催乳素测定标准操作规程

催乳素测定标准操作规程1检验原理：ARCHITECT催乳素项目采用延迟两步法免疫检测，运用Chemiflex技术，即化学发光微粒子免疫检测技术(CMIA)与灵活的检测模式的结合，定量测定人血清和血浆中的催乳素。第一步，将样本和催乳素抗体（小鼠，单克隆）包被的顺磁微粒子混合。样本中的催乳素与催乳素（小鼠，单克隆）抗体包被的微粒子结合。冲洗后进入第二步，加入吖啶酯标记的催乳素抗体结合物。将预激发液和激发液加入反应混合物中。测量产生的化学发光反应，以相对发光单位（RLUs）表示。样本中的催乳素含量与ARCHITECTi光学系统检测到的RLUs值之间成正比。2.试剂主要组成成分2.1试剂盒微粒子：催乳素抗体（小鼠，单克隆）包被的微粒子，储存于含有蛋白（牛和鼠）稳定剂的三羟甲基氨基甲烷（TRIS）缓冲液中。最低浓度：0.1%固体物质。防腐剂：抗菌剂。结合物：吖啶酯标记的催乳素抗体（小鼠，单克隆）结合物，储存于含有蛋白（鱼和牛）稳定剂的磷酸盐缓冲液中。最低浓度：0.05μg/mL。防腐剂：ProClin。2.2需要但未提供的试剂预激发液：预激发液含有1.32%（W/V）过氧化氢激发液：激发液含有0.35N氢氧化钠浓缩清洗缓冲液：浓缩清洗缓冲液含有磷酸盐缓冲液。防腐剂：抗菌剂。3.样本要求：人血清（包括采集于血清分离管中的血清）或采集于肝素或EDTA钾抗凝管中的血浆。血清和血浆样本中应不含纤维蛋白、红细胞或其他颗粒物质。2-8℃可保存7天；-10℃以下可保存12个月。样本应避免反复冻融。4.检验方法：仪器法（详见雅培i1000标准操作规程）5.参考范围样本参考范围（ng/L）血清、血浆男性3.46-19.40女性5.18-26.536.6.检验结果的解释催乳素项目通过四参数Logistic曲线拟合数据约简法（4PLC,Y加权）生成一条校准曲线7.检验方法的局限性7.1检测结果用于诊断时，应当与其他数据，如症状、其他检测结果、临床表现等结合使用。7.2催乳素检测结果与临床表现不符时，需要通过附加试验来验证检测结果。7.3接受小鼠单克隆抗体制剂诊断或治疗的患者，其样本中可能含有人抗小鼠抗体（HAMA）。使用含有小鼠单克隆抗体的试剂盒检测此类样本时，检测值可能会假性升高或降低。可能需要其他信息用于诊断。7.4人血清中的异嗜性抗体可与试剂中的免疫球蛋白发生反应，干扰体外免疫测定。经常与动物或动物血清产品接触的患者，其样本可能容易受到此干扰，并使检测结果出现异常值。可能需要其他信息用于诊断。7.5催乳素可能以其他结构形式（例如，巨催乳素）存在，这些催乳素可能会表现出不同水平的生理活性。催乳素检测结果升高的患者，需要参考其他信息才能明确诊断。8.产品性能指标8.1分析灵敏度：经计算，ARCHITECT催乳素检测的分析灵敏度小于0.6ng/mL(n=24)。分析灵敏度被定义为ARCHITECT催乳素MasterCheck水平0（0.0ng/mL）的RLU均值加上两个标准差的浓度，表示催乳素区别于零的最低检出浓度。8.2分析特异性：催乳素含量为13-16ng/mL的人血清样本中加入特定水平的尿促卵泡素（FSH）、人绒毛膜促性腺激素（hCG）、人生长激素（hGH）、人胎盘催乳素（hPL）、黄体生成素（LH）或促甲状腺激素（TSH）。结果如下。潜在交叉反应物检测浓度交叉反应率（%）FSH1,000mIU/mL0Hcg100,000mIU/mL0hGH1,000ng/mL0.03hPL100,000ng/mL0LH5,000mIU/mL0.001TSH20,000μIU/mL08.3精密度是根据美国临床和实验室标准研究所（CLSI，前身为NCCLS）的EP5-T2方案进行的。在精密度试验中，使用同一批号的试剂，对一个由3份蛋白质缓冲基质样本组成的测试盘，每天在2个不同的时间在两台仪器上各检测2次，共进行20天。研究数据总结于下表。检测盘试剂批号仪器n浓度均值（ng/mL）批内总SD%CVSD%CV111806.930.2663.80.3234.7112807.050.2233.20.3104.42118018.240.5372.90.7484.12128017.920.4772.70.6553.73118035.861.0963.11.3023.63128035.250.7932.31.1653.39.临床意义：人催乳素（hPRL）含199个氨基酸，是一条单链多肽，分子量大约是23,000道尔顿。经过1965年至1971年期间的一系列试验证实，它作为一个区别于生长激素的独立化学实体存在。催乳素由垂体前叶分泌，受下丘脑催乳素抑制因子和催乳素释放因子生理性调控。促甲状腺素释放激素（TRH）给药后，血液中很快出现催乳素。催乳素的主要生理功能是促发和维持女性泌乳。高催乳素血症被认为是男女不孕和生殖腺紊乱的主要原因。催乳素可以抑制卵巢类固醇的分泌、干扰卵泡成熟以及抑制女性体内黄体生成素（LH）和尿促卵泡素（FSH）的分泌。血清催乳素水平升高为垂体功能紊乱提供了第一个量化证据。经量化的催乳素水平同样用于评估和监测闭经和溢乳患者。除了疾病状态以外还有多种因素会影响催乳素的水平。造成催乳素水平上升的因素包括：妊娠、乳腺刺激、精神紧张、性生活和使用雌激素、孕酮和雄激素、某些精神类药物和抗高血压药物以及TRH治疗。降低催乳素浓度的因