常用培养基的制备课件

技能训练3

常用培养基的制备技能训练3

常用培养基的制备1熟悉培养基制备的基本程序会制备常用的培养基

实训目标熟悉培养基制备的基本程序实训目标2高压蒸气灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、营养琼脂培养基（或伊红美兰琼脂培养基、三糖铁琼脂培养基、SS琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基）等仪器材料高压蒸气灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、量筒、漏斗、试管、培3方法步骤（一）营养琼脂培养基（二）血液琼脂培养基（三）肉汤培养基（四）半固体培养基方法步骤（一）营养琼脂培养基4（一）营养琼脂培养基计算称量溶化倒平板或倒试管灭菌无菌检验备用（一）营养琼脂培养基计算51．计算：根据营养琼脂培养基的说明书了解营养琼脂粉与水的比例，一般是1000ml蒸馏水中应加营养琼脂粉31.3g，再根据培养基的需要量确定营养琼脂粉的用量。营养琼脂粉的量=31.3×15×n/1000（g）其中：15代表一个平板需要营养琼脂约15ml；n代表要做的培养基平板的数量1．计算：根据营养琼脂培养基的说明书了解营62．称量：用普通天平准确称量出营养琼脂粉的量，用量筒量出相应的蒸馏水的量，要尽量准确。2．称量：用普通天平准确称量出营养琼脂粉的量，用量筒量出相应73．溶化：将营养琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中，于电炉上加热溶化，边加热边搅拌，沸腾时立即从电炉上拿下，等泡沫消失后再放在电炉上加热，注意不能让琼脂溢出，煮沸2—3次。3．溶化：将营养琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中，于电炉上加热溶化84．倒平板或倒试管分装：若做平板培养基应倒于培养皿中，每板约15ml左右，以刚好覆盖平皿底为易。若做斜面培养基应倒入试管中，量为试管的1/34．倒平板或倒试管分装：若做平板培养基应倒于培养皿中，每板约95．灭菌：用高压灭菌器灭菌将平板培养基整齐地平放入高压灭菌器的内筒中，将试管口盖上棉塞或橡胶塞，用纸包扎好，直立放入内筒中，在121.3℃灭菌20-30min。灭菌完毕后，将平板培养基拿出平放于桌面，凝固前勿动；将试管培养基摆成斜面，凝固前勿动。5．灭菌：用高压灭菌器灭菌将平板培养基整齐地平放入高压灭菌器106．无菌检验：随机抽取几个平板或试管培养基于温箱中培养24小时，若无菌生长则为合格。6．无菌检验：随机抽取几个平板或试管培养基于温箱中培养24小117．备用：将合格的平板培养基和试管培养基放入冰箱，在0-4℃中保存备用。7．备用：将合格的平板培养基和试管培养基放入冰箱，在0-4℃12（二）血液琼脂培养基将灭菌的营养琼脂冷至45～50℃，以无菌操作，加入5%～10%的无菌血液（或脱纤维血），然后倾注平皿或分装试管制成斜面。（二）血液琼脂培养基将灭菌的营养琼脂冷至45～50℃，以无菌13（三）肉汤培养基1．成分牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。2．制法将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠加蒸馏水后，加热溶解。矫正pH至7.4～7.6，过滤分装。置高压蒸气灭菌器内，121.3℃灭菌20min即成。3．用途可供一般细菌生长，同时也是制作一般培养基的基础原料。供营养要求较高的细菌分离培养，亦可供溶血性的观察和保存菌种。（三）肉汤培养基1．成分牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，氯14（四）半固体培养基肉汤培养基中加入0.3%～0.5%琼脂粉制成，用于菌种的保存或观察细菌的运动性。（四