尿素测定标准操作规程

尿素测定标准操作规程1.检验原理：（酶偶联检测法）尿素经脲酶催化水解生成氨与二氧化碳，在谷氨酸脱氢酶催化下，氨与α-酮戊二酸、还原型辅酶Ⅰ（NADH）作用生成谷氨酸与氧化型辅酶Ⅰ（），还原型辅酶Ⅰ在340nm波长处有吸收峰，而氧化型辅酶Ⅰ几乎无吸收峰，还原型辅酶Ⅰ在340nm吸光度的下降速率与样品中尿素含量成正比。尿素+22+Α-酮戊二酸++NADH+L-谷氨酸++2.试剂主要组成成分组成成分浓度R1三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH6.15）150mmol/L二磷酸腺苷（ADP）0.6mmol/L脲酶8000U/L谷氨酸脱氢酶700U/LR2三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH6.15）150mmol/Lα-酮戊二酸15mmol/L还原型辅酶Ⅰ0.8mmol/LSTD尿素（水基质）7.14mmol/L3.样本要求：新鲜无溶血血清。在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！样本中抗坏血酸含量≤0.3g/L、胆红素含量≤0.4g/L、血红蛋白含量≤5.0g/L、脂血含量≤5.0g/L对检测结果基本无影响。4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：样本参考范围（mmol/L）血清2.9-8.26.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释不超过10倍。6.2.单位换算：mg/dl=mmol/L×6.027.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7.2若试剂浑浊，或以水空白在340nm处吸光度小于1.000时不能使用。7.3检验结果仅供参考，不作为临床诊断的唯一依据。8.试剂性能指标8.1试剂外观：无色透明液体，无悬浮物及沉淀。8.2装量：不低于标识值。8.3试剂空白8.3.1试剂空白吸光度：在340nm处，光径1cm时，空白吸光度A≥1.0008.3.2试剂空白吸光度变化率：在340nm处，光径1cm时，△A/min≤0.004.8.4线性区间：试剂的线性区间为[0.9-35.7]mmol/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[0.9-4.0]mmol/L区间内，线性绝对偏差不超过±0.4mmol/L；[4.0-35.7]umol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。8.5准确度：相对偏差应不大于±15%。8.6分析灵敏度：在340nm处，光径1cm时，测量1mmol/L的尿素时，吸光度变化△Ammol/L≥0.0018.7精密度8.7.1批内精密度：CV≤5%8.7.2批间精密度：R≤10%8.8校准品8.8.1外观：无色透明液体。8.8.2净含量：不少于标识值8.8.3准确度：标准生化分析仪和试剂后，测定校准品，相对偏差应不大于10%。8.8.4均一性：瓶间均一性：CV≤5%9.临床意义：尿素测定是肾功能最广泛应用的试验，本试验常与肌酐同时测定，用于肾前性高尿素血症（心脏代谢失常、脱水、蛋白分解代谢增加）、肾性高尿素血症（肾小球性肾炎、慢性肾炎、多囊肾、肾硬变、肾小管坏死）和肾后性高尿素血症（尿路梗阻）的鉴别诊断。尿素是蛋白质