五)、生化特性糖发酵发酵、产酸不产气葡萄糖麦芽糖甘露糖蔗糖半乳糖果糖糊精可溶性淀粉迟缓发酵乳糖不发酵阿拉伯糖卫茅醇水杨素木胶糖侧金盏花醇肌醇弱选择性分离培养基:碱性琼脂5凝集鉴定源于粪便标本可疑霍乱弧菌菌落可直接用○群/○3群诊断血清或单抗行凝集鉴定无血清或单抗时,下列生化试验前四项有辅助筛选作用生化试验氧化酶试验:可区分肠杆菌科细菌粘丝试验:有助于区分非弧菌(如气单胞菌属细菌)克氏双糖铁和三糖铁琼脂:可用于排除假单胞菌属及部分肠杄菌科细菌赖氨酸铁琼脂:有于筛选气单胞菌属和不产生赖氨酸脱羧酶的其它弧菌弧菌抑制剂◎/129敏感试验:O1群90%以上敏感(大部分○13具抗性)V-P试验:大多数埃尔托型阳性;古典型少数例外均阴性:○3多阳性凝集鉴定6(六)抗原构造与血清分型○抗原:菌体表面脂多糖抗原血清群:依○抗原不同,已将霍乱弧菌鉴定出210余个血清群O群、O3群及其非○1群/非○139群H抗原:霍乱弧菌的鞭毛抗原所有霍乱弧菌的鞭毛抗原均相同A、B、C抗原因子:○群霍乱弧菌菌体抗原的不同成分其中:A为群特异性、B、C为型特异性抗原○i群血清型:小川型一含A抗原因子、B抗原因子及少量C因子成分稻叶型一含A因子、C因子彦岛型一含A因子、B因子、C因子;为中间型厂bT基因表达正常表现为小川型;当bT基因变异或其产物功能低下时表现为稻叶血清型(七)毒力因子与致病性毒力因子:霍乱毒素CT:致泻毒素中最强烈的A-B亚单位型蛋白毒素。27.2kDa的A亚单位有毒素的生物活性部分A1多肽和连接A1与B亚单位的A2多肽组成(六)抗原构造与血清分型76kDa负责毒素与宿主细胞膜表面受体(GMl神经节苷脂)结合的B亚单位,介导CT-A亚单位进入细胞编码CT毒素的基因:霍乱弧菌中,溶原性噬菌体CTX中基因组的一部分cAB基因CTX中能以霍乱菌毛TCP为受体感染具有TCP的非产毒霍乱弧菌携带cAB基因水平转移,使非产毒株转变为产毒株霍乱肠毒素的检测:生物学检查法免疫学测毒法分子生物学检测定居因子:重要的是TCP,属于Ⅳ型菌毛,主要亚单位为TcpATCP直径3-7m、长5-10μm存在于菌体周身表面可聚成東ACP(辅助定居因子血凝素脂多糖外膜蛋白其它菌毛其它毒素:溶血素/溶细胞素RⅨX外毒素s热定等等6kDa负责毒素与宿主细胞膜表面受体(GMl神8(八)、耐药性我国监测资料:○群(埃尔托型菌株):敏感率95%以上氨苄西头孢曲松、诺氟沙星、氯霉素、多西环阿奇霉素、呋喃妥因、庆大霉素阿米卡星耐药率升近30%萘啶酮酸、四环素、复方新诺明○139群:存在多重耐药性,)50%菌株对氯霉素、卡那霉素、萘啶酮枝、四环素、氨苄西林、复方新诺明耐药大部分对链霉素、红霉素、多粘菌素B耐药或中度耐药(九)、表型变异环境、宿主、培养条件、抗生素等多种选择性压力作用下产生形态变异:人工培养基上保存稍久成直杆状失去动力S-R变异:菌落的光滑型向粗糙型变异,用粗糙型血清做玻片凝集试验检是否粗糙型(八)、耐药性9皱褶型菌落培养传代菌株常见,不同于粗糙型粗糙型与皱褶型菌落由于分泌更多胞外多糖生物膜形成増强,对氯化水、渗透压、氧化应激等有更强抵抗力型:菌株细胞壁缺损可岀现L型,菌落呈油煎蛋样。L型培养基才能检岀活的非可培养状态(VBNC):是霍乱弧菌在外环境水体中长期存活的非常重要的方式菌体表现为收缩变形,胞壁、胞膜结构变化显著;胞质密度增大蛋白质、核糖体、DNA组成变化。条件适宜时可再次回到可培养状态但ⅤBNC状态下的细菌仍保持胞完整,有低水平的呼吸作用及代谢活性存在一些基因表达,无正常生长状态下的细胞分裂溶血性变异:○1群的埃尔托型存在稳定的溶血株稳定的不溶血株培养传代时可发生转换,可存在溶血与不溶血的混合型(十)、环境生存、存活力与抵抗力环境生存:霍乱弧菌是沿海河口微生物生态系统中重要组成部分,非○群与非○3群菌株更易在环境水体中分离到。非流行区及远离霍乱病人污染的地区,环境水体中分离到的○l群一般不产生CT毒素皱褶型菌落培养传代菌株常见,不同于粗糙型10霍乱及其诊断与治疗课件整理_00311霍乱及其诊断与治疗课件整理_00312霍乱及其诊断与治疗课件整理_00313霍乱及其诊断与治疗课件整理_00314霍乱及其诊断与治疗课件整理_00315霍乱及其诊断与治疗课件整理_00316霍乱及其诊断与治疗课件整理_00317霍乱及其诊断与治疗课件整理_00318霍乱及其诊断与治疗课件整理_00319霍乱及其诊断与治疗课件整理_00320霍乱及其诊断与治疗课件整理_00321霍乱及其诊断与治疗课件整理_00322霍乱及其诊断与治疗课件整理_00323霍乱及其诊断与治疗课件整理_00324霍乱及其诊断与治疗课件整理_00325霍乱及其诊断与治疗课件整理_00326霍乱及其诊断与治疗课件整理_00327霍乱及其诊断与治疗课件整理_00328霍乱及其诊断与治疗课件整理